Современная лимфология включает в объект своего исследования три составляющие – лимфатическую (дренажную, сосудистую) систему, лимфоидную (иммунную) систему с ее центральным и периферическим звеном и систему рыхлой соединительной ткани (интерстиция). Эти компоненты в своем взаимодействии образуют единую протективную систему (академик РАН В.И.Коненков), морфофункциональной единицей которой является лимфатический регион, включающий в себя транспортную и детоксикационную составляющие (академик РАН Ю.И. Бородин). Контроль антигенно-структурного гомеостаза обеспечивают лимфоидные (иммунокомпетентные) клетки, находящиеся в интерстиции органа, а также образующие паренхиму регионарных лимфоузлов. протективная система лимфатиче лимфоидна ская я (дренажная (иммунная) система , сосудистая) система система рыхлой соедините льной ткани (интерстиц ия) Проводится выявление особенностей морфофункциональных перестроек различных звеньев протективной системы и лимфатических регионов органов в экспериментальных моделях при отдельных и сочетанных воздействиях экологических факторов антропогенной природы: измененного светового режима, этанола, магнитного поля промышленной частоты, высокой температуры, химических токсикантов: полициклических ароматических углеводородов, CCl4, Карбофоса Разрабатываются подходы к патогенетической коррекции экологически детерминированных структурно-метаболических нарушений при воздействии корректоров и лимфопротекторов: природных ионообменников и сорбентов: цеолита, диатомита, кудюрита, монтмориллонита, искусственных сорбентов (СУМС-1), сорбента «Энтеросгель», низкоинтенсивного лазерного воздействия, биофлавоноидов растений Сибири, курильского чая, манжетки обыкновенной Витамина Е, гормона эпифиза-мелатонина, лекарственных препаратов, и др. В исследованиях применяется интегральный подход с оценкой изучаемых объектов на молекулярном, субклеточном, клеточном, тканевом уровнях и уровне межсистемных взаимодействий. Методы исследования: Световая микроскопия Лимфатический узел при воздействии круглосуточного освещения. Окр. г/э. Печень при воздействии алкогольной интоксикации. Окр. г/э. Ув. об. 40 х. Ув. об. 40 х. Печень. Хронический гепатит. Окр. г/э. Яичник. Воздействие гипертермии. Ув. об. 40 х. Окр. г/э. Ув. об. 40 х. Флюоресцентная микроскопия; Электронная микроскопия; Д К Ультраструктурные изменения клеток регионарного лимфатического узла печени у крыс в условиях круглосуточного освещения ( дефекты плазмолемм лимфоидных клеток, наличие эритроцитов; наличие эозинофильных гранулоцитов. Ув.: 7200). Гистохимические методы; Иммуногистохимические методы; Метод выявления активности белков регуляторов апоптоза Bcl-2, Bad, Bax; Печень. Окраска на Bcl2 с докраской гематоксилином Майера Выявление проапоптотического белка Bad в регионарных лимфатических узлах печени. Ув. об. 40 х. Метод определения состояния клеточного цикла (с помощью моноклональных антител Ki-67). Метод выявления лимфатических сосудов печени (с применением моноклональных антител к LYVE-1); Мозговые синусы лимфатического узла. Иммуногистохимическое окрашивание LYVE1 с докраской гематоксилином Майера. Ув. об. 40 х. Метод выявления антигенпрезентирующих дендритных клеток в лимфатических узлах (с использованием моноклональных антител к дендритным клеткам; клон ОХ-62; фирма BD Pharmingen): Дендритные клетки лимфатических узлов животных в условиях функциональной световой эпифизэктомии • количественная оценка молекулярных особенностей печени и лимфатических узлов; • методы морфометрического анализа микро- и ультраструктурных особенностей печени и лимфатических узлов • статистическая обработка материала (с помощью пакета прикладных программ Microsoft Excel 2007, «Statistiсa 6»). Экспериментальные животные: крысы Wistar, линейные мыши B/Ks (генотип db/db), СВА, С57 В1 и др. Экспериментальные воздействия проводятся на базе ЦКП «SPF-виварий» ИЦиГ СО РАН Проводится изучение структурно-временной организации печени, ее лимфатического региона, иммунной и эндокринной систем организма при нарушении светового режима и в условиях коррекции мелатонином. Выявлены особенности суточной временной организации печени и ее лимфатического региона и последствия ее нарушения при развитии светового десинхроноза . Рассмотрены взаимосвязи лимфатического региона печени с регуляторнометаболическими системами (лимфатической, иммунной, эндокринной). В исследованиях применяется интегральный подход с оценкой изучаемых объектов на молекулярном, субклеточном, клеточном, тканевом уровнях и уровне межсистемных взаимодействий с учетом биоритмов, являющихся необходимым компонентом адаптационного процесса. Застойные явления в междольковой соединительной ткани при воздействии круглосуточного освещения (расширение интерстициальных пространств, миграция в расширенные интерстициальные пространства и лимфатические сосуды лимфоцитов и макрофагов, формирование периваскулярных инфильтратов. Окр. гематоксилином Майера и эозином. Ув. об. 40 х. Данные эксперименты поставлены совместно с лаб. «Иммуноморфологии» нашего института (с академиком РАН В.А. Труфакиным и д.м.н. профессором А.