VAGITEST

VAGITEST
Описание
VAGITEST – готовая к применению система с плотными питательными средами на
пластиковой основе для детекции гемофильных бактерий, лактобактерий, Gardnerella
vaginalis и патогенных нейссерий. Также системы обычно называются “дип-слайды”.
Результаты, полученные с Vagitest, могут использоваться для помощи в диагностике
вагинальных инфекций и должны использоваться вместе с данными истории болезни
пациента. Vagitest доступен в версии на 10 и 120 тестов.
Содержание упаковки
Каждая упаковка Vagitest содержит:
• 10 готовых к использованию систем для культуральной диагностики (дипслайды) и 10 таблеток для генерации СО2 для версии на 10 тестов; 120 готовых
к использованию систем для культуральной диагностики (дип-слайды) и 120
таблеток для генерации СО2 для версии на 120 тестов;
• 1 инструкция.
Схема
Vagitest доступен в конфигурации, показанной в таблице №1.
Таблица №1
1. Шоколадный агар
(коричневый)
VAGITEST (код 50020 и код 51020)
2. Rogosa агар
3. Thayer Martin агар
(янтарный)
(коричневый)
Принцип метода
Vagitest, инокулируемый клиническим материалом (вагинальный секрет,
уретральный секрет и т.д.), позволяет исследовать гемофильные бактерии, лактобактерии,
Gardnerella vaginalis и патогенные нейссерии. Шоколадный агар – питательная среда,
обогащенная дефибринированной лошадиной кровью и добавкой “Vitalex Growth
Supplement”– смесь, содержащая витамины, кофакторы, аминокислоты и углеводы,
необходимые для выделения патогенных гемофильных бактерий: Gardnerella vaginalis,
патогенных нейссерий и других требовательных микроорганизмов. Thayer Martin агар
содержит обогащенную питательную среду, характерную для шоколадного агара, но
прибавление VCAT – добавки делает ее селективной средой для выделения патогенных
нейссерий из клинических образцов. VCAT-добавка - это смесь антибиотиков:
ванкомицина и колистина, которые ингибируют рост грам-положительных и грамотрицательных контаминатов, антимикотик амфотерицин предупреждает рост грибов, в то
время как триметоприм блокирует синтез и группирование протеинов.
Rogosa агар – селективная питательная среда для выделения лактобактерий орального,
вагинального и фекального происхождения. Его селективность обеспечивается низким рН
и высокой концентрацией ацетатов, которые препятствуют росту других бактерий, таким
образом, защищая лактобактерии.
Типичная формула питательных сред, используемых в Vagitest (грамм/литр)
Шоколадный агар
Пептон
Крахмал
Двухосновной фосфат калия
Одноосновной фосфат калия
Хлорид натрия
Дефибринированная
лошадиная кровь
Витаминная ростовая добавка
Агар
рН 7,2 +/- 0,2
Rogosa агар
15,0
1,0
4,0
1,0
5,0
50,0 мл
10,0 мл
17,0
Триптоза
Дрожжевой экстракт
Глюкоза
Арабиноза
Сахароза
Ацетат натрия
Цитрат аммония
Одноосновной фосфат калия
Сульфат магния
Сульфат марганца
Сульфат железа
Агар
Твин 80
рН 5,4 +/- 0,2
Thayer Martin агар
10,0
5,0
10,0
5,0
5,0
15,0
2,0
6,0
0,57
0,12
0,03
15,0
1 мл
Пептон
Крахмал
Двухосновной фосфат калия
Одноосновной фосфат калия
Хлорид натрия
Дефибринированная
лошадиная кровь
Витаминная ростовая добавка
Ванкомицин
Колистин
Амфотерицин
Триметоприм
Агар
15,0
1,0
4,0
1,0
5,0
50,0 мл
10,0 мл
0,002
0,0075
0,001
0,003
15,0
рН 7,2 +/- 0,2
Сбор и сохранение образцов
Соберите вагинальный секрет 2-мя тампонами из синтетического волокна, один для
окраски по Граму, другой - для выделения микроорганизмов. Для сбора и хранения
образцов для исследования на гонококки рекомендуется использовать транспортную
среду Amies. Образцы для детекции менингококка не должны храниться, следует сразу
отправить их в лабораторию.
Ход исследования
1. Выньте дип-слайд из холодильника и доведите его до температуры окружающей
среды в течение 5 минут.
2. Идентифицируйте образцы с помощью клейкой этикетки или напишите данные
непосредственно на контейнере дип-слайда.
3. Отвинтите и выньте слайд из его цилиндрического контейнера, не прикасаясь к
поверхности питательной среды.
4. Держите слайд за крышку, засейте поверхности питательной среды клиническим
материалом (вагинальным секретом, уретральным секретом и т.д.), взятым
подходящим тампоном.
5. Внесите СО2 – таблетку, увлажненную каплей стерильной воды, в контейнер
слайда.
6. Поместите слайд обратно в контейнер и плотно завинтите крышку.
7. Инкубируйте при t = 36 +/- 1о С 24-48 часов.
Интерпретация результатов
О наличии бактерий свидетельствует наличие колоний на поверхности питательной
среды после инкубации. Питательная среда используется для оценки качества и
количества различных типов микроорганизмов, которые поддерживают инфекцию или
составляют нормальную вагинальную флору, таких, как лактобактерии. Гонококки растут
на шоколадном агаре или на Thayer Martin агаре в виде колоний от 0,5 до 1 мм белого или
серого цвета, непрозрачных и возвышающихся. Предполагаемые колонии гонококков
идентифицируются окраской по Граму, оксидазным тестом и тестами ферментации
сахаров. Колонии менингококков больше, чем гонококков, по форме круглые и выпуклые.
