Федерельное агенство по здравоохранению и социальному развитию ГОУ ВПО «Ижевская государственная медицинская академия» Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Методические рекомендации составлены старшим преподавателем кафедры микробиологии к.м.н. Соковниной С.В. ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ КИШЕЧНЫЕ ИНФЕКЦИИ МАЛЫЙ ПРАКТИКУМ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ СТУДЕНТОВ Методическое руководство Ижевск 2006 2 Практикум для самостоятельной работы Студента____________группы __________________________факультета ______________________учебного года ________________________________________ ( Ф. И. О.) Преподаватель__________________________ 3 ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 1 ТЕМА: Материал и методы исследования. Возбудители бактериальных и кишечных инфекций: эшерихии и шигеллы. ЦЕЛЬ: Научиться дифференцировать патогенные и непатогенные энтеробактерии, усвоить микробиологическую диагностику, профилактику, лечение эшерихиозов и шигеллезов. ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ: 1. Правила забора материала для исследования и методы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний. 2. Классификация острых кишечных инфекций. 3. Общая характеристика энтеробактерий. Бактерионосительство. 4. Роль кишечной палочки в норме и патологии. 5. Микробиологическая диагностика кишечных эшерихиозов. Специфическая профилактика и лечение коли – инфекции. 6. Возбудители шигеллезов: таксономия, характеристика. 7. Лабораторная диагностика дизентерии, профилактика и лечение. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА. 1. Изучить и зарисовать рост эшерихий на средах Эндо, Левина, Олькеницкого. 2. Приготовить мазок из лак (+) колоний со среды Эндо, окрасить по Граму, промикроскопировать, зарисовать. 3. Поставить ориентировочную РА для серотипирования эшерихий, зарисовать, сделать вывод. 4. Учесть результаты, зарисовать и сделать вывод по готовой развернутой РА с живой и гретой культурой ЭПКП. 5. Зарисовать морфологию шигелл, характер их роста на средах Эндо, Плоскирева, Олькеницкого. 6. Поставить ориентировочную РА для серотипирования шигелл, зарисовать, сделать вывод. 7. Оценить результат готовой РНГА при диагностике дизентерии. Зарисовать. 8. Описать иммунопрепараты для диагностики, лечения и профилактики эшерихиозов и шигеллезов. 4 Правила забора материала: 1. Кровь._________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ 2. Моча.__________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ 3. Испражнения.___________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ 4. Мокрота._______________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ ______________________________________________________ 5. Отделяемое носа.________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ ______________________________________________________ Направление в лабораторию Направляется материал ______________________________ Для___________________________________исследования Ф.И.О. больного ____________________________________ Диагноз ___________________________________________ Дата _____________ Врач ____________________________ 5 Классификация острых кишечных инфекций Собственные инф-ции Токсикоинфекции Токсикозы Характеристика семейства энтеробактерий Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства: __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства: __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ 6 Антигенная структура: __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность: __________________________________________________________ __________________________________________________________ Патогенность: __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ РОЛЬ КИШЕЧНОЙ ПАЛОЧКИ В НОРМЕ И ПАТОЛОГИИ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ _____________________ 7 ВОЗБУДИТЕЛИ ЭШЕРИХИОЗОВ. Таксономия: Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность:_____________________________________________ _________________________________________________________ Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ 8 Инкубационный период:____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Микробиологическая диагностика эшерихиозов 1. Этап. Посев испражнений на среды: 9 2. Этап. Выделение чистой культуры: 1) Определение культуральных свойств на средах: 2) РА с поливалентной колониями: 1 3) 2 3 4 О- эшерихиозной сывороткой с 10 5 6 7 8 9 10 пересев на скошенный МПА или среду Олькеницкого агглютинабельных колоний для выделения чистой культуры: 3. Этап. Изучение чистой культуры: 1) изучение роста культуры на скошенном агаре; 2) микроскопия окрашенного по Граму мазка: 3) РА с поливалентной сыворотками: и 10 типовыми О-эшерихиозными 4) изучение ферментативных свойств на средах Гисса: 5) развернутая РА с живой и гретой культурами 4. Этап. Заключение о виде. ( по результатам исследований 3 этапа). ВОЗБУДИТЕЛИ ШИГЕЛЛЕЗОВ Таксономия: Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Группа A B Вид Shigella dysenteriae Shigella flexneri C D Shigella boydii Shigella sonnei Серовар 1 - 12 1 2 3 4 5 1 – 18 11 Подсеровар 1a 1b 2a 2b 3a 3b 4a 4b 5a 5b Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность:_____________________________________________ _________________________________________________________ Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ 12 Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Микробиологическая диагностика шигеллезов 1. Этап. Посев материала на среды: 2. Этап. Выделение чистой культуры. 