Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 169 АНАЛИЗ ДЕЙСТВИЯ ФУНГИЦИДНЫХ БИОПРЕПАРАТОВ НА КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА И МОРФОЛОГИЮ НЕКОТОРЫХ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ МИКОЗОВ КОЖИ © Отепова Г.М., Кухар Е.В., Куанышева Ж.К. Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина, Республика Казахстан, г. Астана Для лечения микозов кожи предложены различные химиотерапевтические средства и фитопрепараты с фунгицидной или фунгистатической активностью. Целью работы является анализ действия химиотерапевтических противиогрибковых препаратов на культуральные свойства и морфологию некоторых возбудителей микозов кожи, циркулирующих в зоне Северного Казахстана. Подтверждена выраженная фунгицидная активность клотримазола, экзодерила и терфалина в отношении M. canis и C. albicans, низкая активность в отношении возбудителя плесневого микоза Ch. globosum. Грибы вызывают различные заболевания кожи: кератомикозы, дерматомикозы, кандидозы, малассезиозы и т.д. Для кератомикозов (отрубевидный лишай) характерно поражение только рогового слоя кожи. Он характеризуется появлением в области груди, спины (межлопаточная область) пятен цвета кофе с молоком различных размеров и формы с отрубевидным шелушением кожи. Дерматомикозы (трихофития, микроспория, фавус) – это большая группа грибковых заболеваний, при которых поражаются кожа, волосы, ногти. Клиническая картина зависти от степени тяжести: от незначительных шелушений до тяжелого воспалительного процесса, который характеризуется появлением пузырей с плотной покрышкой, наполненных мутным белесоватым содержимым. Кандидоз может поражать кожу, слизистые оболочки полости рта, гениталий. При поражении кожи характерным клиническим признаком является появление эрозий, иногда везикул, пустул. Для лечения микозов кожи предложены различные химиотерапевтические средства и фитопрепараты с фунгицидной или фунгистатической активностью, т.е. со способностью к уничтожению или притормаживанию роста грибов. Хорошо известно, что решающее значение для эффективной борьбы с плесневыми грибами имеют качественные фунгицидные препараты. Выбор такого препарата подчас затруднителен. В настоящее время наиболее эффективными против плесневых грибов считаются альдегиды (например, Доцент кафедры Микробиологии и биотехнологии, доктор биологических наук. 170 СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ НАУКИ И АГРОПРОМЫШЛЕННЫЙ КОМПЛЕКС глутаровый альдегид) и четвертичные аммониевые соединения (ЧАС). Это определило наш выбор тестируемого препарата. Известно, что препараты на основе часов обладают антимикробной активностью в отношении грамотрицательных и грамположительных бактерий (включая микобактерии туберкулеза), вирусов, грибов рода Candida, дерматофитов. Таким образом, выбор препарата зависит от площади и глубины биоповреждений, а также таксономического разнообразия плесневых грибов, колонизирующих помещение. Целью работы является анализ действия химиотерапевтических противогрибковых препаратов с фунгицидной активностью на культуральные свойства и морфологию некоторых возбудителей микозов кожи, циркулирующих в зоне Северного Казахстана, который проводили в лаборатории биотехнологии грибов кафедры микробиологии и биотехнологии и НИИ сельскохозяйственной биотехнологии Казахского агротехнического университета им. С. Сейфуллина (г. Астана, Казахстан). Материалы и методы Для проведения исследований были выбраны клотримазол (К), экзодерил (Э) и терфалин (Т). Данные препараты отличаются спектром противогрибковой активности и активным действующим веществом. Клотримазол – распространенный синтетический лекарственный препарат группы имидазольных противогрибковых препаратов для местного лечения кандидоза и других микозов. Имеет широкий спектр действия in vitro, охватывающий почти все патогенные грибки, являющиеся