74 Îðèãèíàëüíûå èññëåäîâàíèÿ Äîêëèíè÷åñêîå èññëåäîâàíèå îòå÷åñòâåííîãî ïðåïàðàòà ñòâîëîâûõ êëåòîê ïóïîâèííîé êðîâè «Êðèîöåë» Ê.Ã. Ñóðêîâ, Ë.À. Áåëîâà, Â.Ê. Êðàñíÿêîâ Âñåðîññèéñêèé íàó÷íûé öåíòð ïî áåçîïàñíîñòè áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ (ÂÍÖ ÁÀÂ) Ñàíêò-Ïåòåðáóðãñêîå ÃÓÇ «Ãîðîäñêàÿ ñòàíöèÿ ïåðåëèâàíèÿ êðîâè» Êëþ÷åâûå ñëîâà: ñòâîëîâûå êëåòêè, ïóïîâèííàÿ êðîâü, Êðèîöåë.  ñòàòüå ïðåäñòàâëåíû ðåçóëüòàòû èçó÷åíèÿ âëèÿíèÿ îòå÷åñòâåííîãî ïðåïàðàòà Êðèîöåë íà òå÷åíèå èøåìè÷åñêîãî èíñóëüòà è îñòðîãî èíôàðêòà ìèîêàðäà â ýêñïåðèìåíòå. Ââåäåíèå  òå÷åíèå ïîñëåäíèõ äåñÿòèëåòèé ïðîáëåìà ïîèñêà íîâûõ ñðåäñòâ è ñïîñîáîâ êîððåêöèè êàê ñàìèõ îñòðûõ íàðóøåíèé êðîâîîáðàùåíèÿ ñåðäöà è ìîçãà, òàê è ïîñëåäñòâèé ýòèõ íàðóøåíèé, ïðèîáðåòàåò âñå áîëüøóþ çíà÷èìîñòü â ñâÿçè ñ âûñîêèì óðîâíåì ëåòàëüíîñòè, çíà÷èòåëüíîé èíâàëèäèçàöèåé è ñîöèàëüíîé äåçàäàïòàöèåé ïàöèåíòîâ. Òàê, âî âñåì ìèðå èíâàëèäàìè â ðåçóëüòàòå èíñóëüòà ÿâëÿþòñÿ îêîëî 30 ìëí ÷åëîâåê. Äðóãèì ïðèìåðîì ïîñëåäñòâèé îñòðîé èøåìèè âûñîêîñïåöèàëèçèðîâàííûõ òêàíåé ÿâëÿåòñÿ ñíèæåíèå ñîêðàòèòåëüíîé ñïîñîáíîñòè ñåðäå÷íîé ìûøöû, çàêîíîìåðíî ðàçâèâàþùåéñÿ ïîñëå îñòðîãî èíôàðêòà ìèîêàðäà, êàê ñëåäñòâèå ïðîöåññîâ ðåìîäåëèðîâàíèÿ. Îñíîâàíèåì äëÿ ïðîâåäåíèÿ äàííîé ðàáîòû ïîñëóæèëè íàêàïëèâàþùèåñÿ äàííûå î âîçìîæíîñòè òåðàïèè ðàçëè÷íûõ èøåìè÷åñêèõ ñîñòîÿíèé âûñîêîñïåöèàëèçèðîâàííûõ òêàíåé è ïîñëåäñòâèé òàêèõ ñîñòîÿíèé ñ ïîìîùüþ ñòâîëîâûõ êëåòîê ïóïîâèííîé/ïëàöåíòàðíîé êðîâè ÷åëîâåêà. Êîëè÷åñòâî ïîïûòîê âîçäåéñòâèÿ íà ñîñòîÿíèÿ, âûçâàííûå äåôèöèòîì êðîâîñíàáæåíèÿ ñ ïîìîùüþ ñòâîëîâûõ êëåòîê ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè è êîñòíîãî ìîçãà êðîâè â êëèíèêå ðàñòåò. Ïîêàçàíî, ÷òî èíôóçèÿ àóòîãåííûõ ñòâîëîâûõ êëåòîê êîñòíîãî ìîçãà â õîäå áàëëîííîé àíãèîïëàñòèêè ïðèâîäèò ê óìåíüøåíèþ çîíû èíôàðêòà ó áîëüíûõ [1].  ýêñïåðèìåíòàõ íà æèâîòíûõ ïîêàçàíî, ÷òî êîñòíîìîçãîâûå êëåòêè [2], ñòâîëîâûå êëåòêè ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè æèâîòíûõ [3] ñïîñîáíû â ìîäåëüíûõ ýêñïåðèìåíòàõ íà æèâîòíûõ íèâåëèðîâàòü íåâðîëîãè÷åñêèé äåôèöèò, îáóñëîâëåííûé èøåìèåé ãîëîâíîãî ìîçãà. Õîòÿ èìåþòñÿ ðàáîòû, ïîêàçûâàþùèå çíà÷èòåëüíóþ ýôôåêòèâíîñòü ïðåïàðàòîâ êëåòîê ïóïîâèííîé êðîâè ÷åëîâåêà íà ðàçëè÷íûõ ìîäåëÿõ èøåìèè, íåÿñíî, íàäîëãî ëè ñîõðàíÿåòñÿ òàêîé ýôôåêò, íåèçâåñòíà åãî äèíàìèêà è âëèÿíèå òàêèõ ïðåïàðàòîâ íà îòäàëåííûå ïîñëåäñòâèÿ èøåìèè. Öåëüþ äàííîé ðàáîòû ÿâèëîñü èçó÷åíèå ñïîñîáíîñòè îòå÷åñòâåííîãî ïðåïàðàòà Êðèîöåë, (êîíöåíòðàòà ñòâîëîâûõ êëåòîê ïóïîâèííîé/ïëàöåíòàðíîé êðîâè ÷åëîâåêà) ïðîèçâîäñòâà Ñàíêò-Ïåòåðáóðãñêîãî ÃÓÇ «Ãîðîäñêàÿ ñòàíöèÿ ïåðåëèâàíèÿ êðîâè»: • âëèÿòü íà äèíàìèêó íåâðîëîãè÷åñêèõ íàðóøåíèé êàê â áëèçêèå, òàê è â îòäàëåííûå ïåðèîäû ïîñëå îñòðîãî íàðóøåíèÿ ìîçãîâîãî êðîâîîáðàùåíèÿ, âûçâàííîãî îêêëþçèåé ñðåäèííîé ìîçãîâîé àðòåðèè; • âëèÿòü íà ðàçâèòèå ñåðäå÷íîé íåäîñòàòî÷íîñòè, çàêîíîìåðíî ðàçâèâàþùåéñÿ ïîñëå èíôàðêòà ìèîêàðäà, âûçâàííîãî ïåðåâÿçêîé ëåâîé êîðîíàðíîé àðòåðèè. Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 1 (3), 2006 Ìàòåðèàëû è ìåòîäû Ïðåïàðàò ñòâîëîâûõ êëåòîê ïóïîâèííîé/ïëàöåíòàðíîé êðîâè ÷åëîâåêà Êðèîöåë ïðîèçâîäèòñÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ «Èíñòðóêöèåé ïî âûäåëåíèþ è õðàíåíèþ êîíöåíòðàòà ñòâîëîâûõ êëåòîê ïóïîâèííîé/ïëàöåíòàðíîé êðîâè ÷åëîâåêà», óòâåðæäåííîé Ìèíçäðàâîì ÐÔ â 2003 ãîäó. Ïðåïàðàò ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé âçâåñü ìîíîíóêëåàðîâ ïóïîâèííîé/ïëàöåíòàðíîé êðîâè ÷åëîâåêà, ïîìåùåííóþ â êðèîêîíñåðâèðóþùèé ðàñòâîð è çàìîðîæåííóþ â ïðîãðàììèðóåìîì ðåæèìå äî òåìïåðàòóðû æèäêîãî àçîòà. Ñëåäîâàòåëüíî, ââîäèìûå êëåòêè ÿâëÿëèñü êñåíîãåííûìè ïî îòíîøåíèþ ê æèâîòíîìó-ðåöèïèåíòó. Êðèîìåøîê ñ ïðåïàðàòîì íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä ââåäåíèåì ïðåïàðàòà âûíèìàëè èç æèäêîãî àçîòà, ãäå îí íàõîäèëñÿ, ñïóñòÿ 2-3 ìèíóòû ïîìåùàëè â âîäÿíóþ áàíþ ñ òåìïåðàòóðîé +37° Ñ è îòòàèâàëè, îñòîðîæíî ðàçäàâëèâàÿ òàþùèå êðèñòàëëû ëüäà. Ñðàçó ïîñëå òîãî, êàê êðèñòàëëû ëüäà èñ÷åçàëè, êðèîïàêåò èçâëåêàëè èç âîäÿíîé áàíè. Ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì ïðåïàðàòà êëåòêè îòìûâàëè îò êðèîêîíñåðâèðóþùåãî ðàñòâîðà, ñîäåðæàùåãî äèìåòèëñóëüôîêñèä è ðåñóñïåíäèðîâàëè êëåòêè 10% ðàñòâîðîì ðåîïîëèãëþêèíà. Ìåòîäîì âèòàëüíîé îêðàñêè òðèïàíîâûì ñèíèì îïðåäåëÿëè ïðîöåíò æèçíåñïîñîáíûõ êëåòîê â êàìåðå Ãîðÿåâà. Ïðåïàðàò ïåðåä ââåäåíèåì ðàçâîäèëè äî íóæíîé êîíöåíòðàöèè 0,9%-íûì ñòåðèëüíûì ðàñòâîðîì õëîðèäà íàòðèÿ. Ýêñïåðèìåíòû ïî ìîäåëèðîâàíèþ èøåìè÷åñêîãî èíñóëüòà ïðîâîäèëè íà áåëûõ êðûñàõ-ñàìöàõ ìàññîé 370-400 ã ëèíèè Âèñòàð. Èøåìèþ âîñïðîèçâîäèëè ïóòåì ïîñòîÿííîé îêêëþçèè ëåâîé ñðåäíåé ìîçãîâîé àðòåðèè (ÏÎÑÌÀ) ïîä îáùåé àíåñòåçèåé õëîðàëãèäðàòîì â ñîîòâåòñòâèè ñ ðåêîìåíäàöèÿìè ïî äîêëèíè÷åñêîìó èçó÷åíèþ íîâûõ ôàðìàêîëîãè÷åñêèõ âåùåñòâ [4], ïðè÷åì îêêëþçèÿ äîñòèãàëàñü ïóòåì ýëåêòðîêîàãóëÿöèè áåç ðàçðóøåíèÿ ñêóëîâîãî îòðîñòêà. Ïðè èìèòàöèè îïåðàöèè (ëîæíàÿ ÏÎÑÌÀ) ýëåêòðîêîàãóëÿöèÿ íå ïðîèçâîäèëàñü. Ìîäåëèðîâàíèå îñòðîãî èíôàðêòà ìèîêàðäà (ÎÈÌ) îñóùåñòâëÿëîñü ïåðìàíåíòíîé îêêëþçèåé íèñõîäÿùåé âåòâè ëåâîé êîðîíàðíîé àðòåðèè (ÎËÊÀ) íà ãðàíèöå ñðåäíåé è íèæíåé òðåòè ó êðûñ-ñàìöîâ ìàññîé 230-250 ã ëèíèè Âèñòàð, íàõîäÿùèõñÿ íà ñàìîñòîÿòåëüíîì äûõàíèè. Ïðè èìèòàöèè îêêëþçèè ëèãàòóðà ïîä àðòåðèþ íå ïîäâîäèëàñü è, ñîîòâåòñòâåííî, íå ïåðåâÿçûâàëàñü.  ñëåäóþùèé ýòàï ýêñïåðèìåíòà âêëþ÷àëèñü æèâîòíûå, ó êîòîðûõ âûÿâëÿëñÿ øèðîêèé çóáåö Q (áîëåå 0,3 ìÂ), à òàêæå ëîæíîîïåðèðîâàííûå æèâîòíûå, âûæèâøèå â òå÷åíèå 24 ÷àñîâ ïîñëå îïåðàöèè. Îáúåì ââåäåíèÿ ïðåïàðàòà êàæäîìó æèâîòíîìó ñîñòàâëÿë 2,0 ìë. Ïðåïàðàò Êðèîöåë ââîäèëñÿ îäíîêðàòíî âíóòðèâåííî ñî ñêîðîñòüþ îêîëî 4 ìë â ÷àñ â äâóõ äîçàõ: 2½104 èëè 2½106 êëåòîê. Ïðåïàðàò (èëè ðàñòâîðèòåëü, ñîîòâåòñòâåííî) ââîäèëñÿ ëèáî ÷åðåç 24 ÷àñà ïîñëå îêêëþçèè, ëèáî ÷åðåç íåñêîëüêî äíåé ïîñëå íåå: â ñëó÷àå ýêñïåðèìåíòîâ Òåìà âûïóñêà: ïóïîâèííàÿ êðîâü 75 íà ìîäåëè ÎÈÌ - ÷åðåç 5 äíåé, â ñëó÷àå ýêñïåðèìåíòîâ íà ìîäåëè èøåìè÷åñêîãî èíñóëüòà ÷åðåç 7 äíåé. Ó æèâîòíûõ ñ ýêñïåðèìåíòàëüíûì èíñóëüòîì (èëè ëîæíîé îïåðàöèåé) íàðóøåíèÿ êîîðäèíàöèè âûÿâëÿëè â òåñòå «âðàùàþùèéñÿ ñòåðæåíü». Äëÿ ýòîãî ðåãèñòðèðîâàëè âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ æèâîòíûõ íà áàðàáàíå, âðàùàþùåìñÿ ñî ñêîðîñòüþ 18 îá/ìèí. Çà 2 äíÿ äî òåñòèðîâàíèÿ æèâîòíûõ ïðåäâàðèòåëüíî òðåíèðîâàëè ïî 5 ìèí ïðè ñêîðîñòè âðàùåíèÿ áàðàáàíà 9 îá/ìèí. Çà 1 äåíü ïåðåä îïåðàöèåé æèâîòíûå òðèæäû ïðîõîäèëè òåñò, ñðåäíåå âðåìÿ ýòèõ òåñòîâ (â ñåêóíäàõ) ðåãèñòðèðîâàëîñü êàê ïåðâîíà÷àëüíîå äëÿ äàííîãî æèâîòíîãî. Èíäèâèäóàëüíîå âðåìÿ êàæäîãî æèâîòíîãî, çàðåãèñòðèðîâàííîãî â ýòîì æå òåñòå ïîñëå îïåðàöèè, îïðåäåëÿëè êàê äîëþ îò ïåðâîíà÷àëüíîãî çíà÷åíèÿ (äî îïåðàöèè) äëÿ äàííîãî æèâîòíîãî. Âðàùàòåëüíóþ àñèììåòðèþ èññëåäîâàëè íà