МОЛЕКУЛЫ, АССОЦИИРОВАННЫЕ С КЛЕТОЧНЫМ ЗВЕНОМ ГЕМОСТАЗА Фактор Виллебранда (vWF) - мультимерный адгезивный гликопротеин, обеспечивающий адгезию и агрегацию тромбоцитов. В плазме vWF циркулирует в виде различных мультимеров с м.м. от 450 до 20 000 кДа и более. Причем, чем больше субъединиц в составе мультимера, тем выше его адгезивные свойства и соответственно функциональная активность. Кроме того, vWF является носителем-стабилизатором Фактора VIII (FVIII:C), который циркулирует в сыворотке в виде комплекса [vWF- FVIII:C], а в свободной форме FVIII:C быстро инактивируется. За связывание коллагена и FVIII:C отвечают разные домены vWF. Повышенные уровни vWF и его активности являются индикатором повреждения эндотелия при сосудистых заболеваниях. Снижение концентрации vWF обнаружено при гипотиреоидизме и СКВ. Классификация и диагностика типов Болезни Виллебранда. Активность и уровнь vWF имеет первостепенное значение в этиологии болезни Виллебранда. Болезнь Виллебранда (врожденный геморрагический диатез) - самое распространенное геморрагическое нарушение (распространенность в популяции около 1 - 2%). В 2008 году вступил в силу ГОСТ РФ по ведению больных Болезнью Виллебранда. Для полной дифференциальной диагностики болезни Виллебранда необходимо определять уровень и активность (долю активного vWF) и мультимерность vWF, а также активность FVIII. Определение активности и уровня антигена vWF имеет первостепенное значение. Уровень vWF (антигена) в норме составляет примерно 50 – 200 Ед/дл (0,5 – 2 Ед/мл). Коллаген-связывающая активность vWF в норме составляет примерно 0,6 – 1,3 Ед/мл. При выработке внутрилабораторных норм важно иметь в виду тот факт, что АВ0 (первая группа крови) ассоциирована с более низкими нормами уровня vWF. тип Болезни Виллебранда Встречаемос Описание причин дефицита ть % Активность FVIII Уровень антигена vWF Мультимернос ть vWF Около 70% Частичный дефицит уровня vWF. Доля высокомолекулярных мультимеров vWF остается в норме или незначительно снижена. Наследуется по аутосомно-доминантному типу. Снижена Снижен Мультимерная структура не нарушена На все подтипы Болезни Виллебранда 2 типа приходится около 25% Отсутствие высокомолекулярных мультимеров vWF, что приводит к снижению адгезивной активности тромбоцитов. Наследуется преимущественно по аутосомно-доминантному типу. Снижена или норма Снижен или норма Отсутстуют большие и средние формы Мутантная форма vWF приводит к повышенной адгезии Снижена или тромбоцитов и как следствию к дефициту норма высокомолекулярных мультимеров vWF. Наследуется преимущественно по аутосомно-доминантному типу. Снижен или норма Отсутствуют большие формы Снижена или норма Снижен или норма Тип 2M Нарушение функциональной активности vWF ассоциировано с ухудшением взаимодействия тромбоцит/vWF, но уровень высокомолекулярных мультимеров vWF остается в норме. Наследуется преимущественно по аутосомно-доминантному типу. Мультимерная структура не нарушена Значительно снижена Норма Тип 2N Нарушение функциональной активности vWF, приводящее к неэффективному связыванию FVIII, вследствие чего уровень циркулирующего FVIII заметно снижается. Наследуется по аутосомно-рециссивному типу. Мультимерная структура не нарушена Значительно снижен Отсутствует полностью Тип 1 Тип 2A Тип 2B Менее 5% Тип 3 Тяжелый дефицит уровня vWF в плазме (ниже 5 Ед/дл), Значительно вследствие чего активность циркулирующего FVIII снижена также значительно снижается. Наследуется по аутосомно-рециссивному типу [7]. 1 ADAMTS-13 и ингибитор ADAMTS-13. ADAMTS-13 (металлопротеиназа семейства пептидазных белков «ADAM») отщепляет фрагменты от мультимерной молекулы vWF. ADAMTS-13 необходима, во-первых: для высвобождения фактора Виллебранда в плазму, а во-вторых: для регулирования чрезмерной активности фактора Виллебранда. Недостаток активности ADAMTS-13 приводит к тяжелому аутоиммунному заболеванию – тромботической тромбоцитопенической пурпуре. Недостаток активности протеиназы может быть обусловлен либо мутацией в активном центре ADAMTS-13, либо наличием аутоантител (ингибитора ADAMTS-13). Витронектин синтезируется в печени, нормальная концентрация в плазме составляет 250-450 мкг/мл. Одна из важнейших функций витронектина в регуляции гемостаза – стабилизация ингибирующей конформации PAI-1. В отсутствие витронектина РAI-1 остается в латентной форме и не ингибирует активацию плазминогена. 