СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ И
реклама
ÑÅËÜÑÊÎÕÎÇßÉÑÒÂÅÍÍÀß ÁÈÎËÎÃÈß, 2014, ¹ 6, ñ. 107-115 ÓÄÊ 636.2:591.16:577.125.33:577.334 doi: 10.15389/agrobiology.2014.6.107rus ÑÂÎÁÎÄÍÎÐÀÄÈÊÀËÜÍÎÅ ÎÊÈÑËÅÍÈÅ ËÈÏÈÄÎÂ È ÐÅÏÐÎÄÓÊÒÈÂÍÎÅ ÇÄÎÐÎÂÜÅ ÊÎÐΠÂ.À. ÑÀÔÎÍÎÂ1, À.Ã. ÍÅÆÄÀÍÎÂ2, Ì.È. ÐÅÖÊÈÉ2, Ñ.Â. ØÀÁÓÍÈÍ2, Ã.Í. ÁËÈÇÍÅÖÎÂÀ2 Ñâîáîäíîðàäèêàëüíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ (ÑÐÎ) ðàññìàòðèâàåòñÿ êàê îäèí èç äîìèíèðóþùèõ ìåòàáîëè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, êîòîðûå îáåñïå÷èâàþò ðåãóëÿöèþ ôóíêöèîíàëüíîé äåÿòåëüíîñòè ôèçèîëîãè÷åñêèõ ñèñòåì îðãàíèçìà, à òàêæå êàê èíäóêòîð îêñèäàòèâíîãî ñòðåññà ñâîáîäíîðàäèêàëüíîé ïàòîëîãèè. Ðåàêöèè ïåðîêñèäíîãî îêèñëåíèÿ ñëóæàò èñòî÷íèêîì îñíîâíîé ìàññû ýíåðãèè, íåîáõîäèìîé äëÿ æèçíåäåÿòåëüíîñòè, è ïîêàçàòåëåì óñòîé÷èâîñòè ìåòàáîëè÷åñêèõ ïðåâðàùåíèé â îðãàíèçìå. Îáðàçîâàíèå, íàêîïëåíèå è óòèëèçàöèÿ ïðîäóêòîâ ÑÐÎ êîíòðîëèðóåòñÿ ñèñòåìîé ïðîòèâîîêèñëèòåëüíîé (àíòèîêñèäàíòíîé) çàùèòû, âêëþ÷àþùåé íåôåðìåíòàòèâíûå è ôåðìåíòàòèâíûå çâåíüÿ.  óñëîâèÿõ îäíîãî èõ êðóïíûõ ïëåìçàâîäîâ ïî ðàçâåäåíèþ ìîëî÷íîãî ñêîòà êðàñíî-ïåñòðîé ïîðîäû «Äðóæáà» (Ïàâëîâñêèé ð-í, Âîðîíåæñêàÿ îáë.) â çèìíåñòîéëîâûé ïåðèîä íà 96 êîðîâàõ ìû èçó÷àëè îñîáåííîñòè ôóíêöèîíèðîâàíèÿ ñèñòåìû ïåðîêñèäíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ—àíòèîêñèäàíòíàÿ çàùèòà ïðè íîðìàëüíîì òå÷åíèè áåðåìåííîñòè è ãåñòîçå, à òàêæå ïðè íîðìàëüíîì òå÷åíèè ïîñëåðîäîâîãî ïåðèîäà è ïðè ïîñëåðîäîâîì ýíäîìåòðèòå, ñóáèíâîëþöèè ìàòêè è äèñôóíêöèè ÿè÷íèêîâ. Îïðåäåëÿëè ñîäåðæàíèå â êðîâè îáùèõ ëèïèäîâ, õîëåñòåðèíà, òðèãëèöåðèäîâ, ìàëîíîâîãî äèàëüäåãèäà (ÌÄÀ), ñóììó ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà (NO•), êîíöåíòðàöèþ âèòàìèíîâ Å è Ñ, àêòèâíîñòü ãëóòàòèîíïåðîêñèäàçû (ÃÏÎ), ãëóòàòèîíðåäóêòàçû (ÃÐ), êàòàëàçû, ñóïåðîêñèääèñìóòàçû (ÑÎÄ). Ïîêàçàíî, ÷òî â îñíîâå ðàçâèòèÿ ãåñòîçà è îñòðûõ ïîñëåðîäîâûõ îñëîæíåíèé ó êîðîâ ëåæèò âûñîêàÿ àêòèâíîñòü ïåðîêñèäíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ (ÏÎË) è ñèñòåìû îêñèäà àçîòà ïðè ñíèæåíèè ìîùíîñòè íåôåðìåíòàòèâíîãî çâåíà àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû è êîìïåíñàòîðíîì ïîâûøåíèè àêòèâíîñòè ôåðìåíòàòèâíîãî çâåíà. Òàê, â êðîâè êîðîâ, áîëüíûõ ãåñòîçîì, îòìå÷åíî óâåëè÷åíèå êîíöåíòðàöèè ÌÄÀ íà 42,3-43,0 %, NO• — íà 31,9-38,0 %. Ïðè ëåãêîé ôîðìå ãåñòîçà àêòèâíîñòü ãëóòàòèîíïåðîêñèäàçû (ÃÏÎ) âîçðîñëà íà 11,0 %, êàòàëàçû — íà 14,3 %, êîíöåíòðàöèÿ âèòàìèíà Ñ — íà 24,1 %, à êîëè÷åñòâî âèòàìèíà Å ñíèçèëîñü íà 11,7 % èç-çà óâåëè÷åíèÿ åãî ðàñõîäà íà íåéòðàëèçàöèþ òîêñè÷åñêèõ ïðîäóêòîâ ÏÎË. Ñ óñèëåíèåì òÿæåñòè ïàòîëîãè÷åñêîãî ïðîöåññà àêòèâíîñòü ÃÏÎ ïî ñðàâíåíèþ ñ òàêîâîé ó êëèíè÷åñêè çäîðîâûõ æèâîòíûõ âîçðàñòàëà íà 26,0 %, êàòàëàçû — íà 17,3 %, êîëè÷åñòâî âèòàìèíà Å ñíèæàëîñü íà 33,3 % (ð < 0,01), âèòàìèíà Ñ — íà 17,2 %. Íà ôîíå ïîâûøåíèÿ èíòåíñèâíîñòè ÑÐÎ îòìå÷àëè óñèëåíèå àíàýðîáíîãî ðàñïàäà óãëåâîäîâ äëÿ îáåñïå÷åíèÿ òêàíåé ðàçâèâàþùåãîñÿ ïëîäà ýíåðãèåé â óñëîâèÿõ íåäîñòàòêà êèñëîðîäà, êîòîðûé âîçíèêàåò â ñâÿçè ñ ðàññòðîéñòâîì ìàòî÷íî-ïëàöåíòàðíîãî êðîâîîáðàùåíèÿ. Âîñïàëèòåëüíûé ïðîöåññ â ïîëîâûõ îðãàíàõ ïîñëå ðîäîâ ðàçâèâàëñÿ íà ôîíå ïîâûøåíèÿ êîíöåíòðàöèè ÌÄÀ íà 76,0 %, NO• — â 2,9 ðàçà, àêòèâíîñòè ÃÏÎ — íà 65,8 %, ÃÐ — íà 14,6 %, ÑÎÄ — íà 46,0 %, êàòàëàçû — íà 45,7 % è ñíèæåíèÿ ñîäåðæàíèÿ âèòàìèíà E íà 35,5 %. Áåñïëîäíûå æèâîòíûå ñ äèñôóíêöèåé ÿè÷íèêîâ õàðàêòåðèçîâàëèñü âûñîêîé àêòèâíîñòüþ ïðîöåññîâ ïåðîêñèäàöèè ëèïèäîâ è íèçêîé ãåíåðàöèåé îêñèäà àçîòà, î ÷åì ñâèäåòåëüñòâóåò ïðåâûøåíèå êîíöåíòðàöèè ÌÄÀ â êðîâè íà 57,0 %, àêòèâíîñòè ÃÏÎ — íà 27,6 %, ÃÐ — íà 10,5 %, ÑÎÄ — íà 31,9 %, êàòàëàçû — íà 24,3 % ïðè ñíèæåíèè ñîäåðæàíèÿ NO• íà 56,9 % è âèòàìèíà Å — íà 31,6 % ïî ñðàâíåíèþ ñ àíàëîãè÷íûìè ïîêàçàòåëÿìè ó çäîðîâûõ æèâîòíûõ. Ïàäåíèå êîíöåíòðàöèè NO• â êðîâè ñëåäóåò îòíåñòè çà ñ÷åò ðåçêîãî ñíèæåíèÿ ãîðìîíñèíòåçèðóþùåé ôóíêöèè ÿè÷íèêîâ, è â òî æå âðåìÿ íèçêàÿ ïðîäóêöèÿ NO• ìîæåò ëåæàòü â îñíîâå íàðóøåíèÿ ãåíåðàòèâíîé ôóíêöèè ãîíàä. Âûñîêàÿ àêòèâíîñòü ðåàêöèé ïåðîêñèäíîãî îêèñëåíèÿ ñâîéñòâåííà òàêæå æèâîòíûì ñ õðîíè÷åñêîé ïàòîëîãèåé ìàòêè, îäíàêî ýòè ïðîöåññû ìåíåå âûðàæåíû, ÷åì ó êîðîâ ñ îñòðîé ïàòîëîãèåé. Êëþ÷åâûå ñëîâà: êîðîâû, êðîâü, ïåðîêñèäíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ, áåðåìåííîñòü, ïîñëåðîäîâîé ïåðèîä, íîðìà, ïàòîëîãèÿ. Ñâîáîäíîðàäèêàëüíîå, èëè ïåðîêñèäíîå, îêèñëåíèå ëèïèäîâ (ÑÐÎ, ÏÎË) â íàñòîÿùåå âðåìÿ ðàññìàòðèâàåòñÿ êàê îäèí èç äîìèíèðóþùèõ ìåòàáîëè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, êîòîðûå îáåñïå÷èâàþò ðåãóëÿöèþ ôóíêöèîíàëüíîé äåÿòåëüíîñòè ëþáûõ ôèçèîëîãè÷åñêèõ ñèñòåì îðãàíèçìà. Ðåàêöèè ïåðîêñèäíîãî îêèñëåíèÿ íîñÿò óíèâåðñàëüíûé õàðàêòåð, ñëóæàò èñòî÷íèêîì îñíîâíîé ìàññû ýíåðãèè, íåîáõîäèìîé äëÿ æèçíåäåÿòåëüíîñòè, è ïîêàçàòåëåì óñòîé÷èâîñòè ìåòàáîëè÷åñêèõ ïðåâðàùåíèé â îðãàíèçìå. Èíèöèàòîðû ñâîáîäíîðàäèêàëüíîãî îêèñëåíèÿ — àêòèâíûå ôîðìû 107 êèñëîðîäà (ÀÔÊ), îáðàçóþùèåñÿ â îêñèäàçíûõ (ìèòîõîíäðèàëüíûõ) è îêñèãåíàçíûõ (ìèêðîñîìàëüíûõ) ðåàêöèÿõ àýðîáíîãî îêèñëåíèÿ, ïðîòåêàþùèõ ïðè ó÷àñòèè ìîëåêóëÿðíîãî êèñëîðîäà (Î2).  