ðîòîìåòðå â «àïî-òåñòå». Äëÿ ýòîãî àïîìîðôèí ââîäèëè â äîçå 0,5 ìã/êã âíóòðèáðþøèííî çà 30 ìèí äî òåñòà. Ðåãèñòðèðîâàëè ðàçíèöó ìåæäó êîëè÷åñòâîì îáîðîòîâ âëåâî è êîëè÷åñòâîì îáîðîòîâ âïðàâî, ñîâåðøåííûõ æèâîòíûì â òå÷åíèå 30 ìèíóò. Íåâðîëîãè÷åñêèé äåôèöèò îöåíèâàëñÿ ïî øêàëå Menzies [5]. Êîãíèòèâíûå ðàññòðîéñòâà îöåíèâàëèñü â òåñòå íà âûðàáîòêó óñëîâíîãî ðåôëåêñà ïàññèâíîãî èçáåãàíèÿ (ÓÐÏÈ) â ñîîòâåòñòâèè ñ ðåêîìåíäàöèÿìè ïî äîêëèíè÷åñêîìó èçó÷åíèþ íîâûõ ôàðìàêîëîãè÷åñêèõ âåùåñòâ [4]. Æèâîòíîå ïîìåùàëè íà ïëàòôîðìó, óñòàíîâëåííóþ â öåíòðå êàìåðû ñ ýëåêòðèôèöèðîâàííûì ïîëîì. Îáó÷åíèå êðûñ ïðîèçâîäèëè ïóòåì ýëåêòðîáîëåâîãî ðàçäðàæåíèÿ ïóòåì ïîäà÷è òîêà ñèëîé 0,3 ìÀ íà ðåøåòêó ïîëà. Æèâîòíîå ïåðåõîäèëî íà áåçîïàñíóþ ïëàòôîðìó è äîëæíî áûëî îñòàâàòüñÿ íà íåé â òå÷åíèå 10 ìèíóò. Âîñïðîèçâåäåíèå ðåôëåêñà îöåíèâàëîñü ÷åðåç 24 ÷àñà ïîñëå îáó÷åíèÿ, ïóòåì ïîìåùåíèÿ æèâîòíîãî íà áåçîïàñíóþ ïëàòôîðìó. Ôèêñèðîâàëè ëàòåíòíîå âðåìÿ ñõîäà æèâîòíîãî ñ ïëàòôîðìû íà ïîë êàìåðû. Îöåíêà ïî âûøåóêàçàííûì òåñòàì ïðîâîäèëàñü íà 2-é è 10-é íåäåëå ïîñëå îïåðàöèè. Ó êðûñ ñ ýêñïåðèìåíòàëüíûì ÎÈÌ (èëè ëîæíîé îïåðàöèåé) ÷åðåç 45 äíåé ïîñëå âìåøàòåëüñòâà ïðîâîäèëè îöåíêó èíòîëåðàíòíîñòè ê ôèçè÷åñêèì íàãðóçêàì â òåñòå «ïðèíóäèòåëüíîãî ïëàâàíèÿ» ñ ãðóçîì. Ôèêñèðîâàëîñü âðåìÿ äî íà÷àëà ïîãðóæåíèÿ êðûñû. Äëÿ îöåíêè ñòåïåíè êîìïåíñàòîðíîé ãèïåðòðîôèè ìèîêàðäà îïðåäåëÿëîñü ñîîòíîøåíèå ìàññû ñåðäöà ê ìàññå òåëà æèâîòíîãî. Äëÿ ýòîãî ÷åðåç 2 äíÿ ïîñëå ïðîâåäåíèÿ òåñòà «ïðèíóäèòåëüíîãî ïëàâàíèÿ» æèâîòíûå âçâåøèâàëèñü è ïîäâåðãàëèñü ýâòàíàçèè ìåòîäîì äåêàïèòàöèè. Íåïîñðåäñòâåííî ïîñëå ýâòàíàçèè ñåðäöå èçâëåêàëîñü èç ãðóäíîé êëåòêè è âçâåøèâàëîñü. Ðèñ. 1. Âëèÿíèå ïðåïàðàòà íà âîññòàíîâëåíèå êîîðäèíàöèè â òåñòå «âðàùàþùèéñÿ ñòåðæåíü» Ãðóïïû: 1 - ÏÎÑÌÀ + ïðåïàðàò 2½104 êë.; 2 - ÏÎÑÌÀ + ïðåïàðàò 2½106 êë.; 3 - ÏÎÑÌÀ + ðàñòâîðèòåëü; 4 - ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ðàñòâîðèòåëü Ðèñ. 2. Âëèÿíèå ïðåïàðàòà íà ðåäóêöèþ íåâðîëîãè÷åñêîãî äåôèöèòà Ãðóïïû: 1 - ÏÎÑÌÀ + ïðåïàðàò 2½104 êë.; 2 - ÏÎÑÌÀ + ïðåïàðàò 2½106 êë.; 3 - ÏÎÑÌÀ + ðàñòâîðèòåëü; 4 - ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ðàñòâîðèòåëü Ðåçóëüòàòû è îáñóæäåíèå Ðåçóëüòàòû ýêñïåðèìåíòîâ ïðåäñòàâëåíû íà ðèñ. 1-6. Êàê