Gardnerella vaginalis растет на шоколадном агаре в виде сероватых полупрозрачных
колоний. Гемофильная палочка
растет на шоколадном агаре в виде сероватых
полупрозрачных колоний. Лактобактерии растут на Rogosa-агаре в виде бело-серых
колоний с ровными краями, которые могут быть плоскими или приподнятыми, гладкими
или шероховатыми. На этой среде растут не все лактобактерии.
Контроль качества
Vagitest подвергается контролю качества: дип-слайды инокулируются штаммами
микроорганизмов,
указанными
в
таблице
№2,
разведенными
стерильным
физиологическим раствором так, чтобы получить:
1. плотность инокулюма для продуктивности: 10-100 КОЕ/мл
2. плотность инокулюма для селективности: 104-105 КОЕ/мл
3. плотность инокулюма для специфичности: ≤104 КОЕ/мл
4. условия для инкубации: 24-48 часов при t = 36 +/- 1о С в атмосфере обогащенной
СО2 (таблетки поставляются с упаковкой).
Результаты интерпретируются, как показано в таблице №2. Также проверяется внешний
вид питательной среды; цвет питательной среды смотрите в разделе “Схема” табл.№1.
Таблица №2. Используемые штаммы и теоретические результаты контроля качества.
Микроорганизм
Шоколадный агар
Rogosa агар
Thayer Martin агар
Escherichia coli ATCC 25922
Рост
Рост подавлен
Рост подавлен
Enterococcus faecalis ATCC 19433
Рост
Рост подавлен
Рост подавлен
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Рост
Рост подавлен
Рост подавлен
Gardnerella vaginalis ATCC 14018
Рост
Рост подавлен
Рост подавлен
Neisseria gonorrhoeae ATCC 43069
Рост
Рост подавлен
Рост
Рост подавлен
Рост
Рост подавлен
Lactobacillus casei ATCC 393
Ограничения и примечания
Для сбора клинического материала для исследования используйте тампоны из
синтетического волокна, не хлопковые. Все подозрительные колонии, культивируемые на
Vagitest-среде, должны быть подвергнуты идентификации.
N.lactamica также растет на Thayer Martin агаре. Сообщалось, что 3-10% гонококков
(обычно AHU-штаммы) чувствительны к ванкомицину и не растут на Thayer Martin агаре
(Mirrett et al., 1981). Эти штаммы могут быть получены на шоколадном агаре.
Пролонгированная инкубация (более 24 часов) может вызвать чрезмерный рост
сопутствующей бактериальной флоры на Thayer Martin агаре, и это может скрыть рост
гонококков. Не используйте таблетки, генерирующие СО2, если они сломаны или
влажные, или если повреждена упаковка.
Меры предосторожности
Описанные здесь среды не классифицируются как опасные по действующему
законодательству, так как они не содержат вредных субстанций в концентрации ≥ 1%.
Поэтому паспорт безопасности для них не требуется.
Vagitest – продукт для одноразового использования, который предназначен только для invitro диагностики. Следует использовать только в профессиональных условиях
лаборатории квалифицированным персоналом, с соблюдением правил асептики и
безопасности при работе с патогенными агентами.
Хранение дип-слайда
Храните при температуре 2-8о С в оригинальной упаковке. Держите вдали от
источников тепла и избегайте значительных колебаний температуры. В таких условиях
продукт будет оставаться годным до окончания срока годности, указанного на этикетке.
Не используйте по истечении данного срока. . Утилизируйте, если имеются признаки
повреждений (значительное изменение цвета питательных сред, высыхание или
отставание питательной среды от поддерживающей основы, наличие колоний грибов или
бактерий). Не замораживайте!
Утилизация использованного материала
После использования Vagitest и материалы, которые контактировали с образцом,
необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с лабораторной методикой
обеззараживания и утилизации потенциально инфицированного материала.
Литература
1. Kellogg D.S., Holmes, K.K., Hill G.A. (1976). Laboratory Diagnosis of Gonorrhea.
Cumitech 4, American Society for Microbiology. Washington, D.C.
2. Martin, J.E. and Lester, A. (1971) HSMHA Health Reports. 86, 30-33.
3. Martin, J.E., Armstrong, J.H., Smith, P.B. (1974). App. Microbiology 27, 802-805.
4. Mickelsen P. et al., (1977) J.Clin. Microbiol, 5, 488.
5. Mirrett, S.L., Reller, L.B., Rnapp, J.S. (1981) J.Clin. Microbiol. 14, 94-99.
6. Thayer, J.D. and Martin, J.E. (1966). Public Health Reports. 81, 559-562.
ПРЕДСТАВЛЕНИЕ
VAGITEST
10 дип-слайдов
50020
120 дип-слайдов
51020
ТАБЛИЦА СИМВОЛОВ
СИМВОЛ
ЗНАЧЕНИЕ
СИМВОЛ
ЗНАЧЕНИЕ
Изделие медицинского назначения для in
vitro диагностики
Не использовать повторно
Производитель
Набор рассчитан на ,,,, тестов
Каталожный номер
Хрупкий, не кантовать
Использовать до…
Внимание: прочтите инструкцию
Температура хранения
Номер партии