ïðîöåññå ýòèõ ðåàêöèé Î2 ïîäâåðãàåòñÿ ïîñëåäîâàòåëüíîìó îäíîâàëåíòíîìó âîññòàíîâëåíèþ ñ îáðàçîâàíèåì òàê íàçûâàåìûõ ñâîáîäíîðàäèêàëüíûõ ñîåäèíåíèé, èìåþùèõ íåñïàðåííûé ýëåêòðîí. Ïðè ïîòåðå êèñëîðîäîì îäíîãî ýëåêòðîíà âíà÷àëå îáðàçóåòñÿ ñóïåðîêñèäíûé àíèîí-ðàäèêàë (Î2¯•), êîòîðûé çàòåì ïðåâðàùàåòñÿ â ïåðãèäðîêñèëüíûé ðàäèêàë (ÍÎ2•) è ïåðåêèñü âîäîðîäà (Í2Î2), ïîñëåäóþùåå âîññòàíîâëåíèå êîòîðîé ñîïðîâîæäàåòñÿ îáðàçîâàíèåì âîäû (Í2Î) è ãèäðîêñèëüíîãî ðàäèêàëà (ÎÍ•). Ïîñëåäíèé îòëè÷àåòñÿ âûñîêîé ðåàêöèîííîé ñïîñîáíîñòüþ è âûñòóïàåò îäíèì èç îñíîâíûõ èíèöèàòîðîâ ÏÎË (1-4). Ïðè îïðåäåëåííûõ óñëîâèÿõ íåýíçèìàòè÷åñêàÿ äèñìóòàöèÿ ñóïåðîêñèäíîãî àíèîíà ìîæåò ïðîäóöèðîâàòü ñèíãëåòíûé êèñëîðîä (1Î2), îáëàäàþùèé, êàê è ãèäðîêñèëüíûé ðàäèêàë, âûñîêîé ðåàêöèîííîé è áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ. ÀÔÊ âñòóïàþò â ðåàêöèè îêèñëåíèÿ ñ ïîëèíåíàñûùåííûìè ëèïèäàìè, â òîì ÷èñëå ñ æèðíîêèñëûìè îñòàòêàìè ôîñôîëèïèäîâ — îñíîâíûìè ñòðóêòóðíûìè êîìïîíåíòàìè áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàí, è èíèöèèðóþò îáðàçîâàíèå öåëîãî ðÿäà ìîëåêóëÿðíûõ ïðîäóêòîâ ÏÎË (ïåðîêñèäíûõ ðàäèêàëîâ RO2•): ãèäðîïåðåêèñåé ïîëèíåíàñûùåííûõ æèðíûõ êèñëîò, àëüäåãèäîâ è äèàëüäåãèäîâ, êåòîíîâ, ëàêòîíîâ, ýïîêñèäîâ, âåùåñòâ òèïà îñíîâàíèé Øèôôà è äð. Âñå îíè èãðàþò âàæíóþ ðîëü â ïðîöåññàõ ñòðóêòóðíîé ìîäèôèêàöèè áèîìåìáðàí è èçìåíåíèè èõ ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ (5). ×ðåçìåðíàÿ ïðîäóêöèÿ àêòèâíûõ ôîðì êèñëîðîäà è èçáûòî÷íîå íàêîïëåíèå â îðãàíèçìå ïðîäóêòîâ ÏÎË ïðèâîäèò ê èçìåíåíèþ ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ áèîìåìáðàí, àêòèâíîñòè ìíîãèõ ìåìáðàíîñâÿçàííûõ ôåðìåíòîâ, íàðóøåíèþ ïðîíèöàåìîñòè, à çàòåì ñòðóêòóðíîé öåëîñòíîñòè è ãåíîòîêñè÷åñêîìó îêèñëèòåëüíîìó ïîâðåæäåíèþ ÄÍÊ (6). Îáðàçîâàíèå, íàêîïëåíèå è óòèëèçàöèÿ ïðîäóêòîâ ÑÐÎ êîíòðîëèðóåòñÿ ñèñòåìîé ïðîòèâîîêèñëèòåëüíîé (àíòèîêñèäàíòíîé) çàùèòû, âêëþ÷àþùåé íåôåðìåíòàòèâíûå è ôåðìåíòàòèâíûå çâåíüÿ. Ñèñòåìà àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû (ÀÎÇ) îãðàíè÷èâàåò ïðîöåññû ñâîáîäíîðàäèêàëüíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ ïðàêòè÷åñêè âî âñåõ åãî çâåíüÿõ è ïîääåðæèâàåò ýòîò êëàññ ðåàêöèé íà îòíîñèòåëüíî ïîñòîÿííîì óðîâíå. Îíà êîíòðîëèðóåò ñîäåðæàíèå â îðãàíèçìå àêòèâíûõ ôîðì êèñëîðîäà, ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, ìîëåêóëÿðíûõ ïðîäóêòîâ ÏÎË (5) è èãðàåò èñêëþ÷èòåëüíóþ ðîëü â ïîääåðæàíèè ãîìåîñòàçà.  ôåðìåíòíîì çâåíå ñèñòåìû ÀÎÇ öåíòðàëüíîå ìåñòî çàíèìàåò ïðåäñòàâëåííàÿ ìåäü-, öèíê- è ìàðãàíåöñîäåðæàùèìè ôåðìåíòàìè ñóïåðîêñèääèñìóòàçà (ÑÎÄ), êîòîðàÿ êàòàëèçèðóåò ðåàêöèþ äèñìóòàöèè ñóïåðîêñèäàíèîí-ðàäèêàëà ñ îáðàçîâàíèåì ìîëåêóëÿðíîãî êèñëîðîäà è ïåðåêèñè âîäîðîäà, òàêæå ñïîñîáíîé îêàçûâàòü òîêñè÷åñêîå äåéñòâèå íà êëåòêè. Ðàçðóøåíèå ìîëåêóë Í2Î2 îñóùåñòâëÿþò ôåðìåíòû êàòàëàçà è ãëóòàòèîíïåðîêñèäàçà (8). Êàòàëàçà — ãåìàòèíñîäåðæàùèé ôåðìåíò, ðàçðóøàþùèé Í2Î2 áåç ó÷àñòèÿ àêöåïòîðîâ êèñëîðîäà. Äîíîðîì ýëåêòðîíîâ ïðè ýòîì ñëóæèò ñàìà ïåðåêèñü âîäîðîäà. Êàòàëàçà äëèòåëüíî ñîõðàíÿåò ñâîþ àêòèâíîñòü, íå òðåáóåò ýíåðãèè àêòèâàöèè, à ñêîðîñòü ðåàêöèè ðàçëîæåíèÿ ïåðîêñèäà âîäîðîäà ëèìèòèðóåòñÿ ëèøü ñêîðîñòüþ äèôôóçèè ñóáñòðàòà ê àêòèâíîìó öåíòðó ôåðìåíòà. Ãëóòàòèîíïåðîêñèäàçà, îäèí èç êîìïîíåíòîâ àíòèïåðåêèñíîãî êîìïëåêñà, âêëþ÷àþùåãî ãëóòàòèîí è ãëóòàòèîíðåäóêòàçó, êàòàëèçèðóåò ïðåâðàùåíèå ïåðîêñèäà âîäîðîäà è ãèäðîïåðåêèñåé æèðíûõ êèñëîò äî íåòîêñè÷åñêèõ ñîåäèíåíèé. Ýôôåêòèâíîñòü ãëóòàòèîíïåðîêñèäàçíîãî ìåõàíèçìà âîññòàíîâëåíèÿ ãèäðîïåðåêèñåé çàâèñèò îò ñî108 äåðæàíèÿ â îðãàíèçìå îñíîâíîãî äîíîðà âîäîðîäà — ãëóòàòèîíà. Ïîääåðæàíèå äîñòàòî÷íîãî êîëè÷åñòâà âîññòàíîâëåííîé ôîðìû ãëóòàòèîíà, îêèñëÿþùåãîñÿ ïðè ôóíêöèîíèðîâàíèè ãëóòàòèîíçàâèñèìûõ àíòèïåðåêèñíûõ ñèñòåì, îñóùåñòâëÿåòñÿ ôåðìåíòîì ãëóòàòèîíðåäóêòàçîé (ÃÐ).  íåôåðìåíòàòèâíîì çâåíå ñèñòåìû ÀÎÇ öåíòðàëüíîå ìåñòî çàíèìàþò òîêîôåðîëû (9), èç êîòîðûõ íàèáîëüøåé áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ îáëàäàåò α-òîêîôåðîë (âèòàìèí Å), ïîñòóïàþùèé â îðãàíèçì ñ ðàñòèòåëüíûìè è æèâîòíûìè êîðìàìè. Ñâîþ àíòèîêñèäàíòíóþ ôóíêöèþ îí îñóùåñòâëÿåò çà ñ÷åò ñîçäàíèÿ êîìïàêòíîé ìåìáðàííîé àðõèòåêòóðû, ïðåäîòâðàùàþùåé àòàêó àêòèâíûõ ôîðì êèñëîðîäà íà íåíàñûùåííûå æèðíîêèñëîòíûå îñòàòêè ìåìáðàííûõ ôîñôîëèïèäîâ, ëîêàëüíîãî ðàçðóøåíèÿ îáðàçóþùèõñÿ êèñëîðîäíûõ è ëèïèäíûõ ïåðîêñèäíûõ ðàäèêàëîâ. α-Òîêîôåðîë ñëóæèò ýôôåêòèâíûì «òóøèòåëåì» ñèíãëåòíîãî êèñëîðîäà, àêöåïòîðîì àíèîí-ðàäèêàëà êèñëîðîäà è «ïåðåõâàò÷èêîì» ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, íåïîñðåäñòâåííî ðåàãèðóÿ ñ íèìè íà ñòàäèè îáðûâà öåïåé (10, 11). Ïðèíÿòî ñ÷èòàòü, ÷òî àêòèâíî ðåàãèðîâàòü ñ ïåðîêñèäíûìè ðàäèêàëàìè ìîæåò òîëüêî âîññòàíîâëåííàÿ (ôåíîëüíàÿ) ôîðìà âèòàìèíà