Иркутский государственный медицинский университет Кафедра

мертвых – синий цвет. При этом нужно учитывать окраску не
оболочки, а зародыша.
Иркутский государственный медицинский университет
Кафедра общей гигиены
ЛИТЕРАТУРА
1. ГОСТ
27593-88 (СТ СЭВ 5298-85) «Почва. Термины и
определения».
2. ГОСТ 17.2.2.01-81 (СТ СЭВ 4470-84) «Охрана природы. Почвы.
Номенклатура показателей санитарного состояния».
3. ГОСТ 17.4.3.01-83 (СТ СЭВ 3847-82) «Охрана природы. Почвы.
Общие требования к отбору проб».
4. ГОСТ 17.4.4.02-84 «Охрана природы. Почва. Методы отбора и
подготовки проб почвы для химического, бактериологического
и гельминтологического анализа».
5. МУ
1440-76.
«Методические
указания
по
гельминтологическому исследованию объектов внешней среды
и санитарным мероприятиям по охране от загрязнения яйцами
гельминтов и обезвреживанию от них нечистот, почвы, ягод,
овощей, предметов обихода».
6. МУ «Гигиеническая оценка качества почвы населенных мест».М., 1999.
«УТВЕРЖДАЮ»
Зав. кафедрой, профессор
______________М.Ф.Савченков
«__»__________200_г.
САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПОЧВЫ
ГЕЛЬМИНТОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПОЧВЫ
Методические разработки практического занятия по общей
гигиене на семестре медико-профилактического факультета
(для преподавателей)
Иркутск, 2008г
16
Отсутствие яиц гельминтов в пробе почвы при проведении
гельминтологического исследования еще не может служить причиной
однозначного ответа на вопрос о загрязненности или не
загрязненности почвы яйцами гельминтов исследуемой территории
больничного комплекса. Для того, чтобы можно было дать
окончательный ответ о загрязненности яйцами и личинками
гельминтов
территории
исследуемого
объекта,
необходимо
многократное получение отрицательных результатов исследования.
Кроме того, необходимо обратить особое внимание на использование
более эффективных методов исследования и тщательность их
выполнения.
ОБОСНОВАНИЕ ТЕМЫ
Задача 3
В ходе лабораторного гельминтологического исследования
средней пробы, взятой на игровой площадке для детей были найдены
яйца аскарид в количестве 15 штук в пересчете на 1кг почвы. В ходе
последующего исследования по определению жизнеспособности яиц
аскарид оказалось 6 мертвых яиц. Дать санитарно-гигиеническую
оценку степени загрязненности яйцами гельминтов территории
игровой площадки для детей. Какие основные принципы
используются в практике гельминтологического исследования почвы
для определения жизнеспособности яиц гельминтов?
Решение.
Согласно существующей схеме санитарно-гигиенической
оценки почвы по общему числу яиц гельминтов на 1 кг почвы,
результаты данных исследований указывают на слабую степень
загрязненности почвы по данному показателю.
При определении жизнеспособности яиц гельминтов в ходе
исследования используют оценку по внешнему виду и по
окрашиванию яиц гельминтов.
По внешнему виду разрыв оболочек, прогиб их внутрь яйца,
пустые оболочки, вышедшая из яиц личинка, мутная плазма зародыша
– указывают на признаки мертвого яйца.
Метод окраски яиц гельминтов основан по способности живой
клетки редуцировать метиленовую синь в бесцветную лейкобазу.
Мертвая ткань не редуцирует окраску, поэтому живая клетка не
окрашивается метиленовой синью, а окрашивается ею только мертвые
клетки. При окраске живых яиц зародыш окрашивается в оранжевый, а
15
ЭТАЛОНЫ РЕШЕНИЯ ЗАДАЧ ДЛЯ УСВОЕНИЯ
УЧЕБНОГО МАТЕРИАЛА
Задача 1
При проведении гельминтологического анализа средней пробы
на территории детского сада были обнаружены жизнеспособные яйца
аскарид в количестве 3 штук в 100г почвы пробы. Дать санитарногигиеническую оценку степени загрязненности почвы на территории
детского сада. В чем могут быть причины наличия яиц гельминтов на
указанной территории? Какие меры с санитарно-гигиенической точки
зрения необходимо предпринять на исследуемом участке?
Решение
Число яиц аскарид, обнаруженных в 100г почвы исследуемой
средней пробы почвы, пересчитываем на 1кг почвы.
