Федеральное государственное бюджетное образовательное уч- реждение высшего профессионального образования

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
«Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина»
Р.В.Белоусова, И.В.Третьякова, М.С.Калмыкова, Е.И.Ярыгина
РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ
К ЛАБОРАТОРНЫМ ЗАНЯТИЯМ
ПО ДИСЦИПЛИНЕ
«ВИРУСОЛОГИЯ»
для студентов 3 курса
ветеринарно-биологического факультета
Москва 2012 г.
2
УДК 619:578 (07)
Р.В.Белоусова, И.В.Третьякова, М.С.Калмыкова, Е.И.Ярыгина
Рабочая тетрадь для самостоятельной работы студентов ветеринарнобиологического факультета высших учебных заведений на лабораторных и
практических занятиях по дисциплине «Вирусология».
В рабочей тетради представлены протоколы к лабораторным занятиям по
дисциплине «Вирусология», вопросы к промежуточному и рубежному контролю знаний (контрольная работа), вопросы к экзамену по дисциплине.
Утверждена учебно-методической комиссией ветеринарно-биологического
факультета ФГБОУ ВПО МГАВМиБ (протокол № 7 от 23.01.2012 г.).
3
Содержание
стр.
Введение
4
Протоколы к лабораторным занятиям
5
Приложение 1
22
Приложение 2
23
Приложение 3
31
4
Введение.
Рабочая тетрадь предназначена для аудиторной и внеаудиторной (домашней) самостоятельной работы студентов по дисциплине «Вирусология».
Выполняя аудиторную лабораторную работу, студент, следуя пояснениям преподавателя, самостоятельно выполняет задание и оформляет протокол к нему (заполняет таблицы, делает рисунки, отвечает на поставленные
вопросы, решает диагностические задачи и т.д.). По выполнению задания
преподаватель оценивает самостоятельную работу студента по пятибалльной
системе и подписывает протокол.
Для выполнения внеаудиторной работы и подготовки к промежуточному контролю знаний (тестированию) студенту рекомендуется самостоятельно изучить основную (дополнительную) литературу и материалы лекции
по теме (вопросы и темы тестов см. в приложении 1).
При изучении дисциплины «Вирусология» студент пишет контрольную работу – « рубежный контроль знаний» (вопросы см. в приложении 2) и
сдаёт экзамен (вопросы см. в приложении 3).
5
Протокол к лабораторному занятию
Тема: «Заражение и вскрытие лабораторных животных. Индикация вирусов в организме лабораторных животных»
1. Заполните таблицу
Тропизм
вируса
Метод(ы) заражения лабораторного животного
2. Оформите протокол вскрытия
Протокол вскрытия № 1
от «_____»_________ 201___ г.
труп ______________________________________ (вид животного), умерщвлённого методом ____________________________________________.
Перед проведением вскрытия животное _______________________________
__________________________________________________________________
(укажите способ фиксации животного)
Опишите методику (последовательность) вскрытия и отбора пат. материала
для исследований: _________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
6
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Использование куриных эмбрионов в вирусологии.
Методы заражения куриных эмбрионов»
Протокол № 2
от «_____»_________ 201___ г.
Живая система _____________________________________________________
(вид, возраст)
Перед заражением КЭ _____________________________________________
(укажите вид исследования и признаки жизнеспособности КЭ)
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Вид вируса в
исходном
материале
1.
Заражение живой системы
Тропизм
Способ заражения
вируса
(сделать рисунок)
2.
После заражения КЭ _____________________________________________
(укажите условия инкубации)
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
7
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Индикация вирусов в куриных эмбрионах.
Индикация гемагглютинирующих вирусов.
Капельная реакция гемагглютинации (РГА)»
Протокол № 3
от «_____»_________ 201___ г.
Живая система _____________________________________________________
Методика вскрытия КЭ:
Вид вируса в
исходном
материале
1.
2.
Методика индикации вируса в КЭ
и признаки репродукции
Капельная РГА (компоненты и
учёт результата):
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
Патологические изменения:
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
8
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Титрование вирусов по гемагглютинирующей активности
в количественной реакции гемагглютинации (РГА)»
Протокол № 4
от «_____»_________ 201___ г.
Протокол титрования вируса болезни Ньюкасла
по гемагглютинирующей активности.
№№ лунок
1
1:2
2
1:4
3
1:8
4
1:16
5
1:32
6
7
1:64 К эр.
Разбавитель (ф.р-р,
мкл)
Вирус, мкл
1% взвесь эр. (мкл)
Контакт 25-30 минут при комнатной температуре
Учёт реакции
Для определения титра вируса необходимо:__________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
Исходя из этого, за титр вируса принимают _________________
_______________________________________________________
Титр вируса равен ____________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
9
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Использование культуры клеток в вирусологии.