Å, èìåþùàÿ ñâîáîäíóþ ãèäðîêñèëüíóþ ãðóïïó. Ñðåäè âåùåñòâ, ñïîñîáíûõ âîññòàíàâëèâàòü îêèñëåííóþ õèíîííóþ ôîðìó â ôåíîëüíóþ è òåì ñàìûì ðåãåíåðèðîâàòü àíòèðàäèêàëüíóþ àêòèâíîñòü âèòàìèíà Å, âàæíåéøåå çíà÷åíèå èìååò àñêîðáèíîâàÿ êèñëîòà, âûñòóïàþùàÿ â êà÷åñòâå äîíîðà ïðîòîíîâ è ñèíåðãèñòà âèòàìèíà Å (12, 13). Êðîìå òîãî, îíà ìîæåò ñàìà âçàèìîäåéñòâîâàòü ñ ñèíãëåòíûì êèñëîðîäîì, ãèäðîêñèëüíûì ðàäèêàëîì è ñóïåðîêñèäíûì àíèîí-ðàäèêàëîì, ðàçðóøàòü ïåðîêñèä âîäîðîäà (14, 15). Âîññòàíîâëåíèå àñêîðáèíîâîé êèñëîòû îñóùåñòâëÿåòñÿ çà ñ÷åò âîññòàíîâëåííîãî ãëóòàòèîíà. Òåñíàÿ âçàèìîñâÿçü àñêîðáèíîâîé êèñëîòû ñ òîêîôåðîëîì è ãëóòàòèîíîì äåëàåò åå âàæíûì êîìïîíåíòîì áèîëîãè÷åñêîé íåôåðìåíòàòèâíîé ñèñòåìû àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû.  ðàáîòàõ ïîñëåäíèõ ëåò äîêàçàíî, ÷òî â ðåàêöèÿõ îêèñëèòåëüíîãî ñòðåññà è â ìåõàíèçìàõ àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû òàêæå ïðèíèìàåò ó÷àñòèå îêñèä àçîòà NO• (16-22). Åãî çàùèòíûé ýôôåêò ñâÿçûâàþò ñî ñïîñîáíîñòüþ óâåëè÷èâàòü àêòèâíîñòü àíòèîêñèäàíòíûõ ôåðìåíòîâ (23, 24), à òàêæå âçàèìîäåéñòâîâàòü ñ ñóïåðîêñèäàíèîí-ðàäèêàëîì è îáåñïå÷èâàòü äåòîêñèêàöèþ ïîòåíöèàëüíî îïàñíûõ àêòèâíûõ ôîðì êèñëîðîäà (5, 17, 22). Ïðè èñõîäíîé íåäîñòàòî÷íîñòè ñèñòåìû ÀÎÇ, ïðè ñíèæåíèè åå ìîùíîñòè èç-çà âîçäåéñòâèÿ ýêñòðåìàëüíûõ âíåøíèõ ôàêòîðîâ èëè â ñèëó âíóòðåííèõ ôèçèîëîãè÷åñêèõ ïðè÷èí îòìå÷àåòñÿ âûõîä ïðîöåññîâ ÏÎË çà ðåãóëèðóåìûå ïðåäåëû, èçáûòî÷íîå íàêîïëåíèå åãî òîêñè÷åñêèõ ïðîäóêòîâ, ðàçâèòèå îêèñëèòåëüíîãî ñòðåññà è ñâîáîäíîðàäèêàëüíîé ïàòîëîãèè (1, 25, 27) ñî ñòðóêòóðíî-ìåòàáîëè÷åñêèìè èçìåíåíèÿìè â îðãàíàõ ðåïðîäóêöèè è âîçíèêíîâåíèåì òàêèõ çàáîëåâàíèé, êàê ôåòîïëàöåíòàðíàÿ íåäîñòàòî÷íîñòü, ïîçäíèé òîêñèêîç áåðåìåííûõ, ïëàöåíòèòû, àíòåíàòàëüíàÿ ãèïîêñèÿ ïëîäà, çàäåðæàíèå ïîñëåäà, ïîñëåðîäîâàÿ ñóáèíâîëþöèÿ ìàòêè è ýíäîìåòðèò (28-32), õðîíè÷åñêèå ïàòîëîãèè ìàòêè è ÿè÷íèêîâ, ñîïðîâîæäàåìûå áåñïëîäèåì (33-35). Ïîýòîìó â íàó÷íîé ëèòåðàòóðå ïîñëåäíèõ ëåò âåäóòñÿ àêòèâíûå îáñóæäåíèÿ ðîëè ÏÎË â ìîëåêóëÿðíûõ ìåõàíèçìàõ àäàïòèâíûõ ðåàêöèé è â ãåíåçå ìíîãèõ áîëåçíåé ïðîäóêòèâíûõ æèâîòíûõ. Öåëü íàñòîÿùåé ðàáîòû çàêëþ÷àëàñü â èçó÷åíèè îñîáåííîñòåé ôóíêöèîíèðîâàíèÿ ñèñòåìû ïåðîêñèäíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ—àíòèîêñèäàíòíàÿ çàùèòà è îêñèäà àçîòà ó âûñîêîïðîäóêòèâíûõ ìîëî÷íûõ êîðîâ ïðè ôèçèîëîãè÷åñêîì è ïàòîëîãè÷åñêîì òå÷åíèè áåðåìåííîñòè è ïîñëåðîäîâîãî ïåðèîäà. 109 Ìåòîäèêà. Îïûòû ïðîâåäîäèëè â çèìíå-ñòîéëîâûé ïåðèîä 2009 ãîäà íà ïëåìçàâîäå «Äðóæáà» (Ïàâëîâñêèé ð-í, Âîðîíåæñêàÿ îáë.) íà 96 êîðîâàõ êðàñíî-ïåñòðîé ïîðîäû ñî ñðåäíåãîäîâîé ìîëî÷íîé ïðîäóêòèâíîñòüþ ïî ñòàäó 6,5 òûñ. êã ïðè ïðèâÿçíî-âûãóëüíîì ñîäåðæàíèè. Èõ ðàöèîí âêëþ÷àë ñèëîñ êóêóðóçíûé, ñåíî ëóãîâîå, ñîëîìó ÿðîâûõ êóëüòóð, êîíöåíòðèðîâàííûå êîðìà, ïàòîêó è ïîâàðåííóþ ñîëü. Îáåñïå÷åííîñòü ðàöèîíà ïî îáùåé ïèòàòåëüíîñòè ñîñòàâèëà 100 %, ïî ïåðåâàðèìîìó ïðîòåèíó — 98 %, ñàõàðó — 98 %, êàëüöèþ — 73 %, ôîñôîðó — 72 %, êàðîòèíó — 92 %; ñàõàðî-ïðîòåèíîâîå îòíîøåíèå — 1:1, êàëüöèé-ôîñôîðíîå — 1,8:1. Áûëè ñôîðìèðîâàíû ñåìü ãðóïï æèâîòíûõ: I (n = 9) — ñ íîðìàëüíûì òå÷åíèåì áåðåìåííîñòè, II (n = 9) — ñ ïðèçíàêàìè ãåñòîçà â ëåãêîé ôîðìå òå÷åíèÿ, III (n = 9) — ñ ïðèçíàêàìè ãåñòîçà â òÿæåëîé ôîðìå òå÷åíèÿ, IV (n = 17) — ñ íîðìàëüíûì òå÷åíèåì ïîñëåðîäîâîãî ïåðèîäà, V (n = 28) — ñ îñòðûì ïîñëåðîäîâûì ýíäîìåòðèòîì, VI (n = 12) — ñ õðîíè÷åñêîé ñóáèíâîëþöèåé ìàòêè, VII (n = 12) — ñ ãèïîôóíêöèåé ÿè÷íèêîâ. Ôóíêöèîíàëüíîå ñîñòîÿíèå ïîëîâûõ îðãàíîâ îïðåäåëÿëè ìåòîäîì òðàíñðåêòàëüíîé ïàëüïàöèè. Äèàãíîç íà ãåñòîç óñòàíàâëèâàëè íà îñíîâàíèè âèçóàëüíîãî âûÿâëåíèÿ ïàòîëîãè÷åñêèõ îòåêîâ ïîäêîæíîé êëåò÷àòêè â îáëàñòè çàäíèõ êîíå÷íîñòåé, áðþøíîé ñòåíêè è ïîäãðóäêà, èçìåðåíèÿ àðòåðèàëüíîãî äàâëåíèÿ ñ ïîìîùüþ ìåäèöèíñêîãî òîíîìåòðà, âûÿâëåíèÿ êîíöåíòðàöèè áåëêà â ìî÷å ñ èñïîëüçîâàíèåì èíäèêàòîðíûõ ïîëîñîê AlbuPHAN («Lachema», ×åõèÿ). Êðîâü ïîëó÷àëè èç ÿðåìíîé âåíû â óòðåííèå ÷àñû.  êà÷åñòâå àíòèêîàãóëÿíòà èñïîëüçîâàëè ãåïàðèí.  êðîâè îöåíèâàëè êîëè÷åñòâî ìàëîíîâîãî äèàëüäåãèäà (ÌÄÀ), àêòèâíîñòü ãëóòàòèîíïåðîêñèäàçû (ÃÏÎ), ãëóòàòèîíðåäóêòàçû (ÃÐ), êàòàëàçû, ñóïåðîêñèääèñìóòàçû (ÑÎÄ) (36), ñóììó ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà (NO•) (37). Ñîäåðæàíèå âèòàìèíîâ Å è Ñ îïðåäåëÿëè â ñûâîðîòêå êðîâè ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêèì ìåòîäîì (38), îáùèõ ëèïèäîâ, õîëåñòåðèíà è òðèãëèöåðèäîâ — ñ ïîìîùüþ íàáîðîâ ôèðì «Vital Diagnostica» (Ðîññèÿ) è «Lachema» (×åõèÿ), ìîëî÷íîé êèñëîòû â êðîâè — ïî ðåàêöèè ñ ïàðîêñèäèôåíèëîì (36). Ñòàòèñòè÷åñêóþ îáðàáîòêó äàííûõ ïðîâîäèëè ñ ïîìîùüþ ïðîãðàììû Statistica v. 6.0. Äîñòîâåðíîñòü ðàçëè÷èé îöåíèâàëè ìåòîäîì ïàðíûõ ñðàâíåíèé, èñïîëüçóÿ t-êðèòåðèé Ñòüþäåíòà. Ðåçóëüòàòû. Ïàòîëîãèÿ áåðåìåííîñòè ó êîðîâ, êëèíè÷åñêè ïðîÿâëÿþùàÿñÿ ñèìïòîìîêîìïëåêñîì ãåñòîçà, ðàçâèâàëàñü íà ôîíå àêòèâàöèè ïðîöåññîâ ïåðîêñèäíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ ïðè îäíîâðåìåííîì ïîâûøåíèè àêòèâíîñòè ñèñòåìû àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû êàê êîìïåíñàòîðíîé ðåàêöèè íà ïîâðåæäàþùåå äåéñòâèå ïðîäóêòîâ ÏÎË (òàáë. 1). 