1) определение культуральных свойств на средах: 2) микроскопия окрашенного по Граму мазка: 13 3) пересев колоний на скошенный МПА или среду Олькеницкого 3. Этап. Изучение чистой культуры. 1) изучение культуральных и ферментативных свойств на среде Олькеницкого; 2) микроскопия окрашенного по Граму мазка. 3) изучение ферментативной активности на средах Гисса: 4) ориентировочная РА для серотипирования шигелл: - с видовыми О-шигеллезными сыворотками: - с типовыми О- шигеллезными сыворотками 4. Этап. Заключение о виде: Серологическая диагностика дизентерии - РНГА, КАП. 1. РНГА для диагностики бактерионосителей. Компоненты: 1)__________________________________________________ 2)__________________________________________________ Вывод:____________________________________________________ __________________________________________________________ 2. Кожно-аллергическая проба Цуверкалова. Постановка: 14 ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 2 ТЕМА: Возбудители брюшного тифа, паратифов А и В, кишечного иерсиниоза и кампилобактериоза. ЦЕЛЬ: Усвоить принципы диагностики, лечения и профилактики заболеваний, вызываемых сальмонеллами, иерсиниями и кампилобактериями. ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ: 1. Возбудители брюшного тифа: таксономия, характеристика, диагностика, специфическое лечение и профилактика. 2. Сальмонеллы – возбудители токсикоинфекций и внутрибольничных инфекций. 3. Возбудители кишечного иерсиниоза: таксономия, характеристика, диагностика, специфическое лечение и профилактика. 4. Кампилобактерии: таксономия, характеристика, патогенез заболевания, диагностика, специфическое лечение и профилактика. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА. 1. Изучить и зарисовать рост сальмонелл на средах Раппопорт, Эндо, висмут-сульфит агаре. 2. Зарисовать морфологию сальмонелл в окраске по Граму. 3. Изучить ферментативные свойства сальмонелл по средам Гисса. 4. Провести серотипирование сальмонелл ориентировочной РА и определить вид по таблице Кауфмана-Уайта. 5. Учесть результаты и дать заключение готовой РНГА с Viдиагностикумом на определение брюшнотифозного носительства. 6. Зарисовать морфологию иерсиний в окраске по Граму и описать дифференциальные признаки возбудителя кишечного иерсиниоза. 7. Зарисовать морфологию кампилобактерий и описать диагностику. 15 ВОЗБУДИТЕЛИ БРЮШНОГО ТИФА И ПАРАТИФОВ А И В Таксономия: Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность:_____________________________________________ _________________________________________________________ Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ 16 Инкубационный период:____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА БРЮШНОГО ТИФА 1 НЕДЕЛЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ. Бактериологический метод. 1. Этап. Кровь из вены 1 : 10 засевают на среды: Раппопорт Кауфмана Мюллера (описать состав сред) 17 2.Этап. 1) Оценка результатов роста на среде Раппопорт: - отсутствие роста сальмонелл - рост S. typhi - рост S. paratyphi 2) Пересев на среды Эндо и висмут-сульфитный агар 3. Этап. 1) Учет культуральных свойств: Эндо Висмут-сульфит агар 2) отсев колоний на скошенный МПА или среду Олькеницкого 4. Этап. Изучение чистой культуры: 1) оценка роста культуры на МПА и Олькеницкого: - рост S. typhi на среде Олькеницкого - рост S. paratyphi А или В на Олькеницкого 2) микроскопия окрашенного по Граму мазка: 18 3) посев на среды Гисса (зарисовать особенности ферментации): 4) серотипирование ориентировочной РА: Компоненты: 5) развернутая РА с живой и гретой культурой. 5. Этап. Заключение о виде. 2 НЕДЕЛЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ. Серологический метод 1. Развернутая РА – реакция Видаля, особенностью которой является использование 4 диагностикумов: S.typhi O, S. typhi H, S paratyphi A, S. paratyphi B. Применяется для обнаружения антител к данным антигенам сальмонелл. 2. РНГА с брюшнотифозными диагностикумами О, Н, Vi. РНГА с Vi-диагностикумом для выявления брюшнотифозного бактерионосительства. 19 Компоненты: 1) 2) Вывод: 3. НЕДЕЛЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ. Бактериологический метод + Серологический 1. Материал:____________________________________________ засевают на среды: 2. Серологические реакции:___________________________ _____________________________________________________ ВОЗБУДИТЕЛИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗНЫХ ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ Таксономия: (виды сальмонелл)_______________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:_____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ 20 Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение и профилактика:______________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ ВОЗБУДИТЕЛИ ВНУТРИБОЛЬНИЧНЫХ САЛЬМОНЕЛЕЗНЫХ ИНФЕКЦИЙ Таксономия: (виды