причиной инфекции у людей, а именно: дерматофиты (Epidermophyton floccosum, Microsporum sp., Trichophyton sp.); бластомикозы и плесневые грибки (Cryptococcus neofoformans, Candida sp., Torulosis sp., Aspergillum sp., Cladosporium sp., Madurella sp.); диморфные грибки (Blastomyces dermatitidis, Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum); а также актиномицеты из семейства Nocardia. В малых концентрациях препарат действует фунгистатически, в больших – фунгицидно. Механизм действия заключается в торможении синтеза эргостерола – основного элемента клеточной оболочки в грибках. Экзодерил – противогрибковый препарат для наружного применения из группы аллиламинов. Механизм действия связан с ингибированием синтеза сквален-2,3-эпоксидазы, что приводит к снижению образования эргостерола, входящего в состав клеточной стенки гриба. Препарат активен в отношении дерматофитов Trichophyton, Epidermophyton, Microsporum, дрожжевых (Candida spp., Pityrosporum), плесневых грибов (Aspergillus spp.) и других грибов (Sporotrix schenckii). Входящий в состав экзодерила нафтифин действует фунгицидно в отношении дерматофитов и аспергиллов. В отношении дрожжевых грибов проявляет фунгицидную и фунгистатическую активность в зависимости от штамма микроорганизма. Препарат оказывает антибактериальное действие в отношении грамположительных и грамотрица- Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 171 тельных микроорганизмов, которые могут вызывать вторичные бактериальные инфекции. Терфалин – противогрибковый препарат для системного применения, является синтетическим производным аллиламина. Обладает широким спектром противогрибкового действия. Предполагается, что тербинафин действует путем ингибирования скваленэпоксидазы, таким образом, блокируя биосинтез эргостерола, являющимся основным компонентом мембраны грибковой клетки. Накоплением сквалена в грибковой клетке обусловлено фунгицидное действие тербинафина. Терфалин активен в отношении большинства штаммов следующих возбудителей: Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Candida albicans, Epidermophyton floccosum, Microsporum canis, Scopulariopsis brevicaulis. В качестве тест-культур для оценки фунгицидного действия противогрибковых препаратов использовали штаммы микромицета Chaetomium globosum № 129, дерматомицет Microsporum canis № 376, дрожжи Сandidа albicans № 416. Результаты исследований Фунгицидную активность препаратов в отношении отобранных штаммов грибов оценивали по скорости роста культур в чашках Петри на питательной среде с добавлением растворов фунгицидов. Для проведения анализа сравнительной активности фунгицидов готовили взвесь мази на стерильной дистиллированной воде в соотношении 1:100. После приготовления по 150 мл агара Сабуро по стандартной прописи в трех колбах, вносим в каждую колбу по 0,01 мл соответствующего раствора фунгицида, тщательно смешиваем, разливаем агар Сабуро в чашки Петри. После застывания среды делаем посевы грибов Ch. globosum № 129, M. canis № 376, C. albicans № 416 и наблюдаем за ростом. Культивирование проводим в условиях термостата при 28 °С. На первом этапе исследования было выявлено, что все тестируемые препараты имеют выраженную в той или иной степени фунгицидную активность. При росте тест-культур на питательной среде в присутствии биоцидов наибольшую фунгицидную активность наблюдали у препарата клотримазол (табл. 1). На табл. 1 видно, что культуры грибов Chaetomium globosum № 129, Microsporum canis № 376, Candida albicans № 416 более чувствительны к препарату клотримазол, чем к препарату экзодерил. Наиболее слабым фунгицидным эффектом обладает терфалин. Как видно из данных таблицы, наблюдается явная фунгицидная активность всех трех препаратов в отношении M. canis № 376. Клотримазол является отличным фунгицидом в отношении C. albicans № 416. Рост возбудителя плесневого микоза Ch. Globosum № 129 наблюдался в присутствии всех препаратов, что говорит о его низкой фунгицидной активности. 