1. Ïîêàçàòåëè ñèñòåìû ïåðîêñèäíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ—àíòèîêñèäàíòíàÿ çàùèòà ó êîðîâ êðàñíî-ïåñòðîé ïîðîäû ïðè ôèçèîëîãè÷åñêîì è ïàòîëîãè÷åñêîì òå÷åíèè áåðåìåííîñòè (̱m; ïëåìçàâîä «Äðóæáà», Ïàâëîâñêèé ð-í, Âîðîíåæñêàÿ îáë.; çèìíå-ñòîéëîâûé ïåðèîä 2009 ãîäà) Ïîêàçàòåëü Êëèíè÷åñêè çäîðîâûå (n = 9) Ãåñòîç â ëåãêîé ôîðìå (n = 9) Ãåñòîç â òÿæåëîé ôîðìå (n = 9) ÌÄÀ, ìêìîëü/ë 1,04±0,140 1,49±0,120 ÃÏÎ, ììîëü GSH/(ëŁìèí) 14,6±1,54 17,2±2,11 30,1±1,26 34,4±0,93 Êàòàëàçà, ììîëü Í2Î2/(ëŁìèí) Âèòàìèí Å, ìêìîëü/ë 11,2±0,89 9,9±1,20 Âèòàìèí Ñ, ììîëü/ë 14,5±5,73 18,1±4,02 60,1±8,02 83,0±7,87 NO•, ìêìîëü/ë Ï ð è ì å ÷ à í è å. ÌÄÀ — ìàëîíîâûé äèàëüäåãèä, ÃÏÎ — ãëóòàòèîíïåðîêñèäàçà, GSH íûé ãëóòàòèîí, NO• — ñóììà ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà. 1,48±0,140 18,4±2,58 35,3±2,44 7,7±0,93 12,0±1,69 79,3±8,19 — âîññòàíîâëåí- Èñõîäÿ èç óâåëè÷åíèÿ êîíöåíòðàöèè â êðîâè ìàëîíîâîãî äèàëüäåãèäà, èõ êîëè÷åñòâî ó æèâîòíûõ ñ ëåãêîé ôîðìîé ãåñòîçà âîçðàñòàëî íà 43,0 % ïî ñðàâíåíèþ ñ òàêîâûì ó çäîðîâûõ êîðîâ (ð < 0,05). Ïðè ýòîì 110 àêòèâíîñòü ÃÏÎ óâåëè÷èëàñü íà 11,0 %, êàòàëàçû — íà 14,3 %, ñîäåðæàíèå ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ NO• — íà 38,0 %, âèòàìèíà Ñ — íà 24,1 %.  òî æå âðåìÿ êîëè÷åñòâî âèòàìèíà Å, íå ñèíòåçèðóþùåãîñÿ â îðãàíèçìå, ñíèçèëîñü íà 11,7 %, ÷òî áûëî ñâÿçàíî ñ óâåëè÷åíèåì åãî ðàñõîäà íà íåéòðàëèçàöèþ òîêñè÷åñêèõ ïðîäóêòîâ ÏÎË. Óñèëåíèå òÿæåñòè ïàòîëîãè÷åñêîãî ïðîöåññà âûçûâàëî äàëüíåéøåå ïîâûøåíèå àêòèâíîñòè ôåðìåíòàòèâíîãî çâåíà ñèñòåìû ÀÎÇ è ñíèæåíèå — íåôåðìåíòàòèâíîãî. Àêòèâíîñòü ÃÏÎ ïî ñðàâíåíèþ ñ êëèíè÷åñêè çäîðîâûìè æèâîòíûìè âîçðàñòàëà íà 26,0 %, êàòàëàçû — íà 17,3 %, êîëè÷åñòâî âèòàìèíà Å ñíèæàëîñü íà 33,3 % (ð < 0,01), âèòàìèíà Ñ — íà 17,2 %. Íà ôîíå ïîâûøåíèÿ èíòåíñèâíîñòè ÑÐÎ áûëî îòìå÷åíî ñíèæåíèå êîíöåíòðàöèè â êðîâè îáùèõ ëèïèäîâ ñ 4,1±0,35 äî 3,1±0,18 ã/ë, èëè íà 24,4 % (ð < 0,05), óâåëè÷åíèå êîëè÷åñòâà òðèãëèöåðèäîâ ñ 0,5±0,02 äî 1,1±0,04 ììîëü/ë, èëè â 2,1 ðàçà (ð < 0,001), ìîëî÷íîé êèñëîòû — ñ 1,8±0,07 äî 4,5±0,13 ììîëü/ë, èëè â 2,5 ðàçà (ð < 0,001). Ïîñëåäíåå îáñòîÿòåëüñòâî ñâèäåòåëüñòâóåò îá óñèëåíèè àíàýðîáíîãî ðàñïàäà óãëåâîäîâ äëÿ îáåñïå÷åíèÿ òêàíåé ðàçâèâàþùåãîñÿ ïëîäà ýíåðãèåé â óñëîâèÿõ íåäîñòàòêà êèñëîðîäà, êîòîðûé âîçíèêàåò â ñâÿçè ñ ðàññòðîéñòâîì ìàòî÷íî-ïëàöåíòàðíîãî êðîâîîáðàùåíèÿ. Óñòàíîâëåíî òàêæå äîñòàòî÷íî àêòèâíîå ÏÎË ïðè ðàçâèòèè â ïîëîâûõ îðãàíàõ âîñïàëèòåëüíûõ ïðîöåññîâ ïîñëå ðîäîâ (òàáë. 2). Îá ýòîì ñâèäåòåëüñòâîâàëà âûñîêàÿ êîíöåíòðàöèÿ â êðîâè ÌÄÀ, ïðåâûøàþùàÿ àíàëîãè÷íûé ïîêàçàòåëü ó êëèíè÷åñêè çäîðîâûõ æèâîòíûõ íà 76,0 %. Ïîäîáíàÿ òåíäåíöèÿ áûëà îáóñëîâëåíà ðåçêèì óâåëè÷åíèåì íåéòðîôèëüíîé è ìàêðîôàãàëüíîé ïðîäóêöèè àêòèâíûõ ôîðì êèñëîðîäà, íàáëþäàåìîé ïðè âîñïàëèòåëüíîì ïðîöåññå.  òî æå âðåìÿ òàêèì æèâîòíûì ñâîéñòâåííî êîìïåíñàòîðíîå âêëþ÷åíèå ôåðìåíòàòèâíîãî çâåíà àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû. Àêòèâíîñòü ÃÏÎ êðîâè ó áîëüíûõ êîðîâ îêàçàëàñü âûøå íà 65,8 % (ð < 0,001), ÃÐ — íà 14,6 % (ð < 0,05), ÑÎÄ — íà 46,0 % (ð < 0,001), êàòàëàçû — íà 45,7 % (ð < 0,001). Îäíàêî íåâûñîêèé ðîñò àêòèâíîñòè ÃÐ ïî ñðàâíåíèþ ñ ÃÏÎ ìîæåò ñâèäåòåëüñòâîâàòü î íåäîñòàòî÷íîñòè ôóíêöèîíàëüíîãî ïîòåíöèàëà ãëóòàòèîíîâîãî çâåíà ñèñòåìû ÀÎÇ è íåñïîñîáíîñòè àäåêâàòíîãî ïîïîëíåíèÿ ïóëà âîññòàíîâëåííîãî ãëóòàòèîíà (39). 2. Ïîêàçàòåëè ñèñòåìû ïåðîêñèäíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ—àíòèîêñèäàíòíàÿ çàùèòà ó êîðîâ êðàñíî-ïåñòðîé ïîðîäû ïðè ôèçèîëîãè÷åñêîì è ïàòîëîãè÷åñêîì òå÷åíèè ïîñëåðîäîâîãî ïåðèîäà (̱m; ïëåìçàâîä «Äðóæáà», Ïàâëîâñêèé ð-í, Âîðîíåæñêàÿ îáë.; çèìíå-ñòîéëîâûé ïåðèîä 2009 ãîäà) Ïîêàçàòåëü Ôèçèîëîãè÷åñêîå Îñòðûé Õðîíè÷åñêàÿ Ãèïîôóíêöèÿ òå÷åíèå ïîñëåðîäîâîãî ýíäîìåòðèò ñóáèíâîëþöèÿ ÿè÷íèêîâ ïåðèîäà (n = 17) (n = 28) (n = 12) (n = 12) ÌÄÀ, ìêìîëü/ë 1,00±0,050 1,76±0,400 1,45±0,030 1,57±0,060 ÃÏÎ, ììîëü GSH/(ëŁìèí) 9,4±0,32 15,8±0,44 13,7±0,45 12,0±0,64 ÃÐ, ìêìîëü G-SS-G/(ëŁìèí) 293,1±10,88 336,2±9,06 299,0±7,11 324,0±8,24 ÑÎÄ, óñë. åä/ìã ãåìîãëîáèíà 0,72±0,030 1,05±0,030 0,97±0,040 0,95±0,050 25,9±0,57 37,6±0,63 33,0±1,28 32,2±0,84 Êàòàëàçà, ììîëü Í2Î2/(ëŁìèí) Âèòàìèí Å, ìêìîëü/ë 23,7±3,48 15,3±0,93 28,3±2,79 16,2±2,78 47,8±0,29 138,7±7,14 – 20,6±2,21 NO•, ìêìîëü/ë Ï ð è ì å ÷ à í è å. ÌÄÀ — ìàëîíîâûé äèàëüäåãèä, ÃÏÎ — ãëóòàòèîíïåðîêñèäàçà, ÃÐ — ãëóòàòèîíðåäóêòàçà, ÑÎÄ — ñóïåðîêñèääèñìóòàçà, GSH — âîññòàíîâëåííûé ãëóòàòèîí, G-SS-G — îêèñëåííûé ãëóòàòèîí, NO• — ñòàáèëüíûå ìåòàáîëèòû îêñèäà àçîòà. Ïðî÷åðê îçíà÷àåò îòñóòñòâèå äàííûõ. Îäíîâðåìåííî ó çàáîëåâøèõ æèâîòíûõ îòìå÷àëè ñíèæåíèå àêòèâíîñòè íåôåðìåíòàòèâíîãî çâåíà ÀÎÇ. Ñîäåðæàíèå âèòàìèíà Å â èõ êðîâè îêàçàëîñü íèæå íà 35,5 % (ð < 0,01). Äèñáàëàíñ â