сальмонелл)_______________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:_____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение и профилактика:______________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ ВОЗБУДИТЕЛЬ КИШЕЧНОГО ИЕРСИНИОЗА 21 Таксономия: Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность:_____________________________________________ _________________________________________________________ Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:____________________________________ 22 Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Лабораторная диагностика кишечного иерсиниоза 1. Этап. Материал:_____________________________________ засевают на среды:____________________________________ _____________________________________________________ и культивируют при t˚С__________________________часов. 2. Этап. Выделение чистой культуры. 1) оценка культуральных свойств на средах: 2) микроскопия окрашенного по Граму мазка: 23 3) пересев на скошенный МПА или Олькеницкого 3. Этап. Изучение чистой культуры: 1) определение культуральных и ферментативных свойств на среде Олькеницкого; 2) микроскопия окрашенного по Граму мазка; 3) дальнейшее изучение ферментативной активности на средах Гисса, определение пектиназной активности; 4) серотипирование ориентировочной РА : 4. Этап. Учет результатов. Заключение о виде. ВОЗБУДИТЕЛИ КИШЕЧНОГО КАМПИЛОБАКТЕРИОЗА Таксономия: Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ 24 __________________________________________________________ Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность:_____________________________________________ _________________________________________________________ Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ __________________________________________________________ 25 ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 3 ТЕМА: Возбудители холеры, ботулизма, протейной токсикоинфекции и стафилококкового токсикоза. ЦЕЛЬ: Усвоить особенности возбудителя, патогенеза, диагностики, лечения и профилактики данных инфекций. ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ: 1. Возбудитель холеры: таксономия, характеристика, микробиологическая диагностика, специфическое лечение и профилактика. 2. Возбудитель ботулизма: таксономия, характеристика, микробиологическая диагностика, специфическое лечение и профилактика. 3. Протейная токсикоинфекция: таксономия, характеристика, микробиологическая диагностика, специфическое лечение и профилактика. 4. Стафилококки: таксономия, характеристика, микробиологическая диагностика, специфическое лечение и профилактика. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА: 1. Изучить и зарисовать схему диагностики холеры. 2. Поставить ориентировочную РА для серотипирования холерных вибрионов. 3. Изучить и зарисовать схему диагностики ботулизма. 4. Описать и оценить РН на белых мышах при типировании ботулотоксина. 5. Изучить и зарисовать схему диагностики стафилококковой интоксикации. 6. Учесть результаты фаготипирования по определению источника стафилококковой интоксикации. 7. Разобрать и зарисовать схему диагностики протейной токсикоинфекции. 8. Оценить и зарисовать метод Динеса. ВОЗБУДИТЕЛЬ ХОЛЕРЫ Таксономия: 26 Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность:_____________________________________________ _________________________________________________________ Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:____________________________________ 27 Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ 1. Этап. Материал:____________________________________________ экспресс- диагностика бактериологический метод Методы экспресс- диагностики: 1) Темнопольная микроскопия нативных мазков. Результат: 2) Микроскопия окрашенного по Граму и фуксином мазка: 28 3) Прямая РИФ. Компоненты: Результат: 4) Ориентировочная РА с О-холерными сыворотками: Компоненты: Результат: 5) Реакция иммобилизации. Компоненты: Результат: На основании полученных результатов экспрессдиагностики дается первый предварительный ответ. Эти результаты являются ориентировочными и подтверждаются выделением возбудителя. Бактериологический метод. 1. Этап. Посев материала на среды 29 2.Этап. (через 6 часов) 1) все методы экспресс-диагностики 2) пересев на 2-ю ЩПВ 3. Этап. (через 6 часов) 1) все методы экспресс- диагностики 2) отсев колоний на скошенный ЩПА 4. Этап. Изучение чистой культуры. (через 12 часов) 1) Микроскопия нативного и окрашенного по Граму мазка. 2) Прямая РИФ. 3) Изучение ферментативных свойств. 4) Определение биовара: Тест Лизис фагами: Холерный фаг ǏV С по Мукерджи Фаг Эль - Тор Рост на агаре с полимиксином Агглютинация куриных эритроцитов Гемолиз эритроцитов барана Гексаминовый тест 30 Классический Эль-Тор 5) Определение серовара ориентировочной РА Компоненты: Результат: 5. Этап. Заключение о виде. СЕРОДИАГНОСТИКА: Применяется для выявления вибрионосителей и оценки напряженности иммунитета. РНГА. Для выявления вибрионосителей. Компоненты: Вывод: ВОЗБУДИТЕЛЬ БОТУЛИЗМА Таксономия: Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ 31 Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность:_____________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ 32 ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА БОТУЛИЗМА Материал:____________________________________________ Серологический Бактериологический Серологический: РН на белых мышах для ботулотоксина и определения его типа (зарисовать) обнаружения Вывод: Бактериологический. 