БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ Кафедра молекулярной биологии Аннотация к дипломной работе Горькавая Анна Михайловна РАЗРАБОТКА ПОДХОДОВ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВЫХ ВАКЦИН И ГОРМОНАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЭКСПРЕССИОННЫХ СИСТЕМ Научный руководитель: Научный сотрудник лаборатории молекулярной диагностики и биотехнологии ИБОХ НАН Беларуси Г.В. Сергеев . Минск, 2014 РЕФЕРАТ Дипломная работа 41 с., рис. 15, источников 22. БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭКСПРЕССИОННЫЕ СИСТЕМЫ, СОМАТОТРОПИН G. gallus, ИДИОТИПИЧЕСКАЯ ВАКЦИНА, ЛИМФОМА, scFv Объект исследования: Векторные системы для экспрессии идиотипических вакцин и рекомбинантного соматотропина (G. gallus) в клетках E. coli . Цель: получение гомогенных препаратов белковых гормонов и рекомбинантных идиотипических вакцин. Методы: микробиологические (культивирование микроорганизмов), спектрофотометрические, генетические (трансформация) и молекулярногенетические методы (выделение ДНК, полимеразная цепная реакция, секвенирование). В результате проведенного исследования подобраны оптимальные условия для бактериальной экспрессии и способы выделения ряда белковых препаратов (идиотипические вакцины против лимфомы человека и рекомбинантный соматотропин (G. gallus)). Общее количество выделенного белка идиотипической вакцины (пациента Zezulin) составило 12 мг на 1 литр культуральной среды, а клеточной линии Daudi_12.4.2scFv- 1 мг на 1 литр культуральной среды. Общее количество выделенного рекомбинантного соматотропина (G. gallus) составило 6,1 мг на 1 литр культуральной среды. Разработана векторная конструкция для периплазматической экспрессии рекомбинантного соматотропина (G. gallus) в клетках E. coli. РЭФЕРАТ Дыпломная работа 41 с., мал. 15, крыніц 22. БАКТЭРЫАЛЬНЫЯ ЭКСПРЭСIОННЫЯ СIСТЭМЫ, САМАТАТРАПIН G. gallus, IДЫЯТЫПIЧНАЯ ВАКЦЫНА, ЛIМФОМА, scFv Аб’ект даследавання: Вектарныя сiстэмы для экспрэсii iдыятыпiчных вакцын i рэкамбiнантнага самататрапiна (G. gallus) ў клетках E. coli. Мэта: атрыманне гамагенных прэпаратаў бялковых гармонаў i рэкамбiнантных iдыятыпiчных вакцын. Метады даследавання: мікрабіялагічныя (культываванне мікраарганізмаў), спектрафотаметрычныя, генетычныя (трансфармацыя) і малекулярна-генетычныя метады (выдзяленне ДНК, палімеразная ланцужковая рэакцыя, секвенаванне). У вынiку праведзенага даследавання былi падабраны аптымальныя ўмовы для бактэрыяльнай экспрэсii i спосабы выдзялення шэрагу бялковых прэпаратаў (iдыятыпiчных вакцын супраць лiмфомы чалавека i рэкамбiнантнага самататрапiна (G. gallus)). Агульная колькасць выдзяленага бялка iдыятыпiчнай вакцыны (пацыента Zezulin) склала 12 мг на 1 лiтар культуральнага асяроддзя, а клетачнай лiнii Daudi_12.4.2scFv- 1 мг на 1 лiтар культуральнага асяроддзя. Агульная колькасць выдзяленага рэкамбiнантнага самататрапiна (G. gallus) склала 6,1 мг на 1 лiтар культуральнага асяроддзя. Распрацавана вектарная канструкцыя для перыплазматычнай экспрэсii рэкамбiнантнага самататрапiна (G. gallus) ў клетках E. coli. ABSTRACT Diploma work 41 p., fig. 15, sources 22. BACTERIAL EXPRESSION SYSTEMS, G. HORMONE, IDIOTYPE VACCINE, LYMPHOMA, scFv gallus GROWTH Research object: vector system for the idiotype vaccines and recombinant G. gallus growth hormone expression in E. coli cells. Goal: To obtain a homogenic preparations of the peptide hormones and recombinant idiotype vaccines. Research methods: microbiological (cultivation), spectrophotometric, genetic (transformation) and molecular genetic techniques (DNA extraction, PCR, sequencing). During the research optimal expression conditions and isolation methods for the idiotype vaccines and recombinant G. gallus growth hormone were found. Full amount of the isolated idiotype vaccine peptide (Zezulin patient) is 12 mg per 1 l of the culture medium. 1 mg per 1 l of the culture medium for the Daudi_12.4.2scFv cell line. Full amount of the isolated recombinant G. gallus growth hormone is 6,1 mg per 1 l of the culture medium. The vector system was designed for periplasmic expression of recombinant G. gallus growth hormone in E. coli cells .