Получение первично-трипсинизированной культуры клеток.
Индикация вирусов в культуре клеток»
Протокол № 5
от «_____»_________ 201___ г.
Живая система _____________________________________________________
Метод контроля ____________________________________________________
Графическое изображение: сделайте рисунки в соответствующих столбцах
таблицы:
Не заражённая живая система (ука- Заражённая живая система. ЦПД
жите название)
Рис. 1 а: контроль
Рис. 1 б: оценить ЦПД по площади
изменённого монослоя
Рис.2 а: контроль
Рис. 2 б: оценить ЦПД по изменённой
морфологии клеток
Рис.3 а: контроль
Рис. 3 б: оценить ЦПД по изменённой
морфологии клеток
10
Рис.4 а: контроль
Рис. 4 б: оценить ЦПД по изменённой
морфологии клеток
Учёт результатов РГАд: __________________________________________
укажите тип гемадсорбции
Графическое изображение РГАд:
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
11
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Серологические реакции.
Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)»
Протокол № 6
от «_____»_________ 201___ г.
Протокол титрования сыворотки в РТГА
Впишите в соответствующие ячейки таблицы количество вносимых компонентов реакции на каждом этапе.
№№ лунок
1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12
Разведения
1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640
КОНТРОЛИ
Sх
Компоненты:
ЭР Sх
АГ (вируса)
ГАЕ
2
1 1/2 1/4
1.Физ.р-р
(мкл)
2. Sх 1:10
3. Вирус, мкл
4 ГАЕ
Контакт -25-30 мин. при комнатной температуре
5. 1% взвесь
эритроцитов
Контакт -25-30 мин. при комнатной температуре
6. Учёт результатов
Что принимают за титр антител в сыворотке крови? __________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
Исходя из этого, титр антител Sх равен ________________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
12
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Серологические реакции.
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)»
Протокол № 7
от «_____»_________ 201___ г.
Протокол титрования сыворотки в РНГА
Впишите в соответствующие ячейки таблицы количество вносимых компонентов реакции на каждом этапе.
3
4
5
6
1:40 1:80 1:160 1:320
7
SХ
8
9
10 11 12
КОНТРОЛИ
Эритроцитарного диагностикума
Эритроцитарный
диагностикум +
SN (контроль специфичность)
2. Sх (1:5)
3.
Эритроцитарный диагностикум
(Эр + АГ)
2
1:20
Эритроцитарный
диагностикум +
SS (контроль активности)
1.Физ.р-р (мкл)
1
1:10
Эритроциты +
сыворотка
на самоагглютинацию
№№ лунок
Разведения Sх
Компоненты
Контакт -2 часа 370С (или комнатная температура)
6. Учёт результатов
Что принимают за титр антител в сыворотке крови? __________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
Исходя из этого, титр антител в Sх равен ________________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
13
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Серологические реакции.
Реакция диффузионной преципитации (РДП)»
Протокол № 8
от «_____»_________ 201___ г.
1. Сформулируйте диагностическую задачу:_________________________
__________________________________________________________________
2. Впишите условные обозначения компонентов реакции в соответствии с
диагностической задачей:
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
3. Через 48 часов проведите учёт результатов реакции по линии преципитации.
4.
В
исследуемой
сыворотке
обнаружены
антитела против
вируса
__________________________________________________________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
14
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Серологические реакции.
Реакция нейтрализации (РН)»
Протокол № 9
от «_____»_________ 201___ г.
Протокол учёта РН в культуре клеток
Разведения сывороток
Lg разведения
Кол-во
объектов
1:2 = 10- 0,3
1:4 = 10- 0,6
1:8 = 10- 0,9
1:16 = 10- 1,2
1:32 = 10- 1,5
1:64 = 10- 1,8
1:128 = 10-2
Контроли:
КК
Сыворотки
Вируса (100 ЭД50/мл)
- 0,3
- 0,6
- 0,9
- 1,2
- 1,5
- 1,8
-2,0
4
4
4
4
4
4
4
-
4
4
4
Наличие
ЦПД
Защита сывороткой
есть
нет
ЦПД ЦПД +
Проведите статистическую обработку полученных результатов по методу
Кербера: _________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Исходя из этого, титр Sх равен _______________________________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
15
Протокол к лабораторному занятию
Тема «Серологические реакции.
Иммуноферментный анализ (ИФА)»
Протокол № 10
от «_____»_________ 201___ г.