ñèñòåìå ÀÎÇ íå ïîçâîëÿë ïîääåðæèâàòü ïðîöåññû ÏÎË íà îòíîñèòåëüíî ñòàáèëüíîì óðîâíå, ÷òî ìîãëî ñëóæèòü ïðåäïîñûëêîé ê ïîâðåæäåíèþ êëåòî÷íûõ ñòðóêòóð ýíäîìåò111 ðèÿ íàêàïëèâàþùèìèñÿ òîêñè÷åñêèìè ïðîäóêòàìè ÑÐÎ è ðàçâèòèþ ïîñëåðîäîâîé ïàòîëîãèè. Ïðè ýòîì â îðãàíèçìå ó áîëüíûõ êîðîâ ïðîäóêöèÿ îêñèäà àçîòà âîçðàñòàëà â 2,9 ðàçà (ð < 0,01). Èñòî÷íèêîì åãî ãåíåðàöèè ñòàíîâèëèñü èììóíîêîìïåòåíòíûå êëåòêè — ìàêðîôàãè è íåéòðîôèëû (16). Îáëàäàÿ àíòèîêñèäàíòíûì è ìèîðåëàêñàíòíûì äåéñòâèåì, NO•, ñ îäíîé ñòîðîíû, îãðàíè÷èâàë èíòåíñèâíîñòü ïåðîêñèäíûõ ðåàêöèé, ñ äðóãîé — óãíåòàë ñîêðàòèòåëüíóþ äåÿòåëüíîñòü ìàòêè è âûçûâàë ñáîé â ôèçèîëîãè÷åñêîì òå÷åíèè ïîñëåðîäîâûõ èíâîëþöèîííûõ ïðîöåññîâ â ïîëîâûõ îðãàíàõ. Ïåðîêñèäàöèÿ ëèïèäîâ ó êîðîâ ñ âîñïàëèòåëüíûìè çàáîëåâàíèÿìè ìàòêè ñîïðîâîæäàëàñü ñíèæåíèåì êîíöåíòðàöèè â êðîâè îáùèõ ëèïèäîâ íà 17,9 % (2,71±0,04 ïðîòèâ 3,30±0,18 ã/ë, ð < 0,001), õîëåñòåðèíà — íà 44,0 % (2,68±0,12 ïðîòèâ 4,78±0,33 ììîëü/ë, ð < 0,001). Âûñîêàÿ àêòèâíîñòü ðåàêöèé ÏÎË ñîõðàíÿëàñü ó êîðîâ è ïðè ðàçâèòèè õðîíè÷åñêîé ïàòîëîãèè ïîëîâûõ îðãàíîâ (ñì. òàáë. 2). Òàê, ó æèâîòíûõ ñ õðîíè÷åñêîé ñóáèíâîëþöèåé ìàòêè êîíöåíòðàöèÿ â êðîâè ÌÄÀ ïðåâûøàëà òàêîâóþ ó çäîðîâûõ íà 45,0 %, àêòèâíîñòü ÃÏÎ — íà 45,7 %, ÑÎÄ — íà 34,7 %, êàòàëàçû — íà 27,4 % (ð < 0,01-0,001). Ó êîðîâ ñ äèñôóíêöèåé ÿè÷íèêîâ ýòà ðàçíèöà ïî òåì æå ïîêàçàòåëÿì ñîñòàâèëà ñîîòâåòñòâåííî 57,0; 27,6; 31,9 è 24,3 % (ð < 0,001). Ïðè õðîíè÷åñêîé ïàòîëîãèè ìàòêè âûðàæåííûõ ðàçëè÷èé ïî àêòèâíîñòè ÃÐ è ñîäåðæàíèè âèòàìèíà Å âûÿâëåíî íå áûëî; ó æèâîòíûõ ñ ãèïîôóíêöèåé ïîëîâûõ æåëåç àêòèâíîñòü ýòîãî ôåðìåíòà ïðåâûøàëà ïîêàçàòåëü ó çäîðîâûõ æèâîòíûõ íà 10,5 %, à êîíöåíòðàöèÿ âèòàìèíà Å áûëà íèæå íà 31,6 %.  ïîñëåäíåì ñëó÷àå êîðîâû õàðàêòåðèçîâàëèñü íèçêîé ãåíåðàöèåé îêñèäà àçîòà. Êîíöåíòðàöèÿ åãî ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ â êðîâè áûëà íèæå íà 56,9 % (ð < 0,001). Èñõîäÿ èç òîãî, ÷òî îáðàçîâàíèå â îðãàíèçìå NO• âçàèìîñâÿçàíî ñ àêòèâíîñòüþ áèîñèíòåçà ïîëîâûõ ñòåðîèäîâ (40, 41), ïàäåíèå åãî êîíöåíòðàöèè â êðîâè ñëåäóåò îòíåñòè çà ñ÷åò ðåçêîãî ñíèæåíèÿ ãîðìîíñèíòåçèðóþùåé ôóíêöèè ÿè÷íèêîâ.  òî æå âðåìÿ íèçêàÿ ïðîäóêöèÿ NO• ïðè óêàçàííîé ïàòîëîãèè ìîæåò ëåæàòü â îñíîâå íàðóøåíèÿ ãåíåðàòèâíîé ôóíêöèè ãîíàä, ïîñêîëüêó ýòî ñîåäèíåíèå âêëþ÷åíî â êîíòðîëü ñåêðåöèè ãèïîòàëàìóñîì ãîíàäîòðîïèí-ðèëèçèíã-ãîðìîíà è ãèïîôèçîì ëþòåèíèçèðóþùåãî ãîðìîíà, îòâåòñòâåííûõ çà îâóëÿòîðíóþ ôóíêöèþ ãîíàä (41-44). Òàêèì îáðàçîì, àêòèâèçàöèþ ñâîáîäíîðàäèêàëüíîãî îêèñëåíèÿ, ðàçâèòèå îêèñëèòåëüíîãî ñòðåññà è ñâîáîäíîðàäèêàëüíîé ïàòîëîãèè íà ôîíå íåñáàëàíñèðîâàííûõ èçìåíåíèé â ãåíåðàöèè îêñèäà àçîòà è ãëóòàòèîíîâîì çâåíå àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû (ÀÎÇ) ñëåäóåò îòíåñòè ê îñíîâíûì ìåõàíèçìàì, ïðèâîäÿùèì ê íàðóøåíèÿì ðåïðîäóêòèâíîé ôóíêöèè ó âûñîêîïðîäóêòèâíûõ êîðîâ. Âûÿâëåííûå çàêîíîìåðíîñòè âî âçàèìîñâÿçè ðåïðîäóêòèâíîãî çäîðîâüÿ æèâîòíûõ, ôóíêöèé ñèñòåìû ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ-ÀÎÇ è îêñèäà àçîòà ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû ïðè ðàçðàáîòêå íåîáõîäèìûõ ëå÷åáíî-ïðîôèëàêòè÷åñêèõ ìåðîïðèÿòèé. ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ 1. 2. 3. 4. 5. 112 Ñ è ä î ð î â È.Â., Ê î ñ ò ð î ì è ò è í î â Í.À. Àêòèâíûå ôîðìû êèñëîðîäà â îêèñëèòåëüíûõ ïðîöåññàõ ó æèâîòíûõ è çàùèòíàÿ ðåãóëÿòîðíàÿ ðîëü áèîàíòèîêñèäàíòîâ. Ñåëüñêîõîçÿéñòâåííàÿ áèîëîãèÿ, 2003, 6: 3-12. Ð å ö ê è é Ì.È. Ñèñòåìà àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû ó æèâîòíûõ ïðè ñòðåññå è åãî ôàðìàêîëîãè÷åñêîé ðåãóëÿöèè. Äîêò. äèñ. Âîðîíåæ, 1997. E l s t e r E.F., O s s w a l d W., K o n g e J.R. Reactive oxygen species; electron donor— hydrogen peroxide complex instead of true OH radicals? FEBS Lett., 1980, 121(2): 219-221. K u n w a r A m i t , P r i y a d a r s i n i K.I. Free radicals, oxidative stress and importance of antioxidants in human health. J. Med. Allied Sci., 2011, 1(2): 53-60. Ç å í ê î â Í.Ê., Ë à í ê è í Â.Ç., Ì å í ü ø è ê î â à Å.Á. Îêñèäàòèâíûé ñòðåññ. Áèîõèìè÷åñêèé è ïàòîôèçèîëîãè÷åñêèé àñïåêòû. Ì., 2001. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. V a l k o M., R h o d e s C.J., M o n c o l J., I z a c o v i c M., M a z u r M. Free radicals, metals and antioxidants in oxidative stress-induced cancer. Chem. Biol. Interact., 2006, 160: 1-40 (doi: 10.1016/j.cbi.2005.12.009). Ä ó á è í è í à Å.Å. Àíòèîêñèäàíòíàÿ ñèñòåìà ïëàçìû êðîâè. Óêðàèíñêèé áèîõèìè÷åñêèé æóðíàë, 1992, 64(2): 3-15. M c C o r d J.M., F r i d o v i c h I. The purification and crystallization of beef erythrocyte superoxide dismutase. J. Biol. Chem., 1969, 244(2): 6049-6056. Å â ñ ò è ã í å å â à Ð.Ï.,  î ë ê î â È.Ì., × ó ä è ê î â à Â.Â. Âèòàìèí Å êàê óíèâåðñàëüíûé àíòèîêñèäàíò è ñòàáèëèçàòîð áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàí. Áèîëîãè÷åñêèå ìåìáðàíû, 1998, 15(2): 119-137. Å ð è í À.È., Ñ ê ð û ï è í Â.