âèäíî èç ïðåäñòàâëåííûõ äàííûõ, ïðåïàðàò ïðè ýêñïåðèìåíòàëüíîì èíñóëüòå âûçûâàë çíà÷èòåëüíîå óñêîðåíèå âîññòàíîâëåíèÿ íàðóøåííûõ ôóíêöèé. Ê 10-é íåäåëå æèâîòíûå, ïîëó÷èâøèå ïðåïàðàò, ïðàêòè÷åñêè íå îòëè÷àëèñü îò ëîæíîîïåðèðîâàííûõ æèâîòíûõ. Ê êîíöó èññëåäîâàíèÿ ðàçëè÷èÿ ìåæäó ãðóïïàìè ëîæíîîïåðèðîâàííûõ æèâîòíûõ è æèâîòíûõ, ïîëó÷èâøèõ ïðåïàðàò, âûÿâëÿëèñü òîëüêî â íàãðóçî÷íîì òåñòå íà âðàùàòåëüíóþ àñèììåòðèþ («àïî-òåñò») (ðèñ. 3).  ýêñïåðèìåíòàõ íà ìîäåëè ÎÈÌ ïðåïàðàò â çíà÷èòåëüíîé ñòåïåíè óìåíüøàë ðàçâèòèå ãèïåðòðîôèè ìèîêàðäà (ðèñ. 5). Ïðè àíàëèçå âëèÿíèÿ ïðåïàðàòà íà ïðåäîòâðàùåíèå ðàçâèòèÿ èíòîëåðàíòíîñòè ê ôèçè÷åñêîé íàãðóçêå âûÿâëåíû òå æå çàêîíîìåðíîñòè (ðèñ. 6). Ïðè ýòîì ââåäåíèå ïðåïàðàòà Êðèîöåë â îáåèõ ìîäåëüíûõ ñèñòåìàõ â áîëüøåé äîçå è/èëè â áîëåå ðàííèå ñðîêè îò ìîìåíòà âîçíèêíîâåíèÿ èøåìèè ïðèâîäèëî ê áîëåå âûðàæåííîìó ýôôåêòó. Êàêèõ-ëèáî íåãàòèâíûõ ýôôåêòîâ, ñâÿçàííûõ ñ ââåäåíèåì ïðåïàðàòà, íå îòìå÷àëîñü. Êàê ïîêàçàíî â ðàáîòàõ çàðóáåæíûõ èññëåäîâàòåëåé, ïðèæèâëåíèå ââåäåííûõ ñòâîëîâûõ êëåòîê ïóïîâèííîé êðîâè â îðãàíèçìå ðåöèïèåíòà íå ÿâëÿåòñÿ îáÿçàòåëüíûì äëÿ ïîëó÷åíèÿ òåðàïåâòè÷åñêîãî ýôôåêòà [6]. Òàê, ââåäåíèå ïðåïàðàòà ÷åëîâå÷åñêèõ ñòâîëîâûõ êëåòîê ïóïîâèííîé êðîâè æèâîòíûì (êðûñàì) ñ ïåðåâÿçàííîé ëåâîé ñðåäíåé ìîçãîâîé àðòåðèåé ïðèâîäèëî ê óìåíüøåíèþ çîíû íåêðîçà è óñêîðåííîìó âîññòàíîâëåíèþ íåâðîëîãè÷åñêèõ ôóíêöèé, ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëüíîé ãðóïïîé [7, 8, 9]. Íà ìîäåëè îñòðîãî èøåìè÷åñêîãî èíñóëüòà ó ìûøåé ïîêàçàíî, ÷òî ââåäåíèå CD 34+ êëåòîê ïóïîâèííîé êðîâè ÷åëîâåêà ìîæåò óñèëèâàòü àíãèîãåíåç, íåéðîãåíåç, ìîðôîëîãè÷åñêîå è ôóíêöèîíàëüíîå âîññòàíîâëåíèå ìîçãà [10]. Ýêñïåðèìåíòàëüíûå èññëåäîâàíèÿ ýôôåêòèâíîñòè ñòâîëîâûõ êëåòîê íà ìîäåëè èíôàðêòà ìèîêàðäà ó æèâîòíûõ ïîêàçàëè îïðåäå- Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 1 (3), 2006 76 Îðèãèíàëüíûå èññëåäîâàíèÿ ëåííóþ ýôôåêòèâíîñòü äàííîãî ìåòîäà [11, 12]. Òàêæå óëó÷øåíèå êðîâîñíàáæåíèÿ è/èëè âîññòàíîâëåíèå ôóíêöèè ïðè âîçäåéñòâèè ïðåïàðàòà ñòâîëîâûõ êëåòîê ïóïîâèííîé êðîâè ÷åëîâåêà áûëî ïîëó÷åíî â ýêñïåðèìåíòå äëÿ èøåìèçèðîâàííûõ êîíå÷íîñòåé æèâîòíûõ [13, 14]. Çàêëþ÷åíèå  íàñòîÿùåé ðàáîòå âïåðâûå ïîêàçàíà ýôôåêòèâíîñòü ïðåïàðàòà êëåòîê