Протокол обнаружения антител в сыворотке крови
3
4
5
6
7
8
Учёт реакции
коньюгат
субстрат
контакт 10 мин., +20°С
2
контакт 30 мин., +20°С, отмыв 3 раза
1
S-
Компоненты
Пробы
(мкл)
S + SХ1 SХ2
контакт 30 мин., +20°С, отмыв 3 раза
№
лунок Антиген
(AS+),
мкл
контакт 16-18 час., +4°С, отмыв 3 раза
методом непрямого ИФА
Впишите в соответствующие ячейки таблицы количество вносимых компонентов реакции на каждом этапе.
Учёт результатов реакции обозначьте в виде: «+» - положительный результат, « – » - отрицательный результат.
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
16
Протокол к практическому занятию
Тема «Титрование вирусов по инфекционной активности»
от «_____»_________ 201___ г.
Протокол титрования вируса по методу Кербера к задаче №___________
Разведение вируса
Кол-во тестобъектов
в группе
Результат действия вируса
обнаружен (+)
не обнаружен (-)
Проведите статистическую обработку полученных результатов по методу
Кербера ___________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Титр вируса равен _______________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
17
Диагностические задачи по определению инфекционного титра вируса
Задача № 1. Вирус эктромиелии мышей титровали путём внутрибрюшинного заражении белых мышей. Использовали 8 разведений вируса. Доза заражения – 0,2 мл. Каждым разведением заражали 4 мышей. К концу опыта от
заражения пало мышей в разведении:
10-1 – 4
10-4 – 3
10-7 – 0
10-2 – 4
10-5 – 1
10-8 – 0
10-3 – 3
10-6 – 1
Определите титр вируса.
Задача № 2. Вирус болезни ньюкасла титровали на куриных эмбрионах. Использовали 7 разведений вируса. Каждым разведением вируса заражали по 8
эмбрионов в аллантоисную полость в дозе 0,1 мл. К концу опыта от заражения пало эмбрионов в разведении:
10-1 – 8
10-4 – 5
10-2 – 8
10-5 – 2
10-3 – 7
10-6 – 1
10-7 – 0
Определите титр вируса
Задача № 3. Вирус осповакцины на культуре клеток титровали путём заражения культуры клеток. Использовали 10 разведений вируса. Каждое разведение вируса вносили в 6 культур куриных фибробластов в дозе 0,1 мл. К
концу опыта ЦПД наблюдали в следующем числе культур:
10-1 – 6
10-4 – 5
10-7 – 2
10-2 – 6
10-5 – 5
10-8 – 1
10-3 – 6
10-6 – 4
10-9 – 1
10-10 – 0
Определите титр вируса.
Задача № 4. Вирус ящура титровали путём интрацеребрального заражения
белых мышей. Использовали 7 разведений вируса. Доза заражения – 0,25 мл.
Каждым разведением заражали 6 мышей. К концу опыта от заражения пало
мышей в разведении:
18
10-1 – 6
10-4 – 4
10-2 – 6
10-5 – 2
10-3 – 5
10-6 – 1
10-7 – 0
Определите титр вируса.
Задача № 5. Вирус инфекционного ларинготрахеита кур титровали на куриных эмбрионах. Использовали 9 разведений вируса. Каждым разведением
вируса заражали по 6 эмбрионов на ХАО в дозе 0,2 мл. К концу опыта от заражения пало эмбрионов в разведении:
10-1 – 6
10-4 – 4
10-7 – 1
10-2 – 5
10-5 – 2
10-8 – 0
10-3 – 4
10-6 – 1
10-9 – 0
Определите титр вируса.
Задача № 6. Вирус бешенства титровали путём интрацеребрального заражения белых мышей. Использовали 9 разведений вируса. Доза заражения – 0,2
мл. Каждым разведением заражали 10 мышей. К концу опыта от заражения
пало мышей в разведении:
10-1 – 10
10-4 – 8
10-7 – 2
10-2 – 10
10-5 – 7
10-8 – 1
10-3 – 9
10-6 – 4
10-9 – 0
Определите титр вируса.
Задача № 7. Вирус болезни Марека титровали на куриных эмбрионах. Использовали 6 разведений вируса. Каждым разведением вируса заражали по 4
эмбриона в желток в дозе 0,25 мл. К концу имели изменения окраски желтка
эмбрионы в разведении:
10-1 – 4
10-3 – 3
10-5 – 0
10-2 – 4
10-4 – 1
10-6 – 0
Определите титр вируса.
Задача № 8. Вирус болезни Ауэски титровали путём внуримышечного заражения кроликов. Использовали 5 разведений вируса. Доза заражения – 0,5
19
мл. Каждым разведением заражали 4-х кроликов. К концу опыта характерную клиническую картину наблюдали у кроликов в разведении:
10-1 – 4
10-4 – 1
10-2 – 4
10-5 – 0
10-3 – 3
Определите титр вируса.