È., Ï ð è ë è ï ê î Ë.Ë., Ê à ã à í Â.Å. Âèòàìèí Å: ìîëåêóëÿðíûå ìåõàíèçìû äåéñòâèÿ â áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàíàõ.  ñá.: Êèñëîðîäíûå ðàäèêàëû â õèìèè, áèîëîãèè è ìåäèöèíå. Ðèãà, 1988: 109-129. F u k u z a w a K., I n o k a m i Y., T o k u m u r a A., T e r a o J., S u z u k i A. Singlet oxygen scavenguing by α-tocopherol and β-carotene: kinetic studies in phospholipid membranes and ethanol solution. Biofactors, 1998, 7(1-2): 31-40 (doi: 10.1002/biof.5520070106). T a k a h i s a D., B u r t a n G.W., I n g o l d K.U. Antioxidant and coantioxidant activity of vitamin C. The effect of vitamin C either alone or in the presence of vitamin E a water-soluble vitamin E analogue iron the peroxidation of aqueous multilamellar phospholipid liposomes. BBA, 1985, 835(2): 298-303. K a l y a n a r a m a n B., D a r l e y - U s m a r V.M., W o o d J., J o s e p h J. Synergistic interaction between the probucol phenoxyl radical and ascorbic acid in inhibiting the oxidation of low density lipoprotein. J. Biol. Chem., 1992, 267(10): 6789-6795. C h a t t e r i e e T.B., N a n d i A. Ascorbic acid: A scavenger of oxyradicals. Indian J. Biochem. Biophys., 1991, 28(4): 233-236.  î ñ ê ð å ñ å í ñ ê è é Î.Í., Á î á û ð å â Â.Í. Áèîàíòèîêñèäàíòû — îáëèãàòíûå ôàêòîðû ïèòàíèÿ. Âîïðîñû ìåäèöèíñêîé õèìèè, 1992, 38(4): 21-26. Ì à í ó õ è í à Å.Á., Ì à ë û ø å â È.Þ. Ñòðåññ, àäàïòàöèÿ è îêñèä àçîòà. Áèîõèìèÿ, 1998, 63(7): 992-1006. M u r p h y M.P. Nitric oxide and cell death. BBA, 1999, 1411(2-3): 401-414 (doi: 10.1016/S00052728(99)00029-8). L a s k i n J.D., H e c k D.E., G a r d e n e r C.R., L a s k i n D.L. Prooxidant and antioxidant functions of nitric oxide in liver toxicity. Antioxid. Redox. Signal., 2001, 3(2): 261-271 (doi: 10.1089/152308601300185214). È â à ø ê è í Â.Ò., Ä ð à ï ê è í à Î.Ì. Êëèíè÷åñêîå çíà÷åíèå îêñèäà àçîòà è áåëêîâ òåïëîâîãî øîêà. Ì., 2001. Ð å ö ê è é Ì.È., Ì è õ à ë å â Â.È., Á ë è ç í å ö î â à Ã.Í., Ï à ñ ü ê î Í.Â. Ðîëü îêñèäà àçîòà â ïàòîãåíåçå ñóáèíâîëþöèè ìàòêè ó êîðîâ. Ìàò. Ìåæä. íàó÷.-ïðàêò. êîíô. «Àêòóàëüíûå ïðîáëåìû áîëåçíåé îðãàíîâ ðàçìíîæåíèÿ è ìîëî÷íîé æåëåçû». Âîðîíåæ, 2005: 382-385. E r u s a l i m s k y J., M o n c a d a S. Nitric oxide and mitochondrial signaling: from physiology to pathophysiology. Arterioscler. Tromb. Vasc. Biol., 2007, 12: 2524-2531 (doi: 10.1161/ATVBAHA.107.151167). M u r p h y M.R. How mitochondria produce active oxygen species. Biochem J., 2009, 417(1): 1-13. D o b a s h i K., P a h a n K., C h a n a l A., S i n g h I. Modulation of endogenous antioxidant enzymes by nitric oxide in rat C6 glial cells. J. Neurochem., 1997, 68(5): 1896-1903. U l k e r S., M c M a s t e r D., M c K e o w n S., B a y r a k t u t a n U. Impaired activities of antioxidant enzymes elicit endothelial dysfunction in spontaneous hypertensive rats despite enhanced vascular nitric oxide generation. Cardiovasc. Res., 2003, 59(2): 488-500 (doi: 10.1016/S0008-6363(03)00424-3). Ê à ð ì î ë è å â Ð.Ê. Áèîõèìè÷åñêèå ïðîöåññû ïðè ñâîáîäíîðàäèêàëüíîì îêèñëåíèè è àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòå. Ñåëüñêîõîçÿéñòâåííàÿ áèîëîãèÿ, 2002, 2: 19-28. Á ó ç ë à ì à Â.Ñ. Àêòèâíûå ôîðìû êèñëîðîäà, àíòèîêñèäàíòû, àäàïòîãåíû. Ìàò. Ìåæä. íàó÷.-ïðàêò. êîíô. «Ñâîáîäíûå ðàäèêàëû, àíòèîêñèäàíòû è çäîðîâüå æèâîòíûõ». Âîðîíåæ, 2004: 183-186. S h o h a m A., H a d z i a h m e t o v i c M., D u n a i e f J.L., M y d l a r s k i M.B., S c h i p p e r H.M. Oxidative stress in diseases of the human cornea. Free Radic. Biol. Med., 2008, 45(8): 1047-1055 (doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2008.07.021). Ê î ë ÷ è í à À.Ô. Ôåòîïëàöåíòàðíàÿ íåäîñòàòî÷íîñòü è òîêñèêîçû áåðåìåííûõ êîðîâ â òåõíîãåííî çàãðÿçíåííûõ ðåãèîíàõ Óðàëà è ìåòîäû èõ ïðîôèëàêòèêè. Äîêò. äèñ. Âîðîíåæ, 2000. Í å æ ä à í î â À.Ã., Ð å ö ê è é Ì.È., Ê ó ø í è ð È.Þ. Àíòèîêñèäàíòíàÿ íåäîñòàòî÷íîñòü è ïàòîëîãèÿ ïîñëåðîäîâîãî ïåðèîäà ó êîðîâ. Ó÷åíûå çàïèñêè Âèòåáñêîé îðäåíà çíàêà ïî÷åòà ãîñ. àêàä. âåò. ìåä. (Âèòåáñê), 2001, 37(2): 115-116. Ñ à ô î í î â Â.À., Á ë è ç í å ö î â à Ã.Í., Í å æ ä à í î â À.Ã., Ð å ö ê è é Ì.È., Ê î í î ï å ë ü ö å â È.Ã. Âëèÿíèå äåôèöèòà ñåëåíà íà ñîñòîÿíèå ñèñòåìû àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû ó êîðîâ â ïåðèîä ñòåëüíîñòè è ïðè àêóøåðñêîé ïàòîëîãèè. Äîêëàäû ÐÀÑÕÍ, 2008, 6: 50-52. ß ð î â à í Í.È. Áèîõèìè÷åñêèå àñïåêòû îöåíêè, äèàãíîñòèêè è ïðîôèëàêòèêè òåõíîëî- 113 ãè÷åñêîãî ñòðåññà ó ñåëüñêîõîçÿéñòâåííûõ æèâîòíûõ. Àâòîðåô. äîêò. äèñ. Ì., 2008. 32. Ê ó ç ü ì è ÷ Ð.Ã. Ïðîáëåìû àêóøåðñêîé è ãèíåêîëîãè÷åñêîé ïàòîëîãèè ó êîðîâ â õîçÿéñòâàõ Ðåñïóáëèêè Áåëàðóñü è íåêîòîðûå âîïðîñû åå ýòèîëîãèè. Ìàò. Ìåæä. íàó÷.-ïðàêò. êîíô. «Ñîâðåìåííûå ïðîáëåìû âåòåðèíàðíîãî îáåñïå÷åíèÿ ðåïðîäóêòèâíîãî çäîðîâüÿ æèâîòíûõ». Âîðîíåæ, 2009: 239-244. 