50% снижение уровня Витронектина наблюдается при ДВСсиндроме и циррозе печени. Отложение витронектина на стенках сосудов ассоциировано с атеросклеротическими заболеваниями. Тромбоцитарный фактор 4 (PF4) высвобождается в плазму из α-гранул тромбоцитов при их активации. PF4 характеризуется анти-гепариновой активностью. Повышенный уровень PF4 наблюдается в различных ситуациях при сильной активации тромбоцитов. Сниженный уровень PF4 ассоциирован с синдромом серых тромбоцитов. Тромбопоэтин (MGDF) (MGDF, MK-CSF) - вызывает повышение количества мегакариоцитов (предшественников тромбоцитов), улучшает их жизнеспособность, ускоряет клеточный цикл. Уровень циркулирующего тромбопоэтина определяют при различных патологических состояниях: при идиопатических формах тромбоцитопенической пурпуры и тромбоцитонемии, при циррозе печени и некоторых видах тромбоцитопении. Гликопротеиновые IIb/IIIa-рецепторы (GPIIb/IIIa, интегрины αIIbβ3) являются членами семейства интегриновых рецепторов клеточной мембраны. Они играют ключевую роль в формировании тромба, аггрегации тромбоцитов, а также в процессах эмбриогенеза и межклеточной адгезии. Комплексный интегриновый рецептор представляет собой кальций-зависимый гетеродимер, состоящий из тяжелой (α) и легкой (β) цепей, с м.м. 140 и 90 кДа, соответственно. GPIIb/IIIa является индуцируемым рецептором для фибриногена, фибронектина, фактора Виллебранда и витронектина. Одновременное связывание димерных молекул фибриногена с рецепторами на смежных тромбоцитах сопровождается их агрегацией. Наследственные дефекты GPIIb/IIIa приводят к развитию тромбастении Гланцмана (GT) – аутосомного рецессивного заболевания, сопровождающегося повышенной кровоточивостью. Тромбоглобулин-бета (beta-TG) – синтезируемый тромбоцитами специфический белок, имеет м.м. 8,85 кДа и состоит из 4 идентичных субъединиц. Синтезируется в виде неактивного предшественника PBP (основного белка тромбоцитов) с м.м. 15 кДа. В результате отщепления 9 АК от N-конца PBP образуется хемокин CTAP-3 (пептид-3, активирующий соединительную ткань), а дальнейшее укорочение АК-последовательности на 3 АК приводит к образованию β-TG. В свою очередь, 2 при отщеплении 11 N-терминальных АК из β-TG образуется хемокин NAP-2 (нейтрофил-активирующий белок-2). β-TG накапливается в альфа-гранулах тромбоцитов и высвобождается в больших количествах при их активации. Высвобождение β-TG стимулирует различные биологические процессы: метаболизм глюкозы, синтез экстрацеллюлярного матрикса, митогенез, синтез t-PA фибробластами, а также регулирует процесс образования тромбоцитов из мегакариоцитов. Кроме того, β-TG наряду с CTAP-3 и NAP-2 повышают функциональную активность нейтрофилов. ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ЗАКАЗА: Кат. номер Фирма производитель Наименование, количество/упаковка 5450201 Technoclone Фактор Виллебранда (определение антигена), 96 5450301 Technoclone Коллаген III-связывающая активность фактора Виллебранда, 96 5450311 Technoclone Коллаген I-связывающая активность фактора Виллебранда, 96 885 American Diagnostica Фактор Виллебранда (определение активной формы), 96 5450701 Technoclone ADAMTS-13 (определение активности), 96 5450601 Technoclone ADAMTS-13 (определение антигена), 96 5450501 Technoclone ADAMTS-13 (протеаза, расщепляющая фактор Виллебранда), (определение антигена и активности, 360/460 нм) (иммунофлуоресцентный метод), 96 813 BCM Diagnostics ADAMTS-13, 96 5450401 Technoclone Ингибитор ADAMTS-13 (Антитела к ADAMTS-13), 96 5450451 Technoclone Ингибитор ADAMTS-13 (Антитела к ADAMTS-13), 48 TC12030 Technoclone Фибронектин, 96 TC12120 Technoclone Витронектин, 96 634 BCM Diagnostics Тромбоцитарный фактор 4 (требуются CTAD-пробирки), 96 DTP00B BCM Diagnostics Тромбопоэтин, 96 3 DTSP10 BCM Diagnostics Тромбоспондин-1, 96 DTSP20 BCM Diagnostics Тромбоспондин-2, 96 EG1060-1 BCM Diagnostics Гликопротеиновые IIb/IIIa-рецепторы, 96 E90370Hu BCM Diagnostics Тромбоглобулин-бета, 96 4