Задача № 9. Вирус инфекционного ринотрахеита КРС титровали путём заражения культуры клеток. Использовали 8 разведений вируса. Каждое разведение вируса вносили в 6 матрасов с культурой клеток ПТ-80 в дозе 0,1 мл. К
концу опыта ЦПД наблюдали в следующем числе матрасов:
10-1 – 6
10-4 – 5
10-7 – 2
10-2 – 6
10-5 – 5
10-8 – 1
10-3 – 6
10-6 – 2
Определите титр вируса.
Задача № 10. Вирус бронхита кур титровали на куриных эмбрионах. Использовали 7 разведений вируса. Каждым разведением вируса заражали по 6 эмбрионов в аллантоисную полость в дозе 0,2 мл. К концу опыта при вскрытии
обнаружена карликовость и мумификация зародыша у эмбрионов в разведении:
10-1 – 6
10-3 – 4
10-5 – 1
10-2 – 5
10-4 – 2
10-6 – 1
10-7 – 0
Определите титр вируса.
Ответы:
№1 – 5 х 104,5 ЛД50/мл
№2 – 105,38 ЭЛД50/мл
№3 – 107,5 ЦТД50/мл
№4 – 4 х 104,5 ЛД50/мл
№5 – 5 х 104,3 ЭЛД50/мл
№6 – 5 х 105,6 ЛД50/мл
№7– 4 х 103,5 ЭИД50/мл
№8 – 2 х 103,5 ИД50/мл
№9 – 107,0 ЦТД50/мл
№10– 5 х 103,5 ЭИД50/мл
20
Протокол к практическому занятию
Тема «Индикация вирусов по вирионам и внутриклеточным
тельцам-включениям»
Протокол № 10
от «_____»_________ 201___ г.
Графическое изображение: сделайте рисунки в столбцах таблицы:
Рис. 1. Индикация вируса оспы по вирионам (элементарным тельцам)
Дайте описание препарата и сделайте рисунок
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
Рис.2. Индикация вируса бешенства по тельцам-включениям
Дайте описание препарата и сделайте рисунок
Вирус бешенства образует внутриклеточные тельца-включения –
_________________________________________
(напишите название телец-включений)
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
21
Протокол к практическому занятию
Тема «Полимеразная цепная реакция (ПЦР)»
Протокол № 11
от «_____»_________ 201___ г.
Опишите электрофореграммы результатов ПЦР (укажите треки положительного и отрицательного контролей, положительных и отрицательных проб)
№1
1 2 3 4 5 6 7 8 9
№2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
1 ______________________________
2______________________________
3______________________________
4_______________________________
5_______________________________
6_______________________________
7_______________________________
8_______________________________
9_______________________________
1____________________________
2____________________________
3____________________________
4____________________________
5____________________________
6____________________________
7____________________________
8____________________________
9____________________________
10___________________________
11___________________________
Подпись студента _______________ (_____________________________)
Оценка преподавателя «____» _________________ (ФИО преподавателя)
22
Приложение 1
Перечень тем к промежуточному контролю знаний
№ теста
Тест №1
Тест №2
Тест №3
Тест №4
Тест №5
Тест № 6
Тест №7
Тест №8
Тест №9
Тест №10
Тест №11
Тест №12
Тест №13
Тема
(Л – тема лекции; ЛЗ – тема лабораторного занятия)
1. Л: Введение в вирусологию
2. ЛЗ: Хранение и уничтожение вирусов, Правила работы с
вирусами. Основные направления борьбы с вирусными болезнями. Правила отбора и транспортировки пат. материала.
1. Л: Химический состав и структура вирионов
2. ЛЗ: Использование лабораторных животных в вирусологии
1. Л: Генетика вирусов
2. ЛЗ: Получение первично-трипсинизированной культуры
клеток. Индикация вирусов в культуре клеток по ЦПД.
1. Л.: Культивирование вирусов
2. ЛЗ: Индикация вирусов в культуре клеток. РГАд. Тельцавключения.
1. Л: Репродукция вирусов
2. ЛЗ: Использование куриных эмбрионов в вирусологии
1. Таксономия вирусов
2. ЛЗ: Индикация вирусов в КЭ. Индикация вирусов по вирионам
1. Л.: Противовирусный иммунитет
2. ЛЗ: Гемагглютинирующий титр вирусов
1. Л.: Серологические реакции в вирусологии
2. ЛЗ: РДП, РИФ
1. Л. Патогенез вирусных болезней
2. ЛЗ: РНГА
1. Л. Биотехнологические основы производства вакцин
2. ЛЗ: РТГА
1. ЛЗ ИФА
1. ЛЗ РН
1. Л. Полимеразная цепная реакция
23
Приложение 2
Вопросы к рубежному контролю знаний (контрольная работа).
