МИКРООРГАНИЗМЫ ИНФИЦИРУЮЩИЕ НИЖНИЕ ДЫХАТЕЛЬНЫЕ ПУТИ БОЛЬНОГО МУКОВИСЦИДОЗОМ (МВ) ОПРЕДЕЛЯЮТ ЛЕЧЕНИЕ, КАЧЕСТВО ЖИЗНИ, ПЕРСПЕКТИВЫ ДЛЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ И ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИ. ТОЧНАЯ И СВОЕВРЕМЕННАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИЙ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ ИМЕЕТ ВАЖНОЕ ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ОБЕСПЕЧЕНИЯ СВОЕВРЕМЕННОГО НАЧАЛА ЛЕЧЕНИЯ СООТВЕТСТВУЮЩИМИ АНТИБИОТИКАМИ С ЦЕЛЬЮ ЭЛИМИНАЦИИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПАТОГЕНОВ И ОРГАНИЗАЦИИ НАДЛЕЖАЩЕГО ИНФЕКЦИОННОГО КОНТРОЛЯ С ЦЕЛЬЮ ПРОФИЛАКТИКИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ СРЕДИ БОЛЬНЫХ МВ. ПРАВИЛЬНАЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРЕДСТАВЛЯЕТ ТРУДНОСТИ, ТАК КАК МИКРОБНАЯ ФЛОРА ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ У ТАКИХ БОЛЬНЫХ ПРЕДСТАВЛЕНА ЧАСТО АССОЦИАЦИЯМИ, А НЕКОТОРЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ ПРОЯВЛЯЮТ АТИПИЧНЫЕ ДЛЯ СВОЕГО ВИДА ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА, НАПРИМЕР АУКСОТРОФНЫЕ P. AERUGINOSA И SCV (SMALL COLONY VARIANTS - ФЕНОТИП МЕЛКИХ КОЛОНИЙ) S. AUREUS. ДОМИНИРУЮЩИЕ ВОЗБУДИТЕЛИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ • • • • • • • • • • Установлено, что доминирующими возбудителями инфекции легких у больных муковисцидозом, являются Р. aeruginosa (ассоциация Р. aeruginosa + S. aureus 18,2%), S. aureus, H.influenzae, бактерии комплекса B.cepacia (Всс) (ассоциация Р. aeruginosa+Bcc 9,1%) Показано, что в первые годы жизни у больных муковисцидозом доминирует Staphylococcus aureus, затем основным возбудителем становится Р. aeruginosa. Хроническая моно- или смешанная инфекция к 18 годам у 80%. В лаборатории молекулярной эпидемиологии госпитальных инфекций собрана коллекция из более 1000 штаммов доминирующих микроорганизмов, выделенных от пациентов с муковисцидозом детей и взрослых . В течение более 10 лет осуществляется мониторинг хронической инфекции у больных муковисцидозом. Результаты позволили провести ряд профилактических мероприятий. Алгоритм идентификации Всс Северо-западный АО Дальневосточный АО B.cenocepacia ST709 B.contaminans ST102 B.cenocepacia ST241 B.vietnamensis ST729 Центральный АО B.cenocepacia ST709 Приволжский АО (Татарстан) B.cenocepacia ST709,ST708 и ST208 ЮЖНЫЙ АО B.cenocepacia ST208 B.cenocepacia ST709 № ФИО, возраст, дата Результаты лаб. Мол. Эпид. Госпит. инфекций Методы лаб. Мол.эпид госпит инф. Результаты лаб. Анализа геномов (получение ДНК непосредственно из мокроты) 187 Б-на 16 23.10.12 B.cepacia 4х102 S.epidermidis 101 Candida spp. -103 Посев на пит. Среды (рост на BCSA) PCR : 3A и CeMuVi+ ложноположит. р-я A.xylosoxidans 200 Л-л 16 20.11.12 B.cepacia 104 3A S.aureus102 Candida spp. -103 Посев на пит. Среды PCR : 3A и CeMuVi+ Положительные B.cenocepacia 709 206 Г-ва 10 23.11.12 B.cepacia 103 3А Enterococcus spp. 102 Neisseria subflava 102 Streptococcus spp. -102(ά гем) S.epidermidis 10 Candida spp. -101 Посев на пит. Среды PCR : 3A и CeMuVi+ положительные B.cenocepacia 709 286 Б-на 19 13.03.13 Candida spp. - 103 A.xylosoxidans 103 Посев на пит. Среды PCR : 3A и BCRОтрицательные ПЦР: ACHR+ A.xylosoxidans 304 К-ва , 16 20.05. S.viridans 103 Candida spp. - 102 A.xylosoxidans 103 Neisseria subflava 103 S.epidermidis 5х101 Посев на пит. Среды PCR : 3A и BCRОтрицательные ПЦР: ACHR+ Streptococcus sp. Отдельно штамм A.xylosoxidans 286 Б-на 19 13.03.13 Candida spp. - 103 A.xylosoxidans 103 Посев на пит. Среды PCR : 3A и BCRОтрицательные ПЦР: ACHR+ A.xylosoxidans 287 К-в 13.03.13 P.aeruginosa - 103 B.cepасia 3А 3х105 Candida spp. - 1КОЕ Enterococcus spp. (гем-) - 103 Посев на пит. Среды PCR : 3A и BCR+ положительные B.cenocepacia 709 299 C-на 13 15.04.13 Candida spp. - 101 Streptococcus spp. -103(ά гем) Неферм. Мо !03 Посев на пит. Среды Тесты не прошли P.aeruginosa, Prevotella spp., Firmicutes (Staphilococcus sp) 311 C-на 13 15.04.13 S.maltophilia 2x101 S.epidermidis 2x101 Candida spp. 101 Посев на пит. Среды Biomerieux Prevotella spp. 244 Т-ов, 23 24.12.12 P. aeruginosa - 103 Streptococcus spp. -103(ά гем) Candida spp. - 103 S.maltophilia - 104 Посев на пит. Среды Biomerieux S.maltophilia 267 Г-oв 8 08.-2.13 P.aeruginosa 106 (немукоидный фенотип) P.aeruginosa 106 (мукоидный фенотип) Candida spp. - 104 S.epidermidis 103 P.putida 104 Посев на пит. Среды Тесты P.aeruginosa Штаммы 709 генотипа представляют опасность для пациентов с муковисцидозом. 1.Молекулярно-генетические методы RAPD-ПЦР, пульсэлектрофорез и мультилокусное секвенирование позволили подтвердить способность штаммов 709 генотипа длительно персистировать в организме больного муковисцидозом в ассоциации с другими микроорганизмами Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida spp. и др. 2.Идентичность штаммов, выделенных от госпитализированных больных, и отсутствие бактерий Bcc на предметах, в больничной среде, доказывает передачу этих штаммов от человека к человеку при стационарном лечении. Мониторинг возбудителей хронической инфекции легких у больных муковисцидозом. Задачи: 1.Установить долю хронической инфекции легких, особенности персистенции возбудителей P.aeruginosa и S.aureus. 2.Установить основные источники возбудителей хронической инфекции у больных муковисцидозом, вызванной P.aeruginosa и S.aureus. 3.Установить уровень эрадикации возбудителей при лечении обострений хронической инфекции легких антимикробными препаратами. 4. В случаях эрадикации возбудителей и при новых обострениях установить возможные механизмы ремиссии инфекции. 5. В процессе мониторинга выявить эволюцию возбудителей и установить гены, подвергающиеся наибольшей изменчивости при персистенции возбудителя.