3х10 = 30 яиц аскарид
Согласно существующей схеме санитарно-гигиенической
оценки почвы по общему числу яиц гельминтов на 1кг почвы, почву
на территории детского сада с количеством 30 яиц гельминтов на 1кг
почвы следует отнести к умеренно загрязненной почве (от 10 до 100
яиц гельминтов на 1кг почвы).
Причиной наличия яиц гельминтов на территории детского сада
является, безусловно, расположенный близко источник фекального
загрязнения
почвы.
Необходимо
провести
дополнительные
гельминтологические исследования почвы с целью обнаружения
такого источника. С санитарно-гигиенической точки зрения
необходимо установить источник фекального загрязнения произвести
обеззараживание территории детского сада.
Задача 2
В ходе гельминтологического исследования средней пробы
почвы,
взятой
на
территории
больничного
комплекса,
осуществляемого в порядке текущего санитарного надзора, яйца
гельминтов не были обнаружены в пробе почвы. Можно ли считать, с
санитарно-гигиенической точки зрения, территорию больничного
комплекса
чистой?
Какие
дополнительные
мероприятия
осуществляются в таких случаях?
Решение.
14
Большую эпидемиологическую роль играет почвенный фактор
в распространении гельминтозов, особенно таких, как аскаридоз и
трихоцефалез. Глисты, вызывающие эти заболевания, носят название
геогельминтов, потому что почва является той средой, в которой яйца
аскариды и власоглава созревают до инвазионной стадии и длительно
сохраняют свою жизнеспособность.
Значительное загрязнение почвы яйцами и личинками
геогельминтов
наблюдается
во
дворах
неканализованных
домовладений при отсутствии благоустроенных приёмников для
нечистот и отбросов и надлежащей схемы их очистки. Большая
загрязненность почвы яйцами геогельминтов, особенно аскарид и
власоглавов, наблюдается на полях орашения и на бороздах,
удобряемых необезвреженными нечистотами. В шахтах поверхность
почвы нередко бывает заражена инвазионными личинками
анкилостом, которые находят здесь благоприятные условия для своего
развития вследствие высокой температуры, влажности воздуха и
затемнения.
Загрязнение почвы и растительности фекалиями человека,
содержащие отдельные членики или онкосферы тениид, т.е.
ленточных глистов, может явиться причиной инвазирования крупного
рогатого скота и свиней с последующим распространением
тениаринхоза и тениоза среди населения в случае несоблюдения им
санитарных правил при получении и кулинарной обработке мясных
продуктов.
За показательные организмы санитарного состояния почвы, как
правило, принимают гельминты: аскариды, власоглав, острицы,
тенииды.
Изложенные
обстоятельства
диктуют
необходимость
проведения санитарно-гельминтологических исследований при всех
санитарных обследованиях, осуществляемых в порядке текущего
санитарного надзора, когда можно ожидать фекального загрязнения
почвы, особенно в очагах кишечной инфекций и гельминтозов.
Этот метод санитарных исследований рекомендуется применять
при обследовании территорий детских учреждений и мест игр детей,
при контроле за работой сооружений по очистке населенных мест, при
санитарном контроле мест утилизации отбросов (поля орошения,
ассенизации, участки, удобряемые сточными водами, жидкими
отбросами).
3
Изучение данной темы связано с необходимостью изучения
ряда других разделов общей гигиены: гигиены населенных мест,
гигиеной воды и водоснабжения, гигиеной питания.
Проведение гельминтологического исследования почвы требует
от студентов определенного уровня знаний из соответствующих
разделов химии, физики, микробиологии, так как методика
определения яиц и личинок гельминтов в почве основана на
проведении ряда химических реакций, физических методов
определения яиц и личинок из соответствующих растворов, а также
микробиологических методах исследования и подсчета этих
организмов.
Учитывая важность проведения гельминтологического анализа
почвы,
его
профилактическую
направленность,
будущему
санитарному врачу надо иметь такое представление о методах
гельминтологического
исследования
почвы
и
уметь
дать
квалифицированное
санитарно-гигиеническое
заключение
о
конкретной территории с целью устранения возможного загрязнения
населения гельминтами.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Ознакомить студентов с санитарногигиеническим значением гельминтологического исследования почвы;
научить методам гельминтологического исследования ее и оценке
санитарного состояния по данному показателю.
ТЕРМИНЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Санитарное состояние почвы – совокупность физикохимических и биологических свойств почвы, определяющих качество
и степень ее безопасности в эпидемиологическом и гигиеническом
отношениях.
Биологическое загрязнение почвы – составная часть
органического
загрязнения,
обусловленного
диссеминацией
возбудителей инфекционных и инвазионных болезней, а также
вредными насекомыми и клещами.
ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
Программа обследования почвы определяется целями и
задачами исследования с учетом санитарно-эпидемиологического
состояния района.
При выборе объектов, в первую очередь, обследуются почвы
территорий повышенного риска воздействия на здоровье населения
(детские дошкольные, школьные и лечебные учреждения, зоны
4
трихостронгилиды, острицы).
12.
Как
производится
оценка
результатов
гельминтологического
исследования почвы?
Санитарная
оценка
результатов
гельминтологического исследования
почвы производится по общему
числу яиц гельминтов, содержащихся
в 1 кг почвы. При сильно
загрязненной почве количество яиц
гельминтов в 1 кг почве – свыше 100;
умеренно загрязненной – 10-100;
слабо загрязненной - 1-10; чистая – 0.
13.
В чем заключается
принцип
метода
исследования почвы на
личинки гельминтов?
Это исследование рекомендуется
производить
в
районах
распространения анкилостомидозов.
200-400г
исследуемой
почвы
тщательно измельчают и размещают
равномерно на одном слое марли,
помещенной на металлическом сите с
отверстиями 1-2 мм. Сито вставляют
в стеклянную воронку, наполненную
водой, подогретой до 450С, с таким
расчетом, чтобы нижняя поверхность
почвы доходила до воды. На нижний
конец воронки надевают резиновую
трубку с зажимом и собранную таким
образом установку оставляют в покое
на 4-20 часов при комнатной
температуре. Личинки гельминтов
вследствие своей термотропности
мигрируют за это время через сито в
воду и, чтобы обнаружить их,
выпускают из воронки 50мл воды,
центрифугируют и осадок исследуют
под микроскопом.
13
10.
Основные
этапы
гельминтологического
анализа
почвы
по
усовершенствованному
методу.
Суть усовершенствованного метода
гельминтологического анализа почвы
заключается в том, что после
центрифугирования
почвы
с
раствором нитрата натрия пробирки
устанавливают в штативе и в каждую
из
них
пипеткой
осторожно
добавляют насыщенный раствор
нитрата натрия (до получения
выпуклого мениска). Затем пробирки
накрывают
предварительно
обезжиренным предметным стеклом
так,
чтобы
стекло
полностью
соприкасалось с поверхностью смеси,
без
образования
под
стеклом
пузырьков
воздуха.
Постепенно
всплывающие
яйца
гельминтов
прилипают к нижней поверхности
стекла. Через двадцать минут стекло
снимают, переворачивают нижней
стороной вверх и исследуют. Эти
операции, т.е. центрифугирование и
снятие пленки стеклом, повторяют не
менее 3 раз.
11.
Чем
отличается
усовершенствованный
метод
гельминтологического
исследования
от
классического метода
З.Г.Васильковой?
Преимущество
усовершенствованного
метода
гельминтологического исследования
почвы в сравнении с методом
З.Г.Васильковой состоит в том, что
на предметных стеклах гораздо
лучше, чем на полупрозрачных
фильтрах, видны яйца аскарид и
власоглав (стадии их развития,
признаки деформации), а также яйца
гельминтов с прозрачной бесцветной
скорлупой
(анкилостомы,
12
санитарной охраны водоемов, питьевого водоснабжения, земли,
занятые под сельхозкультуры).
Отбор, транспортирование, хранение, подготовка к анализу и
анализ проб осуществляется в соответствии с утвержденными
нормативными документами.
Для контроля санитарного состояния почв детских
дошкольных, школьных и лечебно-профилактических учреждений,
игровых площадок и зон отдыха отбор проб проводят не менее 2 раз в
год, весной и осенью. Размер пробной площадки должен быть не более
5х5 м. Отбор проб производится с глубины 0-10 см.
Точечные пробы отбирают в соответствии с ГОСТом 17.4.4.0284 «Охрана природы. Почва. Методы отбора и подготовки проб почвы
для химического, бактериологического и гельминтологического
анализа».