1. Вирусология – это наука, изучающая:
1) распространённость инфекционных болезней
2) вирусы и вызываемые ими болезни
3) возбудителей инфекционных болезней
4) состояние внутренней среды организма
2. Вирус-это:
1) микроорганизм
2) внеклеточное образование с генетической информацией, реализуемой
только в живой клетке
3) организм, несущий генетическую информацию
4) кариотическая клетка
3. Какой способ размножения (репродукции) у вирусов?
1) дисъюнктивный
2) спорообразование
3) почкование
4) деление
4. Определите последовательность постановки диагноза на вирусную болезнь:
1) отбор патматериала
2) лабораторная диагностика
3) клинические признаки
4) эпизоотологические данные
5) патологоанатомические изменения
5. Какие виды патматериала можно отобрать от больных животных при подозрении на вирусную болезнь?
1) паренхиматозные органы
2) кусочки поражённой кожи
3) смывы со слизистых оболочек
4) лимфатические узлы
5) кровь
6. Как называется способность вирусов размножаться в клетках определенного вида?
1) агглютинация
2) тропизм
3) виропексис
4) цитопатическое действие
24
7. Вирионы просто устроенных вирусов содержат:
1) только нуклеиновую кислоту
2) нуклеиновую кислоту, капсид и суперкапсидную оболочку
3) только белки
4) нуклеиновую кислоту и капсид
8. Выберите соответствие между методами и способами хранения и уничтожения вирусов:
1) Химический метод уничтожения
вирусов
2) Химический метод хранения вирусов
3) Физический метод уничтожения
вирусов
4) Физический метод хранения вирусов
1) воздействие УФ-лучами
2) замораживание при температуре
минус 1960С
3) обработка раствором хлорамином
4) консервация в 50% растворе глицерина
9. Единицей измерения размера вириона является:
1.нанометр 2. сантиметр
3. дальтон
4. миллиметр
10. Выберите соответствие между этапом жизненного цикла однослойной
культуры клеток и процессом, происходящим в культуре клеток:
1. логарифмический
рост
2. стационарная
3. старение и гибель
4. адаптации
1 дегенерация клеток, изменение морфологии, разрушение монослоя клеток
2 клетки делятся в геометрической прогрессии до
формирования монослоя
3 клетки не делятся, но сохраняют жизнеспособность
4 клетки оседают и прикрепляются к стенке матраса
11. Соответствие между названием патогена и его определением:
1. вироид
2. прион
3.вирус-сателлит
1 крупная белковая макромолекула
2 вирус, реплицирующийся только в присутствии вирусапомощника
3 патогенный агент, состоящий только из короткой молекулы РНК без капсида
12. Основной критерий, лежащий в основе классификации вирусов по
Д.Балтимору?
1) размер вириона
2) наличие липопротеидной оболочки
3) круг восприимчивых хозяев
25
4) репликация вирусного генома
5) патогенность
13. Соответствие семейства вирусов и типа ДНК:
1. парвовирусы
2. асфавирусы
3. герпесвирусы
1 двуспиральная линейная
2 двуспиральная кольцевая
3 односпиральная линейная
14. Что означает термин «идентификация» вирусов?
1) установление титра вируса
2) выделение вируса
3) обнаружение вируса
4) установление вида вируса
15. Любые изменения монослоя клеток и морфологии клеток под действием
вируса называются:
1) цитопатическое действие
2) репродукция
3) тропизм
4) агглютинация
5) адсорбция
16. Каким методом можно обнаружить гемадсорбирующие вирусы в заражённой культуре клеток?
1) РИФ
2) РГА
3) метод бляшкообразования
4) РГАд
5) световая микроскопия телец-включений
17. По цитопатическому действию в культуре клеток можно провести:
1) вирусовыделение
2) индикацию вируса
3) доказательство этиологической роли вируса
4) идентификацию вируса
18. Передача генетической информации по формуле РНК - ДНК- РНК - белок
осуществляется у вирусов семейства:
1) ретровирусы
2) герпесвирусы
3) аденовирусы
4) ортомиксовирусы
5) парвовирусы
26
19. Выберите соответствие между структурой нуклеиновой кислоты вируса и
путём передачи генетической информации:
1. РНК-димер
2. односпиральная позитивная РНК
3. односпиральная негативная РНК
4. двуспиральная ДНК
1
2
3
4
РНК - ДНК - РНК - белок
РНК - РНК - белок
РНК - белок
ДНК - РНК - белок
20. Укажите последовательность этапов репродукции ДНК-геномных вирусов:
1) трансляция вирусных белков
2) транскрипция иРНК
3) адсорбция
4) депротеинизация
5) репликация
6) проникновение вируса в клетку
7) сборка вириона
8) выход вириона из клетки
21. Функции структурных белков:
1) защита вириона
2) организация проникновения в клетку и выход из неё
3) ингибиторы клеточного биосинтеза
4) передача генетической информации
5) самосборка вириона
6) адсорбция вириона на клетке
22. Какими вирусами заражают куриный эмбрион в аллантоисную полость?