ïóïîâèííîé êðîâè ÷åëîâåêà (îòå÷åñòâåííûé ïðåïàðàò Êðèîöåë) â îòíîøåíèè ñíèæåíèÿ âûðàæåííîñòè êàê ðàííèõ, òàê è îòäàëåííûõ ïîñëåäñòâèé èøåìè÷åñêîãî ïîðàæåíèÿ ñåðäöà è ìîçãà. Ïðè ýòîì ïðåïàðàò ïîêàçàë ñâîþ ýôôåêòèâíîñòü ïðè åãî ïðèìåíåíèè, êàê â ðàííèå, òàê è â ïîçäíèå ñðîêè îò ìîìåíòà âîçíèêíîâåíèÿ èøåìèè. Íà ìîäåëè îñòðîãî èíôàðêòà ìèîêàðäà ïîêàçàíî ñíèæåíèå âûðàæåííîñòè êîìïåíñàòîðíîé ïîñòèíôàðêòíîé ãèïåðòðîôèè ìèîêàðäà è íåäîñòàòî÷íîñòè êðîâîîáðàùåíèÿ, çàêîíîìåðíî âîçíèêàþùèõ â ïðîöåññå ïîñòèíôàðêòíûõ èçìåíåíèé ñåðäå÷íîé ìûøöû. Ïðè ëå÷åíèè ýêñïåðèìåíòàëüíîãî èøåìè÷åñêîãî èíñóëüòà ïðîäåìîíñòðèðîâàíî áîëåå ïîëíîå è óñêîðåííîå âîññòàíîâëåíèå íåðâíûõ ôóíêöèé, âêëþ÷àÿ êîãíèòèâíûå è êîîðäèíàöèîííûå ðàññòðîéñòâà.  êëèíèêå ïðåïàðàò ìîæåò ïðåäñòàâëÿòü ñîáîé ýôôåêòèâíîå ñðåäñòâî ïðîôèëàêòèêè è/èëè ëå÷åíèÿ ïîñëåäñòâèé èíôàðêòà ìèîêàðäà è èíñóëüòà, äëÿ ÷åãî íåîáõîäèìû ñîîòâåòñòâóþùèå êëèíè÷åñêèå èñïûòàíèÿ. Ðèñ. 3. Âëèÿíèå ïðåïàðàòà íà ðåäóêöèþ äâèãàòåëüíîé àññèìåòðèè â «àïî-òåñòå» Ãðóïïû: 1 - ÏÎÑÌÀ + ïðåïàðàò 2½104 êë.; 2 - ÏÎÑÌÀ + ïðåïàðàò 2½106 êë.; 3 - ÏÎÑÌÀ + ðàñòâîðèòåëü; 4 - ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ðàñòâîðèòåëü Ðèñ. 4. Âëèÿíèå ïðåïàðàòà íà äèíàìèêó âîññòàíîâëåíèÿ êîãíèòèâíûõ ôóíêöèé â òåñòå ÓÐÏÈ Ãðóïïû: 1 - ÏÎÑÌÀ + ïðåïàðàò 2½104 êë.; 2 - ÏÎÑÌÀ + ïðåïàðàò 2½106 êë.; 3 - ÏÎÑÌÀ + ðàñòâîðèòåëü; 4 - ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ðàñòâîðèòåëü Ðèñ. 5. Âëèÿíèå ïðåïàðàòà íà ïîñòèíôàðêòíóþ ãèïåðòðîôèþ ìèîêàðäà Ãðóïïû: 1 - ÎËÊÀ + ïðåïàðàò 2½104 êë.; 2 - ÎËÊÀ + ïðåïàðàò 2½106 êë.; 3 - ÎËÊÀ + ðàñòâîðèòåëü; 4 - ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ïðåïàðàò 2½104 êë.; 5 ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ïðåïàðàò 2½106 êë.; 6 - ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ðàñòâîðèòåëü Ðèñ. 6. Âëèÿíèå ïðåïàðàòà íà èíòîëåðàíòíîñòü ê ôèçè÷åñêîé íàãðóçêå â òåñòå «ïðèíóäèòåëüíîå ïëàâàíèå» Ãðóïïû: 1 - ÎËÊÀ + ïðåïàðàò 2½104 êë.; 2 - ÎËÊÀ + ïðåïàðàò 2½106 êë.; 3 - ÎËÊÀ + ðàñòâîðèòåëü; 4 - ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ïðåïàðàò 2½104 êë.; 5 ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ïðåïàðàò 2½106 êë.; 6 - ëîæíàÿ îïåðàöèÿ + ðàñòâîðèòåëü Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 1 (3), 2006 Òåìà âûïóñêà: ïóïîâèííàÿ êðîâü ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ: 1. Strauer B.E., Brehm M., Zeus T. et al. Repair of infarcted myocardium by autologous intracoronary mononuclear bone marrow cell transplantation in humans. Circulation 2002; 106(15): 1913-8. 