ПЛЕМЕННОЕ ДЕЛО Полиморфизм генов RYR�1, ESR, PRLR хряков породы ландрас Андрей ТОЛОКОНЦЕВ, кандидат сельскохозяйственных наук Селекционно�генетический центр «Мортадель» ы определили генотипы у 28 хряков породы лан� драс. Методом ПЦР амплифицировали фрагмент гена RYR�1 длиной 134 пары нуклеотидов (п.н.). Полученные амплификаты разрезали эндонуклеазой Hin 61. При помощи маркера определили длину фрагментов ре� стрикции: две полосы (84 и 50 пар нуклеотидов) представля� ют генотип NN, три полосы (134, 84 и 50 пар нуклеотидов) соответствуют гетерозиготному генотипу Nn (рис. 1). Ни од� ного животного с рецессивным гомозиготным генотипом nn не обнаружили. Методом ПЦР амплифицировали фрагмент гена ESR дли� ной 120 пар нуклеотидов. Полученные пробы разрезали эн� донуклеазой Pvu II и разделили в агарозном геле. При помо� щи маркера определили длину фрагментов рестрикции: од� на полоса (120 пар нуклеотидов) представляет гомозиготный генотип АА, три полосы (120, 65 и 55 пар нуклеотидов) со� ответствуют гетерозиготному генотипу АВ (рис. 2). Так же определены генотипы у 28 хряков специализиро� ванной материнской линии Символа. Методом ПЦР ампли� фицирован фрагмент гена PRLR длиной в 170 пар нуклео� тидов. Полученные фрагменты разрезаны эндонуклеазой AluI и разделены в агарозном геле. В зависимости от генотипа животного получены следующие картины фрагментов рестрикции: две четкие полосы по 170 и 127 п.н. соответствуют генотипу АА, еще две (92 и 35 п.н.) — генотипу ВВ, четыре полосы (170, 127, 92 и 35 п.н.) — гетеро� зиготному генотипу АВ (рис. 3). Наличие мутантного гена RYR�1 приводит к увеличению стрессочувствительности его носителей и в результате — к раз� личным неблагоприятным последствиям для свиноводства: плохой выживаемости и высокому отходу поросят, низкому качеству мяса. Проведенные исследования хряков�произво� дителей породы ландрас специализированной материнской линии Символа свидетельствуют: для этой популяции ха� рактерен гомозиготный, стрессоустойчивый генотип NN. Рецессивных гомозигот не выявлено. Исследования генетической структуры стада хряков спе� циализированной линии Символа по гену ESR показали, что в первом поколении частота встречаемости генотипа АА со� ставляла 0,58%, генотипа АВ — 0,42%. Носителей генотипа Нашей целью было исследование генетической структуры стада хряков породы ландрас специа� лизированной материнской линии Символа для дальнейшей разработки методов определения ге� нов RYR�1, ESR и PRLR и повышения репродуктив� ных качеств производителей. М Рис. 1. ПЦР�продукт гена RYR�1 М: pUC19 DNA/MspI, 1–7 — NN�генотип (84/50 п.н.) Рис. 2. ПЦР�продукт гена ESR М: pUC19 DNA/MspI, 1 — AB�генотип (120/65/55 п.н.), 2–5 — AA�генотип (120 п.н.) Рис. 3. ПЦР�продукт гена PRLR М: pUC19 DNA/MspI, 1 — BB�генотип (92/35 п.н.), 3, 5, 6, 7 — AA�генотип (170/127 п.н.) 2, 4 — AB�генотип (слабая 170, 127/92/35 п.н.) ЖИВОТНОВОДСТВО РОССИИ СПЕЦВЫПУСК 2013 21 ПЛЕМЕННОЕ ДЕЛО Рис. 4. Генетическая структура хряков специализированной материнской линии Символа по гену ESR в динамике поколений Рис. 5. Генетическая структура хряков специализированной материнской линии Символа в динамике поколений по гену PRLR разом: гомозиготный генотип АА — 0,33%, гетерозиготный АВ — 0,5, гомозиготный ВВ — 0,17%. Частота встречаемо� сти в первом поколении аллели А — 0,58%, аллели В — 0,42% (рис. 5). Во втором поколении частота встречаемости генотипов АА и АВ составила 0,37%, ВВ — 0,26, аллели А — 0,56, ал� лели В — 0,44%. Исследована также частота встречаемости комплексных ге� нотипов NN/ESR/PRLR хряков�производителей породы ландрас специализированной линии Символа. В первом по� колении у них обнаружено шесть комплексных генотипов (рис. 6). Наиболее часто повторяются генотипы NN/АА/АА (25,2%) и NN/АА/АВ (33,3%), реже — NN/АВ/АВ и NN/АВ/ВВ (16,6%) и совсем редко — NN/АВ/АА (8,3%). Ге� нотипы NN/АА/ВВ обнаружены не были. Полученные данные указывают на то, что во втором по� колении существует четыре комплексных генотипа (рис. 7). Наиболее часто встречаются генотипы NN/АА/АА (37,5%), NN/АА/АВ (25%) и NN/AB/BB (25%). Генотипы NN/АА/ВВ и NN/AB/AA обнаружены не были. Итак, хряки�производители породы ландрас специали� зированной линии Символа характеризуются гомозиготным стрессоустойчивым генотипом NN без рецессивных гомози� гот. Генотипирование хряков и исследования частоты встре� чаемости комплексных генотипов RYR�1/ESR/PRLR вы� явили отсутствие гомозиготного генотипа ESRВВ и генотипов NN/AA/BB в динамике двух поколений. 8’2011 ЖР Рис. 6. Частота встречаемости комплексных генотипов RYR1/ESR/PRLR у хряков�производителей первого поколения ВВ не выявлено. Частота повторяемости аллелей в первом поколении распределилась следующим образом: аллель А — 0,79%, аллель В — 0,21%. Результаты исследования второго поколения указывают на изменения генетической структуры хряков. Так, частота встре� чаемости генотипа АА в сравнении с первым поколением уве� личилась на 0,05% и составила 0,63%, при этом частота гено� типа АВ снизилась до 0,37%. Во втором поколении генотипа ВВ также не выявлено, изменилась частота повторяемости аллелей: аллель А — 0,82%, аллель В — 0,18% (рис. 4). Генетическая структура этой популяции хряков по гену PRLR в первом поколении распределилась следующим об� 22 ЖИВОТНОВОДСТВО РОССИИ СПЕЦВЫПУСК 2013 РЕКЛАМА Рис. 7. Частота встречаемости комплексных генотипов RYR�1/ESR/PRLR у хряков�производителей второго поколения РЕКЛАМА РЕКЛАМА