1) вирусом гриппа
2) вирусом ньюкасловской болезни
3) вирусом болезни Марека
4) вирусом оспы голубей
5) вирусом инфекционной анемии лошадей
23. Какой фермент участвует в синтезе иРНК у вирусов с негативным РНКгеномом?
1) ДНК-зависимая РНК-полимераза
2) РНК-зависимая РНК-полимераза
3) ревертаза
4) праймаза
5) репликаза
24. Какие признаки репродукции вируса могут быть в культуре клеток?
1) флуоресценция
2) элюция
27
3) гемагглютинация
4) цитопатическое действие
25. Выберите соответствие между типом культуры клеток и её признаком:
1. первичнотрипсинизированная
2. перевиваемая
3. субкультура
4. диплоидная
1 морфологически однородная, сохраняющая свой
кариотип на протяжении 50 пассажей и не обладающая туморогенностью
2 полученная из первичной, сохраняющая свой кариотип на протяжении 3-5 пассажей и не обладающая туморогенностью
3 полученная из органов животного, характеризующаяся 4 фазами жизненного цикла, не обладающая туморогенностью
4 полученная из диплоидной, имеющая гетероплоидный кариотип и сохраняющая жизнеспособность
неограничеснный срок, обладающая туморогеннотью

26. Выберите соответствие между раствором и его назначением:
1. среда №199
1 ростовая питательная среда
2. среда Игла + сыворотка крови 2 диспергирующий раствор
КРС
3.раствор Хенкса
3 поддерживающая питательная среда
4. раствор трипсина
4 солевой раствор
27. Выберите соответствие между единицей обозначения инфекционного
титра вируса и эффектом его действия в живой системе
1. ЭЛД50
2. ИД50
3. ЛД50
4. ЦПД50
5. ООЕ
1
2
3
4
5
гибель белых мышей
оспины на ХАО
нарушение координации движения у кроликов
гибель куриных эмбрионов
округление клеток и разрывы в монослое
28. Выберите признаки репродукции вирусов в куриных эмбрионах:
1) нарушение координации движений
2) цитопатическое действие
3) гибель
4) мумификация зародыша
5) повышение температуры
6) оспины на ХАО
7) реакция гемагглютинации
28
29. Преимущество живых вакцин перед инактивированными:
1) высокая напряжённость и длительность иммунитета
2) слабая иммуногенность
3) однократное введение
4) малые прививочные дозы
5) только парентеральный способ введения
6) высокие прививочные дозы
7) возможность введения стельным животных
30. Какая стадия репродукции отсутствует у вирусов с позитивным РНКгеномом:
1) ассамблирования
2) репликации
3) депротеинизации
4) транскрипции
5) трансляции
31. Выберите соответствие между фактором иммунитета и его функциональным свойством:
1. В-лимфоциты
2. интерферон
3. макрофаги
4. Т-лимфоциты
5. NK-клетки
1 блокирование инициации трансляции вирусных белков
2 презентация антигенов для иммунокомпетентных клеток
3 синтез специфических иммуноглобулинов
4 уничтожение заражённых вирусом клеток
5 распознавание и уничтожение чужеродных антигенов
32. Укажите последовательность стадий патогенеза вирусной инфекции
1) первичная локализация и репродукция
2) вторичная диссеминация
3) вторичная локализация и репродукция
4) выделение
5) проникновение
6) первичная диссеминация
33. Выберите соответствие между видом вакцины и способом её получения:
1. синтетические
2. генноинженерные
3. живые
4. инактивированные
5. сплит-вакцины
1 полученные на основе рекомбинантных ДНКмолекул
2 полученные из протективных вирусных белков,
синтезированных искусственным путём
3 полученные из отдельных вирусных компонентов
4 полученные из эпизоотических штаммов вирусов,
убитых разными способами
5 полученные их аттенуированных штаммов вирусов
29
34. Выберите типы симметрии вирионов вирусов:
1. спиральный 2. линейный 3. кубический 4. сложный 5. круглый
35. Какую функцию выполняет геномная позитивная РНК при репродукции
вирусов?
