(812) 412-8380 www.olvex-d.ru МОЧЕВАЯ КИСЛОТА Кат. №: 012.002 - 100 мл Кат. №: 012.012 - 200 мл Количество определений зависит от характеристик используемого анализатора и минимального рабочего объема кюветы. НАЗНАЧЕНИЕ Набор «МОЧЕВАЯ КИСЛОТА-ОЛЬВЕКС» предназначен для количественного определения содержания мочевой кислоты в сыворотке, плазме крови и моче человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике. Набор рассчитан для проведения 50 или 100 определений при расходе по 2,0 мл рабочего реагента на один анализ. перемешивании. Рабочий реагент стабилен при +2-8 °С в защищенном от света месте в плотно закрытом флаконе не менее 3-х недель. Бледно-розовая окраска рабочего реагента с величиной оптической плотности до 0,200 А, измеренной против дистиллированной воды при длине волны 500 нм, не влияет на правильность определения мочевой кислоты в исследуемом образце. ПРИНЦИП МЕТОДА Определение основано на проведении сопряженных реакций, каптализируемых уриказой и пероксидазой. Мочевая кислота под действием фермента уриказы окисляется до аллантоина, перекиси водорода и двуокиси углерода. Образующаяся в данной реакции перекись водорода при участии фермента пероксидазы способствует окислительному азосочетанию 3,5-дихлоргидрокси-2бензенсульфоната (DCHBS) и 4-аминоантипирина (4-ААП) с образованием окрашенного соединения (хинонимин). Интенсивность окраски реакционной среды пропорциональна содержанию мочевой кислоты в исследуемом материале и определяется фотометрически при длине волны 500 нм (490 – 540 нм). Тщательно закрывайте флаконы с реагентами после каждого использования! СХЕМА РЕАКЦИИ уриказа мочевая кислота + 2H2O + O2 _______> аллантоин + CO2 + H2O2 пероксидаза DCHBS + 4-ААП + H2O2 ________________> хинонимин + 2H2O СОСТАВ НАБОРА Реагент 1. Реагент 2. Калибратор – р-р мочевой к-ты, 357 мкмоль/л (6 мг/100 мл). АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Линейная область определения концентрации мочевой кислоты в диапазоне от 80 до 1200 мкмоль/л. Отклонение от линейности не более 5%. Чувствительность определения не более 40 мкмоль/л. Коэффициент вариации не более 5%. Качество набора может проверяться на отечественных или зарубежных контрольных сыворотках с аттестованным по данному методу показателем. Нормальные величины мочевой кислоты в сыворотке (плазме) крови: у мужчин 202 - 416 мкмоль/л; у женщин 142 - 339 мкмоль/л; в моче 1,49 - 4,46 ммоль/сут. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин у обследуемого контингента. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Негемолизированная сыворотка или плазма крови, моча. Перед проведением анализа свежую мочу следует развести физиологическим раствором в 10 раз. Аскорбиновая кислота до концентрации 570 мкмоль/л и билирубин до концентрации 250 мкмоль/л не влияют на правильность определений мочевой кислоты. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РЕАГЕНТА Содержимое одного флакона с Реагентом 2 растворить в содержимом одного флакона с Реагентом 1 при аккуратном ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Компоненты реакционной среды внести в пробирки в соответствии с таблицей: КОМПОНЕНТЫ РЕАКЦИОННОЙ СРЕДЫ ОПЫТНАЯ ПРОБА КАЛИБРОВОЧН. ПРОБА КОНТРОЛЬНАЯ (ХОЛОСТАЯ) ПРОБА Рабочий реагент, мл 2.0 2.0 2.0 Исследуемый образец, мкл 50 - - Калибратор, мкл - 50 - Вода дистилл., мкл - - 50 Объемы исследуемого образца и рабочего реагента можно изменить, соблюдая соотношение 1:40. Содержимое пробирок тщательно перемешать и инкубировать 10 минут в термостате при +37 °С. Измерить оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 500 (490-540) нм в кювете с длиной оптического пути 1,0 см. Окраска растворов стабильна в течении 15 мин после окончания инкубации, при хранении проб в защищённом от света месте при комнатной температуре (+18-25 °С). РАСЧЕТ Расчет концентрации (С) мочевой кислоты в пробе: 1. Сыворотка или плазма крови: Е пробы С = ____________ x 357 мкмоль/л Е калибр. где: Е пробы – оптическая плотность опытной пробы, ед. опт. плотн.; Е калибр. – оптическая плотность калибратора, ед. опт. плотн.; 357 – концентрация мочевой кислоты в калибраторе, мкмоль/л. 2. Моча: Е пробы С = ______________ x 0.357 х 10 х V ммоль/сутки Е калибр. где: Е пробы – оптическая плотность опытной пробы, ед. опт. плотн.; Е калибр. – оптическая плотность калибратора, ед. опт. плотн.; 0,357 – концентрация мочевой кислоты в калибраторе, ммоль/л; V – объем суточной мочи, л; 10 – коэффициент разведения исследуемого образца. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА Набор должен храниться в упаковке предприятияизготовителя в защищенном от света месте при +2-8 °С в течение всего срока годности. Допускается хранение набора при температуре до +25 °С не более 10 дней. Калибратор после вскрытия флакона стабилен в течение 2 месяцев. Срок годности набора – 6 месяцев.