2. Chen J., Li Y., Katakowski M. et al. Intravenous bone marrow stromal cell therapy reduces apoptosis and promotes endogenous cell proliferation after stroke in female rat. J. Neurosci. Res. 2003; 73(6): 778-86. 3. Willing A.E., Vendrame M., Mallery J. et al. Mobilized peripheral blood cells administered intravenously produce functional recovery in stroke. Cell Transplant. 2003; 12(4): 449-54. 4. Àðçàìàñöåâ Å.Â. è äð. Ìåòîäè÷åñêèå óêàçàíèÿ ïî ýêñïåðèìåíòàëüíîìó èçó÷åíèþ ïðåïàðàòîâ äëÿ ëå÷åíèÿ íàðóøåíèé ìîçãîâîãî êðîâîîáðàùåíèé. Ðóêîâîäñòâî ïî ýêñïåðèìåíòàëüíîìó (äîêëèíè÷åñêîìó) èçó÷åíèþ íîâûõ ôàðìàêîëîãè÷åñêèõ âåùåñòâ. Ì., 2000: 159-61. 5. Menzies S.A., Hoff J.T., Betz A.L. Middle cerebral artery occlusion in rats: a neurological and pathological evaluation of a reproducible model. Neurosurgery 1992; 31(1): 100-6. 6. Borlongan C.V., Hadman M., Sanberg C.D., Sanberg P.R. Central nervous system entry of peripherally injected umbilical cord blood cells is not required for neuroprotection in stroke. Stroke 2004; 35(10): 2385-9. 77 7. Chen J., Sanberg P.R., Li Y. et al. Intravenous administration of human umbilical cord blood reduces behavioral deficits after stroke in rats. Stroke 2001; 32(11): 2682-8. 8. Vendrame M., Cassady J., Newcomb J. et al. Infusion of human umbilical cord blood cells in a rat model of stroke dose-dependently rescues behavioral deficits and reduces infarct volume. Stroke 2004; 35(10): 2390-5. 9. Willing A.E., Lixian J., Milliken M. et al. Intravenous versus intrastriatal cord blood administration in a rodent model of stroke. J. Neurosci. Res. 2003; 73(1): 296-307. 10 .Taguchi A. et al. Administration of ÑD 34+ cells after stroke enhances neurogenesis via angiogenesis in a mouse model. J. Clin. Invest. 2004; 114: 330-8. 11. Henning R.J. et al. Human umbilical cord blood mononuclear cells for the treatment of acute myocardial infarction. Cell Transplant. 