1. транспортную 2. промежуточную 3. рибосомальную 4. информационную
36. Антивирусное действие интерферона проявляется в:
1) специфическом взаимодействии с вирусом
2) разрушении вирусов
3) агглютинации вирусов
4) блокировании инициации трансляции вирусных белков
37. Пути получения вакцинных штаммов вирусов:
1) адаптация на невосприимчивых живых системах
2) путём посева на средах Игла и 199
3) использование природных ослабленных штаммов вируса
4) путём пассажа на восприимчивых животных
5) путём посева на МПА, МПБ
6) использование гетеротипичных антигенно родственных вирусов
38. Представление вирусных белков (эпитопов) в составе комплекса гистиосовместимости на поверхности макрофагов для запуска иммунных реакций
называется:
1) презентация
2) адаптация
3) репликация
4) полимеризация
5) транскрипция
39. Длительное сохранение вируса в клетках хозяина называется:
1) персистенция
2) презентация
3) клонирование
4) адаптация
5) ассамблирование
40. Как называется форма клеточной инфекции, когда вирусного геном
встраивается в геном клетки хозяина?
1) абортивная
2) продуктивная
3) острая
4) хроническая
5) интегративная
30
Ответы к рубежному контролю знаний
№1–2
№2–2
№3–1
№ 4 – 4,3,5,1,2
№ 5 – 2,3,5
№6–2
№7–4
№ 8 – 1-3, 2-4, 31, 4-2
№9–1
№ 10 – 1-2, 2-3, 31, 4-4
№ 11 – 1-3, 2-1, 32
№ 12 – 4
№ 13 – 1-3, 2-2, 31
№ 14 – 4
№ 15 – 1
№ 16 – 4
№ 17 – 2
№ 18 – 1
№ 19 – 1-1, 2-3, 32, 4-4
№ 20 – 3-6-4-2-15-7-8
№ 21 – 1,2,5,6
№ 22 – 1,2
№ 23 – 2
№ 24 – 4
№ 25 – 1-3, 2-4, 32, 4-1
№ 26 – 1-3, 2-1, 34, 4-2
№ 27 – 1-4, 2-3, 31, 4-5, 5-2
№ 28 – 3,4,6,7
№ 29 – 1,3,4
№ 30 – 4
№ 31 – 1-3, 2-1, 32, 4-5, 5-4
№ 32 – 5-1-6-3-24
№ 33 – 1-2, 2-1, 35, 4-4, 5-3
№ 34 – 1,3,4
№ 35 – 4
№ 36 – 4
№ 37 – 1,3,6
№ 38 – 1
№ 39 – 1
№ 40 – 5
31
Приложение 3
Вопросы к экзаменам
1. Введение в вирусологию: вирусология как наука, известные учёныевирусологи, этапы развития вирусологии.
2. Вирус: строение и химический состав, функции структур вириона. Отличия от других инфекционных агентов. Формы существования вирусов.
3. Характеристика белков вириона: строение и функции структурных белков.
4. Характеристика белков вириона: строение и функции неструктурных белков.
5. Нуклеиновые кислоты вирусов: их структура, функции. Отличия от нуклеиновых кислот клетки.
6. Таксономия вирусов: основные критерии вирусов для их систематики, основные таксоны. Правила номенклатуры таксонов вирусов.
7. Вид вируса: определение, критерии вирусов вида, номенклатура вида вируса.
8. Род вируса: определение, критерии вирусов рода, номенклатура рода вируса.
9. Семейство вирусов: определение, критерии вирусов семейства, номенклатура семейства
10. Характеристика этапов репродукции вирусов. Способы проникновения
вирусов в клетку.
11. Особенности репродукции вирусов с разными геномами. Классификация
вирусов по Д.Балтимору.
12.Репродукция ДНК- геномных вирусов: основные этапы, особенности репродукции. Примеры.
13. Репродукция РНК - вирусов: основные этапы и особенности репродукции
вирусов с позитивной полярностью генома. Примеры.
14. Репродукция РНК - вирусов: основные этапы и особенности репродукции
вирусов с негативной полярностью генома. Примеры.
15. Особенности транскрипции вирусов с разным геномом. Примеры.
16. Трансляция вирусных белков: инициация, элонгация, терминация. Посттрансляционные модификации.
17. Патогенез вирусной болезни. Способы проникновения, диссеминации и
выведения вирусов из организма хозяина.
18. Этапы патогенеза вирусной болезни. Практическое значение патогенеза
болезни при её диагностике.
19. Нейропробазия и септиневрия (септиневрит), как формы диссеминации
нейротропных вирусов на примере вируса бешенства.
20. Взаимосвязь этапов патогенеза вирусной болезни и иммунного ответа.
21. Факторы противовирусного иммунитета, их характеристика и роль.
22. Факторы неспецифического иммунитета при вирусных болезнях. Интерферон: природа, синтез в организме, противовирусное действие.
23. Факторы специфического иммунитета при вирусных болезнях. Роль клеточного иммунитета в защите организма от вируса.
32
24. Вирусные белки, их роль в серодиагностике. Специфические антитела.
Характеристика иммуноглобулинов.