33. A u g o u l e a A., M a s t o r a k o s Y., L a m b r i n o u d a k i I., C h r i s t o d o u l a k o s G., C r e a t s a s G. The role of the oxidative-stress in the endometriois-related infertility. Gynecol. Endocrinol., 2009, 25(2): 75-81 (doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2008.07.021). 34. T a t o n e C., A m i c a r e l l i F., C a r b o n e M.C., M o n t e l e o n e P., C a s e r t a D., M a r c i R., A r t i n i P.G., P i o m b o n i P., F o c a r e l l i R. Cellular and molecular aspects of ovarin follicle ageing. Hum. Reprod. Update, 2008, 14(2): 131-142 (doi: 10.1093/humupd/dmm048). 35. R u d e r E.H., H a r t m a n T.J., B l u m b e r g J., G o l d m a n M.B. Oxidative stress and antioxidants: exposure and impact on female fertility. Hum. Reprod. Update., 2008, 14(4): 345-357 (doi: 10.1093/humupd/dmn011). 36. Ð å ö ê è é Ì.È., Ø à õ î â À.Ã., Ø ó ø ë å á è í Â.È., Ñ à ì î ò è í À.Ì. Ìåòîäè÷åñêèå ðåêîìåíäàöèè ïî äèàãíîñòèêå, òåðàïèè è ïðîôèëàêòèêå íàðóøåíèé îáìåíà âåùåñòâ ó ïðîäóêòèâíûõ æèâîòíûõ. Âîðîíåæ, 2005. 37. Á ë è ç í å ö î â à Ã.Í., Å ð ì à ê î â à Í.Â., Ì ó õ à ì ì å ä Ç.Ä., Ð å ö ê è é Ì.È. Ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêèé ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà. Âåñòíèê ÂÃÀÓ. Ñåðèÿ: Õèìèÿ. Áèîëîãèÿ, 2002, 1: 55-60. 38. À í ò î í î â Á.È., ß ê î â ë å â à Ò.Ô., Ä å ð ÿ á è í à Â.È., Ñ ó õ à ÿ Í.À., Á à ø ê è ð î â Ã.Ã. Ëàáîðàòîðíûå èññëåäîâàíèÿ â âåòåðèíàðèè: Ñïðàâî÷íèê. Ì., 1991. 39.  å ë è ÷ ê î â ñ ê è é Á.Ò. Ìîëåêóëÿðíûå è êëåòî÷íûå îñíîâû ýêîëîãè÷åñêîé ïóëüìîíîëîãèè. Ïóëüìîíîëîãèÿ, 2000, 10(3): 3-9. 40. M o r e n o A.S., F r a n c i C.R. Estrogen modulates the action of nitric oxide in the medial preoptic area on luteinizing hormone and prolactin secretion. Life Sci., 2004, 76(16): 2049-2059 (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14967199). 41. C o u g h l a n T., G i b s o n C., M u r p h y S. Modulatory effects of progesterone on inducible nitric oxide synthase expression in vivo and in vitro. J. Neurochem, 2005, 93(4): 932-942 (doi: 10.1111/j.1471-4159.2005.03068.x). 42. D i x i t V.D., P a r v i z i N. Nitric oxide and the control of reproduction. Anim. Reprod. Sci., 2001, 65: 1-16. 43. T a m a n i n i C., B a s i n i G., G r a s s e l l i F., T i r e l l i M. Nitric oxide and the ovary. J. Anim. Sci., 2003, 81: E1-E7. 44. Ø à á ó í è í Ñ.Â., Í å æ ä à í î â À.Ã. Ñèñòåìíîå ðåøåíèå ïðîáëåìû ñîõðàíåíèÿ âîñïðîèçâîäèòåëüíîé ñïîñîáíîñòè è ïðîäóêòèâíîãî äîëãîëåòèÿ ìîëî÷íîãî ñêîòà. Ìàò. Ìåæä. íàó÷.ïðàêò. êîíô., ïîñâÿùåííîé 85-ëåòèþ ñî äíà ðîæäåíèÿ ïðîô. Ã.À. ×åðåìèñèíîâà è 50-ëåòèþ ñîçäàíèÿ Âîðîíåæñêîé øêîëû âåòåðèíàðíûõ àêóøåðîâ «Ñîâðåìåííûå ïðîáëåìû âåòåðèíàðíîãî àêóøåðñòâà è áèîòåõíîëîãèè âîñïðîèçâåäåíèÿ æèâîòíûõ». Âîðîíåæ, 2012: 10-20. 1ÔÃÁÓ Èíñòèòóò ãåîõèìèè è àíàëèòè÷åñêîé õèìèè èì. Â.È. Âåðíàäñêîãî ÐÀÍ, Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ 19 ìàðòà 2014 ãîäà 119991 Ðîññèÿ, ã. Ìîñêâà, óë. Êîñûãèíà, 19, å-mail: geokhi.rus@relcom.ru; 2ÃÍÓ Âñåðîññèéñêèé íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèé âåòåðèíàðíûé èíñòèòóò ïàòîëîãèè, ôàðìàêîëîãèè è òåðàïèè Ðîññåëüõîçàêàäåìèè, 394087 Ðîññèÿ, ã. Âîðîíåæ, óë. Ëîìîíîñîâà, 114-á, å-mail: vnivipat@mail.ru FREE RADICAL LIPID OXIDATION AND REPRODUCTIVE HEALTH OF COWS V.A. Safonov1, A.G. Nezhdanov2, M.I. Retsky2, S.V. Shabunin2, G.N. Bliznetsova2 1V.I. Vernadskii Institute of Geochemistry and Analytical Chemistry, Russian Academy of Sciences, 19, ul. Kosygina, Moscow, 119991 Ðîññèÿ, å-mail geokhi.rus@relcom.ru; Research Veterinary Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy, Russian Academy of Agricultural Sciences, 114-b, ul. Lomonosova, Voronezh, 394087 Russia, å-mail vnivipat@mail.ru, retsky@mail.ru Received March 19, 2014 doi: 10.15389/agrobiology.2014.6.107eng 2All-Russian Abstract Free radical lipid oxidation is currently considered as one of the dominant metabolic processes of physiological system functional activity. When it goes beyond regulated limits it is considered as an inductor of free radical pathology oxidative stress. In the conditions of a big dairy cattle breeding farm (Voronezh Province), specialized in Red-and-White breed, the func- 114 tioning peculiarities of the peroxidation system lipid-oxidant defense in cows at the normal course of gestation and at gestosis, at the normal course of postpartum period and at puerperal endometritis, uterus subinvolution and ovarian dysfunction were studied. The state of lipid peroxidation processes and antioxidant system were evaluated by determining total lipid content, cholesterol, triglycerides, malonic dialdehyde (MDA), nitrogen oxides (NO •), E and C vitamins concentrations, glutathione peroxidase (GPO), glutathione reductase (GR), catalase, superoxide dismustase (SOD) activity in blood. It is