В. Шурлыгиной) Важный круг вопросов касается изучения молекулярных особенностей клеточной гибели в печени и ее регионарных лимфатических узлах. Проведенные исследования позволили установить развитие взаимосвязанного каскада реакций в печени и ее лимфатическом регионе в условиях светового десинхроноза, свидетельствующего, что состояние органа и его лимфатического аппарата может находиться не только в прямой, но и в обратной взаимосвязи. Показано, что в условиях функциональной эпифизэктомии механизмы апоптоза способствуют нормализации гомеостаза в печени и ее лимфатическом регионе и, усиливая детоксикационную функцию регионарных лимфатических узлов, способствуют ее более полной реализации. Репродуктивная система: Проводятся научные исследования морфологических особенностей яичников и активности белков генов-регуляторов апоптоза в условиях гипертермии и воздействия мелатонином. Аспирант Бочкарева А. Л. Защитила кандидатскую диссертацию на тему: «Морфология яичников и апоптоз в условиях гипертермии и воздействия мелатонином» 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология. Выявлено, что воздействие гипертермии вызывает нарушения фолликулогенеза и усиление атрезии фолликулов, которые развиваются на фоне венозного застоя и лимфостаза в тканевом микрорайоне яичника. Выявлены коррегирующие эффекты мелатонина. Введение мелатонина в условиях гипертермии приводит к: более быстрому восстановлению кровообращения и лимфатического дренажа яичника до уровня интактных крыс и активизирует восстановление морфологической организации тканевого микрорайона яичников (уже на 7-е сутки после перегревания). изменению соотношения белков регуляторов апоптоза, вызывая преобладание антиапоптотического белка Bcl-2 над проапоптотическим белком Bad в фолликулах и в желтых телах яичников, что свидетельствует о снижении апоптотической гибели клеток фолликулов и желтых тел уже на 7-е сутки после ЭГ. По результатам работы получен патент на изобретение № 2418586 Способ коррекции нарушений в репродуктивных органах, вызванных высокой температурой. Мичурина С.В., Бочкарева А.Л.. Заявка № 2009122600. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 20 мая 2011. В рамках темы 02 проводится «Изучение роли эпифиза в регуляции молекулярных механизмов функционирования сосудов лимфатического русла в органах гепатолиенальной и выделительной систем в динамике развития генетически обусловленного ожирения и сахарного диабета 2-го типа и их осложнений у мышей линии db/db». (Руководитель – д.м.н. Климонтов В.В.) Исследуются влияние эндокринной функции эпифиза на механизмы формирования микро-, ультраструктурных и молекулярных особенностей органов и их лимфатических регионов (печени, поджелудочной железы, почки и др.), в условиях нормы, ожирения и диабета 2 типа и сосудистых осложнений этой патологии в эксперименте и клинике. Отв. исп. С.В.Мичурина, И.Ю.Ищенко, С.А. Архипов В рамках темы 04 исследуется влияние гормона эпифиза мелатонина в регуляции лимфатических регионов органов при воздействии неблагоприятных экологических факторов в эксперименте Отв. исп. С.В.Мичурина, И.Ю.Ищенко, С.А. Архипов Исследуется влияние гормона эпифиза мелатонина на особенности лимфоиммуноэндокринных взаимоотношений в организме и формирование микро-, ультраструктурных и молекулярных изменений в печени у крыс Вистар с моделью хронического токсического гепатита, созданного сочетанным действием четыреххлористого углерода и этанола. Отв. исп. С.В.Мичурина, И.Ю.Ищенко. Подготовленные и защищенные диссертации (докт./канд.) - 1/ 7 Бочкарева Алла Львовна «Морфология яичников и Апоптоз в условиях гипертермии и воздействия мелатонином» (Экспериментальное исследование) 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология. (2012г.) Кандидат медицинских наук. Васендин Дмитрий Викторович « Структурные изменения в тимусе после воздействия высокой температуры» (Экспериментальное исследование) (2009г.) Кандидат медицинских наук. Карелина Светлана Викторовна «Структурные изменения в печени и регионарных лимфатических узлах после воздействия высокой температуры и коррекции мелатонином» (Экспериментальное исследование) (2009г.) Кандидат медицинских наук. Волков А.В. «Печень и ее дренажные системы в различных условиях регионарной гемодинамики» (Анатомо-экспериментальное исследование).14.00.02.-Анатомия человека, 14.00.23. -Гистология, цитология, эмбриология. Новосибирск. 1999. Доктор медицинских наук. Ищенко И.Ю «Морфофункциональное исследование тканевого микрорайона печени и регионарных лимфатических узлов крыс при введении в рацион питания сорбентов (цеолита и СУМС-1) в норме и с последующей интоксикацией карбофосом».03.00.25- гистология, цитология, клеточная биология. Новосибирск. 2003. Кандидат биологичеких наук. Пристяжнюк И.Е. «Влияние природных сорбентов (диатомита и кудюрита) на лимфатический регион печени в норме и при интоксикации карбофосом».14.00.23-гистология, цитология, эмбриология. Новосибирск.1998. Кандидат медицинских наук. Шкурат Г.А. «Тканевой микрорайон печени и ее регионарные лимфатические узлы в условиях низкоинтенсивного лазерного воздействия»(Экспериментальноморфологическое исследование) 14.00.02.-анатомия человека.14.00.23.гистология, цитология, эмбриология. Новосибирск. 1998. Кандидат медицинских наук. Кузьменко Д.Б. «Морфофункциональная характеристика печени матери. Плода и потомства при воздействии вибрации промышленной частоты во время беременности». 03.00.25- гистология, цитология, клеточная биология. 14.00.15патологическая анатомия. Новосибирск. 2005. Кандидат медицинских наук.