25. Противовирусные вакцины. Классификация. Способы получения. Их роль
в борьбе с вирусными болезнями. Примеры.
26. Первое поколение вакцин: виды, методы получения, достоинства и недостатки. Примеры.
27. Второе поколение вакцин: виды, методы получения, достоинства и недостатки. Примеры.
28. Третье поколение вакцин: виды, методы получения, достоинства и недостатки. Примеры.
29. Основные биотехнологические подходы к изготовлению вакцин первого
поколения. Инактиванты, адъюванты, стабилизаторы.
30. Устройство вирусологической лаборатории.
31. Правила работы в вирусологической лаборатории. Основные требования
при работе с вируссодержащим материалом.
32. Хранение и уничтожение вирусов: цели, методы. Направления борьбы с
вирусными болезнями.
33. Правила отбора, транспортировки и хранения патологического материала.
Подготовка первичного патологического материала для лабораторных исследований. Примеры.
34. Методы экспресс-диагностики вирусных болезней.
35. Культивирование вирусов. Живые системы: классификация, характеристика, требования при работе, достоинства и недостатки.
36. Тропизм вирусов. Выбор способа заражения живой системы. Методы заражения куриных эмбрионов.
37. Культура клеток: классификация, получение первичной культуры клеток,
сравнительная характеристика различных видов культур клеток.
38. Жизненный цикл культуры клеток. Растворы и питательные среды (примеры). Поддержание культуры клеток в лабораторных условиях.
39. Живые системы в вирусологии: виды, цели использование, преимущества, недостатки
40. Индикация вирусов в культуре клеток: заражение, видимые изменения и
методы их контроля.
41. Индикация вирусов в куриных эмбрионах: заражение, признаки репродукции вируса. Основной метод индикации гемагглютинирующих вирусов.
42. Индикация активного вируса: методы, живые системы, признаки положительной биопробы, примеры.
43. Экспресс-методы в вирусологии. Методы индикации вирионов вирусов.
Достоинства и недостатки.
44. Тельца-включения: характеристика, методы индикации, роль данного метода в диагностике бешенства.
45. Титрование вирусов по инфекционной активности. ЭД50 вируса. методика
титрования и статистическая обработка результатов титрования (метод Кербера).
33
46. Титрование вирусов по гемагглютинирующей активности. ГАЕ вируса,
методика титрования и определение титра вируса.
47. Вирусовыделение (изоляция): биопроба на живых системах, способы заражения, признаки репродукции.
48. Экспресс-методы в вирусологии. РДП: принцип, задачи, компоненты,
достоинства и недостатки.
49. Серологические реакции как метод идентификации выделенного вируса:
принцип, компоненты, учёт результатов. РИФ: принцип, варианты, задачи,
компоненты, достоинства и недостатки.
50. РНГА: принцип, задачи, компоненты, учёт результатов. Этапы изготовления эритроцитарных диагностикумов.
51. Современные методы идентификации вирусов на примере ИФА: принцип, варианты, задачи, компоненты, учёт результатов.
52. Методы индикации и идентификации гемагглютинирующих вирусов.
РГА, РТГА: принцип, задачи, компоненты, учёт результатов.
53. Эталонная серологическая реакция в диагностике вирусных болезней:
принцип, задачи, компоненты, учёт результатов, достоинства и недостатки.
54. Определение индекса нейтрализации в РН: цель, принцип, компоненты,
учёт и статистическая обработка результатов.
55. Методы индикации и идентификации гемадсорбирующих вирусов. РГАд,
РТГАд: принцип, задачи, компоненты, учёт результатов.
56. РТГА: принцип, задачи, компоненты и их подготовка. Определение титра
антител в РТГА
57. ПЦР: принцип, задачи, компоненты, достоинства и недостатки, учёт результатов.
58. Этапы ПЦР-анализа: цель, методика и компоненты каждого этапа.
59. Амплификация: принцип, компоненты, оборудование.
60. Серологические реакции и их использование в вирусологии. Экспресс- и
не экспресс-методы. Примеры.
61. Основные направления борьбы с вирусными болезнями. Современные
подходы к предупреждению возникновения и распространения вирусных болезней.
Решение диагностической задачи по:
1) определению инфекционной активности вируса
2) определению гемагглютинирующей активности вируса
3) описанию электронной микрофотографии вируса
4) идентификации вируса по индексу нейтрализации
5) определению титра сыворотки в РН по методу Кербера
6) определению цитопатического действия вируса на культуре клеток (симпласты, ЦПД)
7) учету результатов индикации вируса по ГАд в КК
8) вирусоскопии вирионов вируса оспы голубей
9) световой микроскопии телец – включений (т. Бабеша-Негри)
10) учету результатов ПЦР по электрофореграмме