С
соблюдением
стерильности
для
санитарномикробиологического и гельминтологического анализов.
Методологические принципы отбора проб почвы при
гельминтологических исследованиях
Частота отбора проб – 2-3 раза в год. Размещение пробных
площадок в местах возможного нахождения людей, животных,
загрязнения органическими отходами. Необходимое количество
пробных площадок – на площади 100м2 одна площадка. Размер
пробных площадок 25м2 . Количество объединенных проб с одной
площадки – от 4 до 10 из 10 точечных по 20 каждая. Глубина отбора
проб послойная 0-5 см, 5-10 см. Масса объединенной пробы – 200г.
ПЛАН ЗАНЯТИЯ
1.
Организационно-вводная часть
5 мин.
2.
Разбор теоретических и практических вопросов
15 мин.
темы
занятия
путем
предварительного
выявления уровня исходных знаний студентов
3.
Объяснение и подготовка к самостоятельной
5 мин.
работе студентов, знакомство с методичкой
4.
Самостоятельная работа студентов
37 мин.
5.
Разбор и обсуждение самостоятельной работы
5 мин.
6.
Решение ситуационных задач
10 мин.
7.
Разбор ситуационных задач
8 мин.
8.
Ответы на вопросы студентов, заключение
5 мин.
преподавателя и задание к следующему занятию
5
ХРОНОКАРТА И РАСЧЕТ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЗАНЯТИЯ
Количество студентов – 12
Продолжительность занятия – 2 часа (90 мин.)
№
Методы обучения
Время
Дидактические системы
п/п
работы, 1 2 3 4 5 6 7
мин.
Количество студентов,
занятых в системе
1.
Организационно5
12
вводная часть
2.
Опрос студентов с
15
12
коррекцией
исходного уровня
знаний
3.
Объяснение
и
5
12
подготовка
к
самостоятельной
работе
4.
Самостоятельная
37
12
работа
5.
Обсуждение
5
12
результатов
самостоятельной
работы
6.
Решение
10
12
ситуационных задач
7.
Разбор
8
12
ситуационных задач
8.
Заключение
5
преподавателя
Кэ=
гельминтологического
исследования почвы по
методу
З.Г.Васильковой.
5-10г почвы, тщательно измельчают
и перемешивают (не менее 4 раз по 45мин.) при помощи стеклянных бус с
20 мл 5% раствора NаОН или КОН в
круглых центрифужных пробирках
объемом 50 мл. Затем пробирки
ставятся в центрифугу и смесь
центрифугируют в течении 1-2 мин.,
после чего избыток NаОН сливают, в
пробирки
добавляют
раствор
азотнокислого натрия (уд.вес 1,19),
тщательно перемешивают его с
почвой и центрифугируют по 2 мин.
не менее 5 раз. После каждого
центрифугирования поверхностную
пленку,
в
которой
находятся
всплывшие на поверхность яйца
глистов, снимают петлей и переносят
в
стаканчик
с
небольшим
количеством
воды.
Почву
перемешивают с тем раствором
азотнокислого
натрия,
снова
центрифугируют и вновь выделенные
яйца переносятся в тот же стаканчик
с водой. Воду в стаканчике
фильтруют через предварительные
мембранные фильтры в воронке
Гольдмана и фильтры исследуют под
микроскопом во влажном состоянии.
1 2• 1 5+ 1 2• 3 7+ 1 2•1 0+ 8• 8
= 0,75
1 2• 9 0
Проектируемый
показатель
удельного
веса
ведущих
дидактических систем на данном занятии равен 0,75.
ОБРАЗЦЫ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ И ТЕСТОВ ДЛЯ
ВЫЯВЛЕНИЯ ИСХОДНОГО УРОВНЯ ЗНАНИЙ СТУДЕНТОВ
6
11
консервирование
почвы
для
гельминтологического
исследования?
8.
9.
На каком принципе
основаны
методы
гельминтологического
исследования почвы?
Техника
проб почв в течение 1-2 дней их
можно хранить в холодильнике
несколько месяцев. Для этого пробы
помещают в широкие стеклянные
банки, периодически увлажняют их
водой и изредка перемешивают (для
улучшения аэрации). При хранении
проб
в
условиях
комнатной
температуры
их
необходимо
консервировать
3%
раствором
формалина или 1-2% раствором
соляной кислоты и хранить в
открытых кристаллизаторах или
банках.