172 СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ НАУКИ И АГРОПРОМЫШЛЕННЫЙ КОМПЛЕКС Отмечена фунгистатическая активность экзодерила в отношении C. Albicans № 416, которая проявилась в задержке роста микроорганизма к пятым суткам и меньшим диаметром колонии в сравнении с другими культурами. Таблица 1 Фунгицидная активность тестируемых препаратов на 3 сутки Использованный Номер Культуры грибов, Диаметр колоний Диаметр колоний антибиотик чашки № штамма на 3 сутки, см на 5 сутки, см 1 416 0,1×0,1 0,1×0,1 2 416 нет роста нет роста 3 129 0,7×0,7 2,7×2,7 Клотримазол 4 129 0,5×0,5 2,6×2,6 5 376 нет роста нет роста 6 376 нет роста нет роста 1 416 2,0×1,0 2,0×1,0 2 416 1,5×0,7 2,0×0,9 3 129 0,5×0,5 3,0×3,0 Экзодерил 4 129 1,0×1,0 2,8×2,8 5 376 нет роста нет роста 6 376 нет роста нет роста 1 416 0,8×0,8 3,0×1,5 2 416 1,0×0,7 1,5×1,0 3 129 0,7×0,5 4,0×4,0 Терфалин 4 129 0,2×0,2 4,0×4,0 5 376 нет роста нет роста 6 376 нет роста нет роста На втором этапе была проведена микроскопия выросших культур для выявления возможных изменений в морфологической структуре грибов (рис. 1). Ch. globosum № 129 M. canis № 376 C. albicans № 416 Рис. 1. Результаты микроскопии мицелия грибов Анализы микроскопии мазков анализируемых культур грибов M. canis № 376, Ch. globosum № 129, C. albicans № 416 после роста на средах с клотримазолом, экзодерилом и терфалином показали, что после проведенных исследований структура грибов изменилась, мицелий вегетативный, спор нет. Таким образом, нами выявлено наличие фунгицидной активности всех трех препаратов в отношении M. canis № 376, клотримазола – в отношении Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 173 C. albicans № 416. Плесневый гриб Ch. globosum № 129 проявил усточивость в присутствии всех препаратов, что говорит о нецелесообразности их использования в лечении микозов, вызванных данным возбудителем. Подводя итоги исследований следует отметить, что все предложенные для испытаний фунгицидные препараты проявляют активность в отношении дерматомицетов и дрожжей. Подтверждена выраженная фунгицидная активность всех трех препаратов в отношении M. canis № 376. Клотримазол является отличным фунгистатиком / фунгицидом в отношении C. albicans № 416. Рост возбудителя плесневого микоза Ch. globosum № 129 наблюдался в присутствии всех препаратов, что говорит об их низкой активности в отношении плесеней. По совокупному анализу предложенные противогрибковые препараты можно расположить в ряд по убыванию фунгицидных свойств клотримазол > экзодерил > терфалин. Список литературы: 1. Антропова А.Б., Мокеева В.Л., Биланенко Е.Н., Чекунова Л.Н., Желтикова Т.М., Петрова-Никитина А.Д. Аэромикота жилых помещений г. Москвы // Микология и фитопатология. – 2003. – Т. 37, Вып. 6. – С. 1-11. 2. Дмитриева М.Б., Кобраков К.И., Станкевич Г.С., Балабанова. Оценка эффективности биозащитных свойств азокрасителей, содержащих 3,5-дихлорпиридильный фрагмент // Текстильная химия. – 2004. – № 4. – С. 10-17. 3. Алмаганбетов К.Х. Микроорганизм биотехнологиясы. – Астана, 2008. – С. 55-78. 4. Migacheva N., Souzdaltseva T., Pakhoulskaya О. Sensitization to mold in asthmatic patients // Allergy. – 2000. – Suppl. 63, V. 55. – P. 112. 5. Украинский журнал дерматологии. – 2012. – № 3 (46). – Статья предоставлена представительством компании «Новартис Консьюмер Хелс Сервисез С.А.» в Украине. ВОЗБУДИТЕЛЬ ТОКСОКАРОЗА ОПАСНЫЙ ПАТОГЕННЫЙ АГЕНТ ДЛЯ ЖИТЕЛЕЙ МЕГАПОЛИСОВ © Панова О.А., Гламаздин И.Г. Московский государственный университет пищевых производств, г. Москва Проведен анализ научных данных, опубликованных в отечественной и зарубежной литературе. Рассматриваются вопросы распространения Аспирант кафедры «Ветеринарная медицина». Профессор кафедры «Ветеринарная медицина», доктор ветеринарных наук, профессор.