1. Этап. Материал засевают на среды:__________________ _____________________________________________________ прогревают 1 час t 80ºC не прогревают Культивируют_________________________________________ 2. Этап. 1) оценка роста на средах______________________ _____________________________________________________ 2) микроскопия мазка окрашенного по: Граму 33 Ожешко 3) пересев на среды Китта-Тароцци и Цейсслера для выделения чистой культуры 3. Этап. Изучение чистой культуры. 1) оценка культуральных свойств: 2) микроскопия мазков по Граму и Ожешко; 3) изучение ферментативной активности; 4) РН для определения ботулотоксина и его типа. 4. Этап. Заключение о виде. ВОЗБУДИТЕЛИ СТАФИЛОКОККОВОГО ТОКСИКОЗА Таксономия: Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ 34 Токсигенность:_____________________________________________ _________________________________________________________ Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ 35 ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА СТАФИЛОКОККОВОГО ТОКСИКОЗА Материал_____________________________________________ Бактериологический Выявление энтеротоксина Бактериологический. 1. Этап. 1) Микроскопия мазка окрашенного по Граму 2) Посев на среды: 2. Этап. 1) Оценка культуральных свойств 2) Микроскопия мазка окрашенного по Граму 3)Пересев на скошенный МПА. 3. Этап. Изучение чистой культуры: 1) Оценка культуральных свойств. 2) Микроскопия мазка окрашенного по Граму. 3) Изучение ферментативной активности. 4) Выявление энтеротоксина: Реакция преципитации Биопроба на котятах - сосунках Компоненты РП: 1) 2) Постановка: 36 Вывод: 5)Определение источника инфекции методом фаготипирования: Заключение: ВОЗБУДИТЕЛЬ ПРОТЕЙНОЙ ТОКСИКОИНФЕКЦИИ Таксономия: Отдел:____________________________________ Семейство:________________________________ Род: _____________________________________ Вид: _____________________________________ Морфология:_______________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Культуральные свойства:____________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Ферментативные свойства:___________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Антигенная структура:______________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Токсигенность:_____________________________________________ _________________________________________________________ 37 Патогенез:_________________________________________________ __________________________________________________________ Источник инфекции:________________________________________ __________________________________________________________ Пути передачи:____________________________________________ __________________________________________________________ Инкубационный период:____________________________________ Клиника:__________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ Основной метод диагностики:________________________________ __________________________________________________________ Иммунитет:________________________________________________ Специфическое лечение ____________________________________ __________________________________________________________ Специфическая профилактика: ______________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ПРОТЕЙНОЙ ТОКСИКОИНФЕКЦИИ Бактериологический. 1. Этап. Материал___________________________________ 1) Микроскопия окрашенного по Граму мазка. 38 2) Посев на среды: 2. Этап. 1) Оценка роста на средах. 2) Микроскопия окрашенного по Граму мазка. 3) Выделение чистой культуры методом Шукевича 3. Этап. Изучение чистой культуры: 1) Культуральные свойства: 2) Микроскопия окрашенного по Граму мазка: 3) Изучение ферментативной активности. 4) Серотипирование ориентировочной РА: Компоненты: 5) Определение источника инфекции методом Динеса: Заключение: 39 ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 4 Тема: Коллоквиум по теме « Острые кишечные инфекции». Цель: Выявить степень усвоения студентами теоретических знаний и практических навыков по теме: « Кишечные инфекции». Вопросы для подготовки: 1. Возбудители кишечного эшерихиоза. 2. Возбудители шигеллезов. 3. Возбудители брюшного тифа и паратифов. 4. Возбудители сальмонеллезной внутрибольничной токсикоинфекциии. 5. Возбудитель кишечного иерсиниоза. 6. Возбудитель кишечного кампилобактериоза. 7. Возбудитель холеры. 8. Возбудитель ботулизма. 9. Возбудитель протейной токсикоинфекции. 10. Возбудители стафилокккового токсикоза. и Самостоятельная работа: 1. Ответить на 20 вопросов ЭВМ – контроля. 2. Отчет по практическим навыкам и умениям: - уметь приготовить микропрепараты из патологического материала и с чистых культур; - уметь дифференцировать возбудителя по морфологическим признакам; - уметь выделять чистую культуру и проводить ее идентификацию; - уметь оценивать результаты микробиологических и серологических исследований; - уметь оформлять направления на бактериологические и серологические исследования; - знать состав, получение и область применения бакпрепаратов. 40