demonstrated that the high activity of lipid peroxidation reactions and the system of nitrogen oxide at decrease of antioxidant defense non-enzymic link capacity is the basis of gestosis and acute postnatal complications. Thus, àn increase of MDA concentration by 42.3-43.0 %, NO• by 31.9-38.0 % was observed in cows with gestosis. At mild gestosis the glutathione peroxidase activity, catalase activity and vitamin C concentration increased by 11.0 %, 14.3 %, 38.0 %, and 24.1 %, respectively, while vitamin Å concentration decreased by 11.7 % due to more consumption for neutralization of the toxic peroxidation products. At more sever pathology, the glutathione peroxidase activity and catalase activity in blood increased by 26.0 % and 17.3 %, respectively, when compared to the healthy animals, while vitamins E and C concentrations decreased by 33.3 % (ð < 0,01) and 17.2 %, respectively. As free radical oxidation intensified, an anaerobic degradation of carbohydrates was activated to supply the tissues of developing fetus with energy under oxygen deficit occurred because of violation of the blood circulation. Postpartum inflammation in the genital organs in cows developed against the background of increase of MDA concentration by 76.0 %, GPO and GR activity by 65.8 % and 14.6 %, respectively, SOD by 46.0 %, catalase by 45.7 %, 2.9 times increase of NO• concentration and reduction of vitamin E content by 35.5 %. Infertile animals with ovarian dysfunction were characterized by high activity of lipid peroxidation processes and by low level of nitrogen oxide generation. This is indicated by an increased concentration of MDA by 57.0 %, activity of GPO by 27.6 %, GR by 10.5 %, SOD by 31.9 %, catalase by 24.3 %, with a reduced content of NO• and vitamin E by 56.9 % and 31.6 %, respectively, in comparison with healthy animals. A decrease in NO• concentration in blood could result from a sharp depression of hormone synthesizing function in ovaries, and low NO• production could disturb functions of the gonads. The high level of peroxidation is peculiar to animals with chronic uterus pathology, however, it is less expressed than in cows with acute course of the pathological process. Keywords: cows, blood, lipid peroxidation, gestation, postpartum period, norm, pathology. Íîâûå êíèãè Ä î í ÷ å í ê î À.Ñ., Î ñ ò à ø ê î Ò.Í., Ñ à ì î ë î â î â à Ò.Í. è äð. Èñòîðèÿ âåòåðèíàðíîé ìåäèöèíû: äðåâíèé ìèð — íà÷àëî XX âåêà. Ì.: èçä-âî «ÊîëîñÑ», 2012, 488 ñ.  ó÷åáíîì èçäàíèè îáîáùåí èñòîðè÷åñêèé îïûò çàðîæäåíèÿ è ðàçâèòèÿ âåòåðèíàðíîé ìåäèöèíû ñ äðåâíåéøèõ âðåìåí äî íà÷àëà XX âåêà. Íà ïðèìåðå îòäåëüíûõ öèâèëèçàöèé ïîêàçàíû íåïðåðûâíîñòü ðàçâèòèÿ òðàäèöèîííûõ ñèñòåì âðà÷åâàíèÿ ëþäåé è æèâîòíûõ, òåñíàÿ ñâÿçü ìåäèöèíñêèõ è âåòåðèíàðíûõ çíàíèé. Ñïåöèàëüíûé ðàçäåë êíèãè ïîñâÿùåí èñòîðèè ðàçâèòèÿ âåòåðèíàðèè â Ðîññèéñêîé èìïåðèè: ðàññìîòðåíû ïðîöåññ ñòàíîâëåíèÿ ñàìîñòîÿòåëüíîé âåòåðèíàðíîé ñëóæáû â Ðîññèè, ôîðìû îðãàíèçàöèè âåòåðèíàðíîé äåÿòåëüíîñòè, ñèñòåìà îðãàíèçàöèè âåòåðèíàðíûõ êàäðîâ, ìåðû áîðüáû ñ íàèáîëåå îïàñíûìè áîëåçíÿìè ñåëüñêîõîçÿéñòâåííûõ æèâîòíûõ. Ïîêàçàíû äîñòèæåíèÿ â îáëàñòè åñòåñòâåííî-áèîëîãè÷åñêèõ íàóê, ñòàâøèõ îñíîâîé âåòåðèíàðíîé ìåäèöèíû. Êíèãà âêëþ÷àåò áèîãðàôèè èçâåñòíûõ ó÷åíûõ è ïåäàãîãîâ â îáëàñòè âåòåðèíàðèè è ìåäèöèíû. à ë ó á î ê î â Þ.Ì., à î ë î â à ÷ å â à Â.À., Ä â î ð ê è í Â.È. è äð. Àíàëèòè÷åñêàÿ õèìèÿ è ôèçèêî-õèìè÷åñêèå ìåòîäû àíàëèçà (â 2 ò.). Ì.: èçä-âî «Àêàäåìèÿ», 2010, 352 ñ.  äâóõ òîìàõ ó÷åáíèêà ïðåäñòàâëåíî ñîâðåìåííîå ñîñòîÿíèå àíàëèòè÷åñêîé õèìèè ñ ó÷åòîì íîâåéøèõ íàó÷íûõ äîñòèæå- íèé. Èçëîæåíû òåîðåòè÷åñêèå îñíîâû àíàëèòè÷åñêîé õèìèè, ðàññìîòðåíû õèìè÷åñêèå ìåòîäû àíàëèçà, âêëþ÷àÿ ãðàâèìåòðè÷åñêèå è òèòðèìåòðè÷åñêèå, ìåòîäû ðàçäåëåíèÿ è êîíöåíòðèðîâàíèÿ, õðîìàòîãðàôè÷åñêèå è ýëåêòðîõèìè÷åñêèå ìåòîäû àíàëèçà. Ïðåäñòàâëåíû ôèçèêî-õèìè÷åñêèå ìåòîäû àíàëèçà: àòîìíàÿ è ìîëåêóëÿðíàÿ ñïåêòðîìåòðèÿ, ðåíòãåíîâñêèå, ÿäåðíî-ôèçè÷åñêèå è êèíåòè÷åñêèå ìåòîäû. Îõàðàêòåðèçîâàíû îñîáåííîñòè òåõíè÷åñêîãî ïðîèçâîäñòâåííîãî êîíòðîëÿ. Îñîáîå âíèìàíèå óäåëåíî íîâûì íàïðàâëåíèÿì â àíàëèòè÷åñêîé õèìèè: ìèíèàòþðèçèðîâàííûì ñèñòåìàì àíàëèçà, õèìè÷åñêèì ñåíñîðàì. Ïîäðîáíî îïèñàíî ïðèìåíåíèå ñòàòèñòè÷åñêèõ ìåòîäîâ â ïðîáîîòáîðå è èçâëå÷åíèè èíôîðìàöèè ïðè îáðàáîòêå àíàëèòè÷åñêîãî ñèãíàëà. Ñ å ì å í î â Á.Ñ.,  è ä å í è í Â.Í.,  î ù å â î ç À.Ò è äð. Îïåðàòèâíàÿ õèðóðãèÿ ó æèâîòíûõ. Ì.: èçä-âî «ÊîëîñÑ», 2012, 423 ñ. Ðàññìîòðåíû ñïîñîáû ôèêñàöèè æèâîòíûõ, ó÷åíèå î õèðóðãè÷åñêîé îïåðàöèè è ïîíÿòèå õèðóðãè÷åñêîé èíôåêöèè, ñðåäñòâà è ìåòîäû îáùåé è ìåñòíîé àíåñòåçèè. Óïîìÿíóòû íîâåéøèå øîâíûå ìàòåðèàëû è ïðèñïîñîáëåíèÿ äëÿ ñîåäèíåíèÿ òêàíåé. Ïîäðîáíî îïèñàíû òåõíèêà ïðîâåäåíèÿ îïåðàöèé ó æèâîòíûõ ðàçíûõ âèäîâ è àíàòîìîòîïîãðàôè÷åñêèå îñîáåííîñòè îïåðèðóåìûõ îáëàñòåé. Ó÷åáíîå ïîñîáèå èëëþñòðèðîâàíî áîëüøèì ÷èñëîì íàãëÿäíûõ ðèñóíêîâ. 115