№
Вопросы
п/п
1.
На какие группы с
эпидемиологической
точки
зрения
подразделяются
гельминты? Назовите
представителей
каждой из указанных
групп.
10
С эпидемиологической точки зрения
все гельминты подразделяются на 2
большие группы: геогельминтозы и
биогельминтозы. В распространении
обеих групп важнейшее значение
имеет
загрязнение
яйцами
гельминтов объектов внешней среды,
в частности почвы.
Возбудители
геогельминтозов:
аскариды,
власоглавы,
острицы,
анкилостомы и др. Возбудителями
биогельминтозов
являются
ленточные гельминты человека –
бычий и свиной цепень.
2.
Роль
почвы
распространении
заболеваний.
3.
Яйца гельминтов как Видовой состав обнаруживаемых яиц
показатели
тесно связан с краевой патологией.
санитарного состояния Санитарно-показательными
Методы
гельминтологического
исследования почвы основаны на
принципе диспергирования почвы (с
раствором NаОН) для изоляции яиц
гельминтов из смеси почвы с
насыщенным раствором натронной
селитры NаNО3 с большим удельным
весом
(1,39-1,40)
и
микроскопировании выделенных яиц.
выполнения Из взятой пробы почвы отвешивают
Эталоны ответов
в В
эпидемиологии
гельминтозов
загрязненная
инвазионным
материалом почва играет главную
роль. С фекалиями человека может
поступать
в
почву
огромное
количество жизнеспособных яиц
гельминтов. Так одна зрелая самка
аскариды откладывает в кишках
человека до 240000 плодотворных
яиц в сутки. Созревание яиц в почве
в
зависимости
от
условий
происходит за 10-50 суток.
С
загрязненной
почвы
яйца
гельминтов могут попадать на руки,
продукты питания, овощи, ягоды,
переноситься мухами, с пылью и др.
7
почвы
гельминтами считаются: аскариды,
власоглавы, анкилостомы.
Для
некоторых
районов,
где
отсутствуют или редко встречаются
геогельминтозы,
санитарным
показателем фекального загрязнения
может
быть
наличие
яиц
биогельминтозов: онкосфер теннид,
яиц широкого лентеца и др.
4.
Какие
факторы
благоприятствуют
развитию в почве яиц
аскарид
до
инвазионной стадии?
Созревание яиц аскарид в почве, в
зависимости от условий, происходит
в течение 10-50 суток. Для этого
требуется
доступ
кислорода,
температура в пределах 12-380,
определенная
влажность,
затемненные от солнца участки. Яйца
аскарид
переносят
повторное
замораживание и оттаивание и
поэтому, перезимовав, сохраняют
свою жизнеспособность. Почва в
большинстве случаев очищается от
яиц аскариды в срок от 10,5 до 14
месяцев.
5.
Какая
температура
является критической,
вызывающей
гибель
яиц аскарид?
Яйца аскарид погибают от действия
ультрафиолетовых лучей солнца,
высыхания почвы при температурах
ниже -300С и выше +500С. В
местностях с засушливым жарким
климатом и в условиях Севера яйца
аскарид быстро погибают в почве.
6.
Методика отбора проб Пробы почвы для исследования
для
берут отдельно с поверхности и с
8
гельминтологического
исследования.
7.
Как
глубины 2-3 см, а на огородах и
полях орошения – с поверхности и с
глубины до 20 см.
Для
определения
степени
выживаемости яиц гельминтов в
различных
микроклиматических
условиях пробы с поверхностных
слоев почвы берут с освещенных
солнцем участков и с затемненных.
Пробы отбирают в зависимости от
глубины шпателем, лопатой, буром.
Пробы собирают в целлофан или
банки с крышками, каждую пробу
нумеруют, датируют с указанием
места ее взятия.
С каждого исследуемого участка
почву берут из нескольких мест (5-10
точек) по диагонали в одну общую
пробу (250-300г). Почву каждой
точки пробы перемешивают и при
слабом ее загрязнении исследуют в
количестве 100г, а при интенсивном
загрязнении – в количестве 20-30г.
Средние пробы берут отдельно у
входа в дом, за домом, у колодца,
около уборной, помойной ямы, в
помещениях для скота.
При изучении степени загрязнения
почвы двора в целом все пробы,
взятые на отдельных участках,
можно соединить в одну среднюю
пробу.
производится При
невозможности
9
исследования