2004; 13: 729-39. 12. Hirata Y. et al. Human umbilical cord blood cells improve cardiac function after myocardial infarction. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2005; 327: 609-14. 13. Yang C. et al. [Transplantation of cord blood endothelial progenitor cells ameliorates limbischemia] Zhonghua Yi Xue Za Zhi 2003; 83: 1437-41 [Article in Chinese]. 14. Madeddu P. et al. Transplantation of low dose CD34+KDR+ cells promotes vascular and muscular regeneration in ischemic limbs. FASEB J 2004;18: 1737 ÎÎÎ «ÊýìÁèî» - îôèöèàëüíûé äèñòðèáüþòîð êîìïàíèè StemCell Technology Inc. íà òåððèòîðèè ÐÔ ïðåäñòàâëÿåò: RobosepTM - ñèñòåìó äëÿ àâòîìàòè÷åñêîãî âûäåëåíèÿ ñòâîëîâûõ êëåòîê íà îñíîâå EasySepR òåõíîëîãèè: • Ïðèáîð ïîçâîëÿåò èñïîëüçîâàòü ïîçèòèâíûé è íåãàòèâíûé ìåòîä âûäåëåíèÿ êëåòîê • Îäíîâðåìåííîå âûäåëåíèå êëåòîê èç 4 ðàçíûõ îáðàçöîâ. • Ìàêñèìàëüíîå êîëè÷åñòâî êëåòîê â êàæäîì îáðàçöå 2½109 êëåòîê. • Âûäåëåíèå ïðîâîäÿòñÿ áåç èñïîëüçîâàíèÿ êîëîíîê. • Ïðèáîð ïîçâîëÿåò âûäåëÿòü êëåòêè (ÑD3+, CD4+, CD8+, CD14+, CD15+, CD19+, CD33+, CD34+, CD56+, CD66b+, CD33+ & CD66B+) èç öåëüíîé êðîâè. • Èñïîëüçóþòñÿ FACS-cîâìåñòèìûå ìàãíèòíûå íàíî÷àñòèöû • Ïðîòîêîëû âûäåëåíèÿ ìîãóò áûòü îïòèìèçèðîâàíû ïîä ýêñïåðèìåíòû ïîëüçîâàòåëÿ RosetteSepR-ñèñòåìà äëÿ âûäåëåíèÿ ñòâîëîâûõ êëåòîê èç öåëüíîé êðîâè. Ñïåöèàëèçèðîâàííûå ñðåäû äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ ãåìîïîýòè÷åñêèõ êëåòîê: MethoCultR- ñðåäû íà îñíîâå ìåòèëöåëëþëîçû, MegaCultR-ñðåäû íà îñíîâå êîëëàãåíà, MyeloCultR-ñðåäû äëÿ äëèòåëüíîãî êóëüòèâèðîâàíèÿ Ìåçåíõèìàëüíûõ (MesenCultR) êëåòîê, Íåðâíûõ (NeuroCultR) êëåòîê, Öèòîêèíû (BMP-4, EGF, EPO, FGF-b, G-CSF, GM-CSF, IGF-1,IL-2, M-CSF, OSM, PRL è äð.) Aíòèòåëà (ÑD2, ÑD3, CD4, CD11b, CD90, CD45, CD38 CD34, HLA-G è äð.) StemSpanR SFEM , StemSpanR H3000 cïåöèàëèçèðîâàííûå ñðåäû íå ñîäåðæàùèå ñûâîðîòêè Ñûâîðîòêè (FBS) äëÿ ãåìîïîýòè÷åñêèõ, ìåçåíõèìàëüíûõ êëåòîê Ñïåöèàëèçèðîâàííûå àòëàñû (Colony Atlas, Human Hematopoetic Colony Slides, Basic Cell Culture Protocols, Human Hematopoetic Colonies in Health and Disease) Òåë.: (495) 223-92-79, (495) 223-92-89 www.chembio.ru Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 1 (3), 2006